11 mars 2016
Un dysfonctionnement hémodynamique précoce est essentiel au développement de la maladie rénale. Pourtant, les méthodologies de détection sont limitées. Les progrès récents de l’échographie offrent une option non invasive et précise pour la détection précoce des lésions rénales. Cette étude décrit une méthodologie échographique étape par étape pour détecter le dysfonctionnement rénal à l’aide d’un modèle de néphrotoxicité induite par un médicament chez le rat.
L'objectif général de cette procédure est de fournir une méthodologie échographique étape par étape pour détecter un dysfonctionnement rénal à l'aide d'un modèle de rat présentant une néphrotoxicité induite par un médicament. Cela est réalisé en positionnant d'abord la sonde d'échographie à l'aide du système de rail et en isolant l'aorte. Ensuite, l'angle de la sonde est ajusté afin d'obtenir une vue complète du rein au centre de l'écran, et l'image en mode B est enregistrée en utilisant la fréquence de rafraîchissement la plus élevée possible.
Ensuite, la fenêtre échographique Doppler couleur est ouverte pour isoler l'artère rénale et la veine rénale. Enfin, la ligne d'indication en onde pulsée ou indicateur jaune PW est utilisée pour évaluer le flux dans l'artère rénale droite et sinistore est utilisée pour recueillir les données au taux de trames le plus élevé possible. En définitive, l'imagerie échographique de haute résolution est utilisée pour montrer les modifications hémodynamiques dans le rein après une lésion rénale aiguë induite par le cisplatine.
Cette méthode peut répondre à des questions clés dans le domaine de la surveillance de la fonction rénale, comme les modifications hémodynamiques provoquées par une lésion rénale. Bien que cette méthode permette d'obtenir des informations sur l'hémodynamique rénale, elle peut également être appliquée à d'autres systèmes, tels que les modèles murins. Au jour 0, après avoir anesthésié les animaux selon le protocole décrit dans le texte et appliqué une pommade ophtalmique, utilisez une lame n°40 et une crème dépilatoire pour raser les poils du thorax.
Pendant la surveillance des signes vitaux de l'animal, configurez un système d'échographie haute résolution MS250 avec une fréquence centrale de 21 MHz connectée au port actif, et le préréglage de l'application sur rein. Placez l'animal anesthésié en position supine sur la plateforme et, à l'aide du système de rails, positionnez la sonde échographique dans l'axe médian de l'animal à un angle de 90 degrés par rapport à la ligne parasternale gauche afin d'isoler l'aorte. À partir de cette position, faites glisser la plateforme avec l'animal de sorte que la sonde soit alignée avec l'artère rénale gauche ou droite.
À l’aide des micromanipulateurs, visualisez l’artère rénale. Ajustez ensuite l’angle de la sonde en l’inclinant légèrement selon l’axe Y de la sonde afin d’obtenir une vue complète du rein au centre de l’écran. Une fois le bassinet rénal et l’artère rénale imagés, stockez les images en utilisant la fréquence d’images la plus élevée autorisée par la sonde utilisée.
Ensuite, appuyez sur la touche Doppler couleur du clavier pour activer la fenêtre acoustique Doppler couleur. Assurez-vous que la profondeur de focalisation se situe au centre du rein. Utilisez Sinistore pour enregistrer les données au taux de rafraîchissement le plus élevé possible.
Pour capturer des images en mode onde impulsionnelle ou PW, cliquez sur la touche PW afin d'afficher une ligne jaune indicatrice à l'écran. À l'aide de la touche d'angle PW, positionnez la ligne jaune dans l'artère rénale selon un angle parallèle à la direction du flux sanguin dans le vaisseau, en veillant à ce que l'angle Doppler soit inférieur à 60 degrés. Dans ce mode, la fenêtre acoustique se divise en deux sections, supérieure et inférieure.
Utilisez sinistore pour capturer l'image des formes d'onde indiquant la vitesse du flux artériel au pic de la systole et de la diastole. Après l'imagerie, placez l'animal sous une lampe chauffante dans une zone de récupération propre, en décubitus sternal. Surveillez continuellement les signes vitaux de l'animal jusqu'à un réveil complet de l'anesthésie avant de le retourner dans l'installation d'hébergement.
Vingt-quatre heures après avoir effectué l'imagerie de base, administrer une injection intrapéritonéale de 10 milligrammes par kilogramme de cisplatine en une seule dose aux animaux du groupe traitement. Administrer une solution saline normale aux animaux du groupe témoin. Selon l'horaire indiqué ici, et tout en surveillant les signes vitaux des animaux, réaliser l'imagerie par échographie comme démontré précédemment dans la vidéo.
Effectuez l'analyse des données conformément aux directives du protocole écrit. Les images présentées dans cette étude ont été prises par un seul opérateur et les données d'imagerie ont été analysées par un seul investigateur. Les résultats ont montré que les animaux traités au cisplatine présentaient une créatinine sérique comprise entre 0,5 et 2,1 au jour 6.
Le taux normal de créatinine est inférieur à 1,1. Les images échographiques offrent une sensibilité élevée par rapport aux données histologiques présentées dans les études suivantes. Au jour 6, l'histologie a révélé des motifs constants de lésions aiguës des tubules interstitiels dans les reins traités par la cisplatine, comparés à ceux des animaux traités par une solution saline normale.
En utilisant l'imagerie échographique à haute résolution pour mesurer les changements hémodynamiques dans le rein, aucune modification de la morphologie n'a été observée chez les animaux non traités par la cisplatine entre le jour 0 et le jour 6, tandis qu'une morphologie en pulsus parvus a été détectée chez les animaux traités par la cisplatine au jour 6. RI désigne l'indice de résistance et PI l'indice pulsatile. Les limites supérieures normales pour le RI et le PI sont respectivement de 0,7 et 1,15 chez le rat.
La mesure de ces indices pour évaluer les modifications hémodynamiques rénales a révélé une augmentation significative chez les animaux traités à la Cisplatine au jour 6. Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de s'assurer que l'animal présente des signes vitaux normaux sous anesthésie. Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de l'échographie rénale pour l'étude des modifications hémodynamiques suivant une lésion rénale aiguë.
Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière d'imaginer un rein en utilisant un modèle animal de petite taille d'insuffisance rénale aiguë.
Cette étude présente une méthodologie échographique détaillée pour détecter un dysfonctionnement rénal chez un modèle de rat présentant une néphrotoxicité induite par un médicament. En utilisant une imagerie par ultrasons haute résolution, la méthode vise à fournir des informations sur les modifications hémodynamiques suivant une lésion rénale aiguë.
La détection précoce des troubles hémodynamiques rénaux induits par les médicaments comble une lacune essentielle dans l'évaluation préclinique de la sécurité, où des biomarqueurs traditionnels comme la créatinine sérique évoluent plus tardivement que les modifications physiologiques. Cette approche échographique permet une détection mécanistique des risques en identifiant des altérations vasculaires avant l'apparition de dommages structurels, renforçant ainsi la fiabilité prédictive lors de l'optimisation des candidats médicaments. Pour la recherche et le développement en biopharmacie, l'intégration d'une surveillance hémodynamique non invasive améliore la continuité translationnelle et réduit l'échec en phase avancée dû à une néphrotoxicité imprévue.
Cette méthode s'inscrit dans la continuité découverte-préclinique, en améliorant spécifiquement l'identification des composés candidats et l'évaluation préclinique de la sécurité, grâce à la fourniture de biomarqueurs hémodynamiques précoces qui orientent le choix et le développement des composés.