Name: Utilisation de la souris des cellules tumorales mammaires pour enseigner Biologie Concepts de base: un module de laboratoire simple (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-06-18T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 39 s
Description: Apprenez la culture cellulaire animale pour explorer les effets de la chimiothérapie sur les cellules tumorales mammaires. Ce module de laboratoire permet aux étudiants de comparer les méthodes de comptage et d'évaluer la viabilité cellulaire.

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Ce travail est soutenu par la Fondation Joseph Alexander, le prix de recherche de premier cycle de l’ASBMB, 2013-2014, et une bourse de science, Marymount Manhattan College, 2012-2013.

<ol><li>Hammamieh, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Students+investigating+the+antiproliferative+effects+of+synthesized+drugs+on+mouse+mammary+tumor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biol+Educ%22%5BJournal%5D)">Students investigating the antiproliferative effects of synthesized drugs on mouse mammary tumor cells.</a> Cell Biol Educ. 4 (3), 221-234 (2005).</li>
<li>Sykes, J. A., Whitescarver, J., Briggs, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Observations+on+a+cell+line+producing+mammary+tumor+virus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Natl+Cancer+Inst%22%5BJournal%5D)">Observations on a cell line producing mammary tumor virus.</a> J Natl Cancer Inst. 41 (6), 1315-1327 (1968).</li>
<li>Palombi, P. S. J., Snell, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Learning+about+Cells+as+Dynamic+Entities%3A+An+Inquiry-Driven+Cell+Culture+Project%5BTitle%5D)+AND+%22Bioscene%3A+Journal+of+College+Biology+Teaching%22%5BJournal%5D)">Learning about Cells as Dynamic Entities: An Inquiry-Driven Cell Culture Project.</a> Bioscene: Journal of College Biology Teaching. 33, 27-33 (2008).</li>
<li>Ledbetter, M. L. S., Lippert, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glucose+Transport+in+Cultured+Animal+Cells%3A+An+Exercise+for+the+Undergraduate+Cell+Biology+Laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biology+Education%22%5BJournal%5D)">Glucose Transport in Cultured Animal Cells: An Exercise for the Undergraduate Cell Biology Laboratory.</a> Cell Biology Education. 1 (3), 76-86 (2002).</li>
<li>Weaver, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiac+Cells+Beating+in+Culture%3A+A+Laboratory+Exercise%5BTitle%5D)+AND+%22American+Biology+Teacher%22%5BJournal%5D)">Cardiac Cells Beating in Culture: A Laboratory Exercise.</a> American Biology Teacher. 69, 407-410 (2007).</li>
<li>Marion, R. E., Gardner, G. E., Parks, L. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiweek+cell+culture+project+for+use+in+upper-level+biology+laboratories%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Physiology+Education%22%5BJournal%5D)">Multiweek cell culture project for use in upper-level biology laboratories.</a> Advances in Physiology Education. 36, 154-157 (2012).</li>
<li>Mozdziak, P. E. P., James, N., Carson, S. usanD. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Introductory+Undergraduate+Course+Covering+Animal+Cell+Culture+Techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Biochemistry+and+Molecular+Biology+Education%22%5BJournal%5D)">An Introductory Undergraduate Course Covering Animal Cell Culture Techniques.</a> Biochemistry and Molecular Biology Education. 32 (5), 319-322 (2004).</li>
<li>Anderson, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAnderson%2C+LW+%22A+taxonomy+for+learning%2C+teaching+and+assessing%3A+A+revision+of+Bloom%27s+Taxonomy+of+educational+objectives+%28Complete+Edition%29%22">A taxonomy for learning, teaching and assessing: A revision of Bloom's Taxonomy of educational objectives (Complete Edition)</a>. , Longman, London, England. (2001).</li>
<li>Centers for Disease Contol and Prevention. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Appendix+A+-+Primary+Containment+for+Biohazards%3A+Selection%2C+Installation+and+Use+of+Biological+Safety+Cabinets%22">Appendix A - Primary Containment for Biohazards: Selection, Installation and Use of Biological Safety Cabinets</a>. , (2014).</li>
<li>Davis, J. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aDavis%2C+JM+%22Basic+Cell+Culture%3A+A+Practical+Approach%22">Basic Cell Culture: A Practical Approach</a>. , 2nd edn, Oxford University Press. Oxford, UK. (2002).</li>
<li>Algra, A. M., Rothwell, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+regular+aspirin+on+long-term+cancer+incidence+and+metastasis%3A+a+systematic+comparison+of+evidence+from+observational+studies+versus+randomised+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Oncol%22%5BJournal%5D)">Effects of regular aspirin on long-term cancer incidence and metastasis: a systematic comparison of evidence from observational studies versus randomised trials.</a> Lancet Oncol. 13 (5), 518-527 (2012).</li>
<li>Anand, P., Sundaram, C., Jhurani, S., Kunnumakkara, A. B., Aggarwal, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curcumin+and+cancer%3A+an+%27old-age%27+disease+with+an+%27age-old%27+solution%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Curcumin and cancer: an 'old-age' disease with an 'age-old' solution.</a> Cancer Lett. 267 (1), 133-164 (2008).</li>
<li>Ararat, E., Sahin, I., Altundag, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+behind+the+aspirin+use+and+decreased+breast+cancer+incidence%5BTitle%5D)+AND+%22J+BUON%22%5BJournal%5D)">Mechanisms behind the aspirin use and decreased breast cancer incidence.</a> J BUON. 16 (1), 180(2011).</li>
<li>Ararat, E., Sahin, I., Altundag, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aspirin+intake+may+prevent+metastasis+in+patients+with+triple-negative+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Med+Oncol%22%5BJournal%5D)">Aspirin intake may prevent metastasis in patients with triple-negative breast cancer.</a> Med Oncol. 28 (4), 1308-1310 (2011).</li>
<li>Blandino, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metformin+elicits+anticancer+effects+through+the+sequential+modulation+of+DICER+and+c-MYC%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Metformin elicits anticancer effects through the sequential modulation of DICER and c-MYC.</a> Nat Commun. 3, 865(2012).</li>
<li>Kunnumakkara, A. B., Anand, P., Aggarwal, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curcumin+inhibits+proliferation%2C+invasion%2C+angiogenesis+and+metastasis+of+different+cancers+through+interaction+with+multiple+cell+signaling+proteins%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Lett%22%5BJournal%5D)">Curcumin inhibits proliferation, invasion, angiogenesis and metastasis of different cancers through interaction with multiple cell signaling proteins.</a> Cancer Lett. 269 (2), 199-225 (2008).</li>
<li>Burstein, D. E., Blumberg, P. M., Greene, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nerve+growth+factor-induced+neuronal+differentiation+of+PC12+pheochromocytoma+cells%3A+lack+of+inhibition+by+a+tumor+promoter%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Nerve growth factor-induced neuronal differentiation of PC12 pheochromocytoma cells: lack of inhibition by a tumor promoter.</a> Brain Res. 247 (1), 115-119 (1982).</li>
<li>Nazarali, S. A., Narod, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tamoxifen+for+women+at+high+risk+of+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Breast+Cancer+%28Dove+Med+Press%29%22%5BJournal%5D)">Tamoxifen for women at high risk of breast cancer.</a> Breast Cancer (Dove Med Press). 6, 29-36 (2014).</li>
<li>Cui, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cross-talk+between+HER2+and+MED1+regulates+tamoxifen+resistance+of+human+breast+cancer+cells%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Cross-talk between HER2 and MED1 regulates tamoxifen resistance of human breast cancer cells).</a> Cancer Res. 72 (21), 5625-5634 (2012).</li>
<li>Komm, B. S., Mirkin, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+current+and+emerging+SERMs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Steroid+Biochem+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">An overview of current and emerging SERMs.</a> J Steroid Biochem Mol Biol. 143C, 207-222 (2014).</li>
<li>Kaplan, R. M., Satterfield, J. M., Kington, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Building+a+better+physician--the+case+for+the+new+MCAT%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Building a better physician--the case for the new MCAT.</a> N Engl J Med. 366 (14), 1265-1268 (2012).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont reçu aucun soutien financier ou comparable de la part de Motic.

Un module de laboratoire est présenté qui vise à enseigner une variété de sujets en biologie cellulaire à travers les techniques avancées de culture cellulaire animale. Le module y parvient en analysant les effets d’un certain nombre de produits chimiques anti-prolifératifs sur la réplication des cellules qui modélisent le cancer du sein humain. Le test primaire s’appuie sur la technique fondamentale du comptage des cellules et introduit une nouvelle façon de compter les cellules à l’aide d’un logiciel de microscopie. Le...

Souvent, dans les cours de biologie générale de premier cycle, les sujets de la régulation du cycle cellulaire et le cancer sont abordées mais pas examinés en détail parce que la portée du contenu de ces cours laisse peu de temps pour la profondeur. En outre, les étudiants en biologie de premier cycle ne sont pas généralement exposés aux techniques de pointe associés à la culture de cellules animales. Pour aider les élèves à développer une compréhension plus profonde de ces concepts, tout en appliquant et en analysant ce qu&#39;ils ont appris, une activité de laboratoire a été développé comme une modification de l&#39;Institut Walter Reed de l&#39;armée de recherche (WRAIR) a étendu l&#39;activité du laboratoire 1. Le module de laboratoire utilise une stratégie expérimentale par étapes qui comprend les voies de signalisation cellulaire aberrante croissance et la caractérisation d&#39;un modèle de cellule cancéreuse, le développement et l&#39;exécution de méthodes de comptage des cellules, en établissant cours et les dosages de temps optimal pour le traitement de cellules avec des agents anti-prolifératifs, et l&#39;identification . L&#39;expérience permet également ouverte-ended enquête. La plupart des techniques nécessaires à cette activité peut être accompli dans un laboratoire typique de biologie-enseignement. L&#39;activité commence par les étudiants caractérisant la vitesse de la morphologie et de croissance de la lignée cellulaire de tumeur mammaire de souris (MMT), un modèle de cancer du sein humain 2. Le cancer du sein a été choisi comme le cancer du modèle en raison de sa prévalence dans la population, de la connaissance des étudiants des collèges d&#39;âge, et les données disponibles répandues. La lignée cellulaire MMT a été spécialement choisie parce qu&#39;elle est facile à obtenir, bien caractérisé, a un temps de doublement est court et facile à cultiver. En outre, les cellules MMT sont oestrogéno-dépendante qui est compatible avec la plupart des cancers du sein féminin. Les élèves identifient ensuite les voies de signalisation cellulaires aberrantes dans les cellules MMT en traitant les cellules avec des médicaments de chimiothérapie dont le mécanisme d&#39;action est bien établie.Procédé concentration des médicaments et de la durée des traitements sont variés permettant aux étudiantspour évaluer l&#39;effet de ces variables sur le taux de division cellulaire. Le dosage de cette activité clé est la détermination de la viabilité cellulaire, ce qui nécessite simplement comptage de cellules, en utilisant l&#39;une des deux méthodes. Chaque méthode dépend des compétences de microscopie fortes. Les élèves déterminent la viabilité des cellules en utilisant une norme, méthode de hémocytomètre et une méthode de photomicroscopie roman et proposent. Selon leurs constatations, ils peuvent proposer et tester des modifications à l&#39;activité. Les étudiants représentent alors leurs données et interpréter les résultats d&#39;affiner leur hypothèse et concevoir de nouvelles stratégies expérimentales. Cette activité de laboratoire est adapté pour les première année ou de niveau de deuxième année les étudiants se spécialisant dans les sciences biologiques. Il est condensé dans un module de laboratoire d&#39;une semaine qui peut être complété dans une première année, la biologie générale ou la deuxième année, cellulaire / moléculaire cours de biologie. Les compétences nécessaires pour le bon achèvement de l&#39;activité comprennent l&#39;arithmétique de base et de l&#39;algèbre, la familiarité avec un tableau de ccompétences de laboratoire de minerai (par exemple, le pipetage, solution de décisions, une technique stérile), l&#39;analyse des données, la gestion de base de la microscopie optique et l&#39;heure, ainsi que des connaissances de l&#39;instructeur de la culture cellulaire et un tableur. Réactifs nécessaires comprennent un modèle de lignée cellulaire animale de cancer (par exemple, des cellules mammaires de souris de tumeurs, de TEM 2), des agents chimiothérapeutiques (par exemple, le tamoxifène, la curcumine, la metformine, et l&#39;aspirine), trypan milieux de culture bleu et cellulaire (par exemple, de Eagle du milieu essentiel minimum ; EMEM) avec des suppléments appropriés (par exemple, des chevaux de donateurs et de sérum de veau foetal). Instruments nécessaires comprennent une lumière microscope inversé avec l&#39;attachement appareil photo numérique, ordinateur, 100 mm et 24 plaques de culture de tissu, incubateur à CO 2 (ou équivalent), enceinte de sécurité biologique (BSC; Classe II), hémocytomètre, et le logiciel de microscopie numérique. Il ya de bons exemples d&#39;activités spécifiques de laboratoire qui reposent sur la culture de cellules animales à Teach étudiants de premier cycle sur les concepts de la biologie cellulaire 3. Cependant beaucoup exigent des fournitures ou des techniques qui ne sont pas facilement accessibles (par exemple, des isotopes radioactifs, des tissus d&#39;animaux vivants, de l&#39;équipement d&#39;imagerie de pointe 1,4,5), décrivent les protocoles qui sont assez avancé (par exemple, approprié pour un cours 400 de niveau 6), ou exiger plusieurs semaines ou semestre projets longs 6,7. L&#39;activité de laboratoire décrit ici est simple et peut être réalisée en une seule semaine avec des équipements de laboratoire commun. En résumé, ce module de laboratoire introduit efficacement ou renforce les concepts de cycle cellulaire, voies de signalisation cellulaire et le cancer tout en enseignant les compétences de laboratoire de base et avancées, l&#39;analyse des données expérimentales, la méthode de culture de cellules animales et le processus scientifique. Le module de laboratoire est simple et économiquement accessible et fournit à la fois la flexibilité et la possibilité pour les questions ouvertes. L&#39;activité encourage la créativité de l&#39;étudianten fournissant un modèle de stratégie expérimentale qui agit comme un guide, mais pas une recette. Plus important encore, les satisfait d&#39;activité tous les domaines d&#39;apprentissage de la taxonomie de Bloom 8 car elle nécessite la mémoire, la compréhension, l&#39;application, l&#39;analyse, l&#39;évaluation et la création en engageant les élèves dans un processus qui les tire du manuel et dans le monde de la recherche scientifique.

<table><tbody><tr><td>Hotte de culture tissulaire</td><td>ESCO Labculture Reliant</td><td></td><td>Classe II Type A2 Armoire de sécurité biologique</td></tr><tr><td>Waterjactor CO2 Incubateur</td><td>CEDCO</td><td>Modèle 1510</td><td></td></tr><tr><td>Hémocytomètre à lignes vives</td><td>American Optical</td><td></td><td>avec deux grilles séparées</td></tr><tr><td>Motic Images Plus</td><td></td><td></td><td>Mac OSX Verison 2.0 ou supérieur</td></tr><tr><td>Gilson Pipetman</td><td>Rainin instrument co. inc</td><td></td><td>P-20D, P-200D, P-1000D</td></tr><tr><td>CK30/CK40 Microscope à</td> lumière inversée <td>Olympus</td><td></td><td>4 objectif avec caméra</td></tr><tr><td>200 &#956 ; l Pointes de pipette</td><td>MidSci</td><td>40200C</td><td></td></tr><tr><td>1 000 &#956 ; l Pointes de pipette</td><td>MidSci</td><td>AVR4</td><td></td></tr><tr><td>10 ml Pipettes sériologiques</td><td>TPP</td><td>TP94010</td><td></td></tr><tr><td>24 plaques de puits</td><td>CoStar- Tissue Culture Cluster</td><td>3524</td><td>24 puits, 16 mm de diamètre, stérilisé par rayonnement</td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution 0,4 %</td><td>Sigma</td><td>T8154</td><td>100 ml, testé en culture cellulaire non-haz</td></tr><tr><td>Bright-line Hemacytometer coverslip de rechange, non-haz</td><td>Sigma</td><td></td><td></td>Z375357</tr><tr><td>Souris Cellules tumorales mammaires (MMT)</td><td>ATCC</td><td>CCL-51</td><td></td></tr><tr><td>Eagle Minimum Essentail Medium (EMEM)</td><td>ATCC</td><td>30-2003</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>Sérum fœtal bovin</td><td>Sigma</td><td>F0926</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>Chlorhydrate de metformine</td><td>Sigma</td><td>PHR1084</td><td>500 mg</td></tr><tr><td>Tamoxifène</td><td>Sigma</td><td>T5648</td><td>poudre blanche ou blanc-jaune</td></tr><tr><td>Curmumin</td><td>Sigma</td><td>C1386</td><td>poudre jaune-orange</td></tr><tr><td>Aspirin</td><td>Sigma</td><td>A2093</td><td>répond aux spécifications de test USP</td></tr></tbody></table>

utilisation de la souris des cellules tumorales mammaires pour enseigner biologie concepts de base: un module de laboratoire simple

Using Mouse Mammary Tumor Cells to Teach Core Biology Concepts: A Simple Lab Module

Les étudiants de premier cycle en biologie doivent apprendre, comprendre et appliquer une variété de concepts et de techniques de biologie cellulaire et moléculaire en préparation à des programmes biomédicaux, supérieurs et professionnels ou à des carrières en sciences. Pour y remédier, un module de laboratoire simple a été conçu pour enseigner les concepts de division cellulaire, de communication cellulaire et de cancer par l’application de techniques de culture cellulaire animale. Ici, la lignée cellulaire de la tumeur mammaire de souris (MMT) est utilisée pour modéliser le cancer du sein. Les étudiants apprennent à cultiver et à caractériser ces cellules animales en culture et à tester les effets des agents de chimiothérapie traditionnels et non traditionnels sur la prolifération cellulaire. Plus précisément, les étudiants déterminent la concentration cellulaire optimale pour le placage et la croissance des cellules, apprennent à préparer et à diluer des solutions médicamenteuses, à identifier la meilleure posologie et le meilleur traitement des agents antiprolifératifs et à déterminer le taux de mort cellulaire en réponse à divers traitements. Le module utilise à la fois une technique standard de comptage cellulaire à l’aide d’un hémocytomètre et une nouvelle méthode de comptage cellulaire à l’aide d’un logiciel de microscopie. La procédure expérimentale se prête à une enquête ouverte, car les étudiants peuvent modifier des étapes critiques du protocole, y compris l’essai d’agents homéopathiques et de médicaments en vente libre. En bref, ce module de laboratoire exige que les étudiants utilisent le processus scientifique pour appliquer leurs connaissances du cycle cellulaire, des voies de signalisation cellulaires, du cancer et des modes de traitement, tout en développant un éventail de compétences de laboratoire, y compris la culture cellulaire et l’analyse de données expérimentales qui ne sont pas couramment enseignées dans les cours de premier cycle.

Culture de cellules MMT et comparaison des méthodes de comptage.
Des cellules tumorales mammaires de souris ont été cultivées et caractérisées avec succès (Figure 1) et une nouvelle méthode de comptage cellulaire a été mise au point à l’aide du logiciel Motic, un programme informatique associé à une caméra numérique pour microscope. Cette nouvelle méthode de comptage cellulaire a été comparée à une méthode traditionnelle utilisant un hémocytomètre (Figure 2</s...

Un module de laboratoire réalisable pour les étudiants de premier cycle en biologie qui explore des concepts cellulaires et moléculaires avancés à l’aide de la culture de cellules animales est décrit. Les étudiants cultivent, caractérisent et manipulent un modèle de cellules cancéreuses du sein en les exposant à des agents de chimiothérapie. La viabilité cellulaire est mesurée par comptage cellulaire à l’aide d’une méthode standard et d’une méthode nouvelle.

Utilisation de la souris des cellules tumorales mammaires pour enseigner Biologie Concepts de base: un module de laboratoire simple

Undergraduate biology students are required to learn, understand and apply a variety of cellular and molecular biology concepts and techniques in ...

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Nous décrivons une méthode d'imagerie de la réponse à un traitement...

Vivez l&#39;imagerie des réponses de drogues dans le microenvironnement des tumeurs dans les modèles murins de cancer du sein

Imagerie time-lapse est utilisé pour évaluer le comportement des principaux pré-néoplasiques des cellules épithéliales mammaires issues de modèles de souris génétiquement modifiées de risque de cancer du sein afin de déterminer s'il existe des corrélations entre certains paramètres comportementaux et génétiques distinctes des lésions.

Imagerie time-lapse de primaires prénéoplasiques cellules épithéliales mammaires issues de modèles de souris génétiquement modifiées de cancer du sein

Le cancer est une maladie complexe qui est influencé par les tissus entourant la tumeur ainsi que locale pro- et anti-inflammatoires des médiateurs. Par conséquent, les modèles d'injection orthotropes, plutôt que sous-cutanées modèles peuvent être utiles pour étudier la progression du cancer d'une manière qui imite mieux de pathologie humaine.

Injection Orthotopique des cellules du cancer du sein dans le Fat Pad mammaire de souris pour étudier la croissance de la tumeur.

L’objectif de ce protocole est d’étudier la tumorigenèse mammaire. Avec cette technique, les tumeurs mammaires de souris sont retirées et des cellules primaires sont préparées à partir des tumeurs. Un protocole d’extraction pulmonaire est inclus pour l’étude des métastases pulmonaires. De plus, un autre protocole d’analyse des fibroblastes embryonnaires de souris à partir de l’embryon de souris est inclus.

Tumeur primaire et MEF cellule d&#39;isolement pour étudier métastases pulmonaires

Nous introduisons un modèle de cancer du sein orthotopique murin et modèle de mastectomie radicale avec la technologie de la bioluminescence pour quantifier le fardeau tumoral pour imiter la progression du cancer du sein humain.

Génération d’un modèle de Cancer du sein métastatique orthotopique murin et effectuant une mastectomie radicale Murine

Ici, nous présentons un protocole visant à implanter des cellules cancéreuses du sein dans les coussinets adipeux mammaire de manière simple, façon invasive et facile à manipuler, moins et ce modèle murin orthotopique breast cancer avec un environnement approprié coussinets adipeux mammaire peut être utilisé pour étudier divers aspects de la cancer.

Orthotopique l’Injection de cellules cancéreuses du sein dans les coussinets adipeux mammaire de souris

Le but de ce protocole est de décrire une nouvelle approche de modélisation de cancer du sein basée sur l'injection intraductale de l'adénovirus Cre-exprimant dans les glandes mammaires de souris. Cette approche permet à la fois la manipulation de type cellulaire et d'organe d'événements oncogènes d'une manière contrôlée temporellement.

Modélisation du cancer du sein par injection intraductale d'adénovirus exprimant la cre dans la glande mammaire de souris

L'exemple d'invasion cellulaire in vitro est utilisé pour mesurer le potentiel de la métastes du cancer en quantifiant le potentiel cellulaire d'invasion et de migration à l'aide d'inserts de culture cellulaire contenant de la matrice protéique. Les cellules sont mises au défi de migrer à travers la matrice protéique et une membrane poreuse, vers un chimioattractant, puis quantifiées par microscopie légère.

L'utilisation de cellules de tumeur mammaire de souris dans un analyse d'invasion in vitro comme mesure du comportement cellulaire oncogène

Le présent protocole décrit l’injection intracanalaire de vecteurs viraux via la tétine pour délivrer des gènes d’intérêt dans les cellules épithéliales mammaires.

In vivo Livraison de gènes dans des cellules épithéliales mammaires de souris par injection intracanalaire mammaire

L’application des résultats de la microscopie intravitale est mise à l’épreuve par sa faible profondeur de pénétration dans les tissus. Nous décrivons ici un modèle de souris à chambre de fenêtre dorsale qui permet le co-enregistrement de la microscopie intravitale et des modalités d’imagerie cliniquement applicables (par exemple, CT, IRM) pour une corrélation spatiale directe, rationalisant potentiellement la traduction clinique des résultats de la microscopie intravitale.

Modèle murin de tumeur à chambre fenêtre de pli cutané dorsal pour la microscopie intravitale combinée et l’imagerie par résonance magnétique dans la recherche translationnelle sur le cancer

Ce protocole décrit les méthodes de culture, de manipulation et d’analyse des CAF murins, y compris les essais fonctionnels in vitro/in vivo , la transcriptomique et l’analyse informatique. De plus, il décrit une plate-forme Web développée pour analyser les transcriptomes accessibles au public de composants stromaux et épithéliales micro-disséqués par capture laser à partir d’une collection de tumeurs cancéreuses du sein humain.

Fibroblastes associés au cancer provenant de tumeurs mammaires de souris comme outils pour les études moléculaires et computationnelles

Apprenez la culture cellulaire animale pour explorer les effets de la chimiothérapie sur les cellules tumorales mammaires. Ce module de laboratoire permet aux étudiants de comparer les méthodes de comptage et d'évaluer la viabilité cellulaire.

Utilisation de la souris des cellules tumorales mammaires pour enseigner Biologie Concepts de base: un module de laboratoire simple (Vidéo) | JoVE Journal

Utilisation de la souris des cellules tumorales mammaires pour enseigner Biologie Concepts de base: un module de laboratoire simple

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