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DOI: 10.3791/52431-v
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La co-expression des protéines est une alternative puissante à la reconstitution in vitro de complexes protéiques, et est d’une aide pour réaliser des tests biochimiques et génétiques in vivo. Ici, nous rapportons l’utilisation de la co-expression protéique chez Escherichia coli pour obtenir des complexes protéiques et pour ajuster la fréquence de mutation des cellules.
L’objectif général de l’expérience suivante est d’exprimer différentes protéines dans l’esia coli et d’évaluer leur assemblage in vivo. Ceci est réalisé en utilisant les deux plasmides compatibles, P mauvais et P bon pour co-transformer e coli top 10. Dans un deuxième temps, la souche co-transformée est cultivée à 30 degrés Celsius, puis induite à surexprimer les protéines.
Ensuite, les protéines solubles sont extraites et soumises à une filtration sur gel afin de tester l’association des protéines surexprimées. Les résultats montrent que la co-expression dans e coli est un outil efficace pour la production de complexes protéiques assemblés in vivo et est pratique pour contourner la faible solubilité des sous-unités libres Protein. L’expression de Coex est un outil puissant en biochimie, permettant à la surexpression de différentes protéines dans des cellules uniques de revenir en arrière.
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