Le Conseil Trou modification - Comportement, cognition et l'interaction sociale souris et des rats de mesure

L'objectif général des expériences suivantes est de mesurer le comportement inné de petits mammifères de laboratoire et d'analyser leurs capacités cognitives. Cela est réalisé en plaçant les animaux dans un plateau de trous modifié afin d'observer et de noter leur comportement inné en présence ou en l'absence de leurs congénères de cage. De plus, un objet nouveau ou familier, ou encore une pastille alimentaire, peut être placé dans l'appareil avant le test, ce qui permet de mesurer la reconnaissance d'objet ou l'inhibition de la prise alimentaire.

Une troisième application de cette méthode consiste à placer l'animal dans la version cognitive du plateau modifié, où la récompense est associée à un identifiant de couleur contrastée. Afin de mesurer les capacités cognitives du sujet testé, les résultats révèlent un spectre de comportements inconditionnés. Étant donné que cette méthode combine plusieurs dimensions comportementales au sein d'un seul paradigme, intégrant des caractéristiques issues du plateau à trous classique et du test de champ ouvert, son principal avantage est de pallier les inconvénients d'une batterie de tests en réduisant le nombre d'animaux utilisés, en évitant les effets liés à l'ordre des tests, ainsi qu'en diminuant la durée et les coûts. Les tests doivent être réalisés dans la salle d'hébergement habituelle pendant la phase sombre, période d'activité maximale de l'animal ; toutefois, aux fins de cette vidéo, les tests sont effectués en conditions de lumière vive.

Les tests comportementaux doivent être réalisés sur des animaux habitués à leur environnement et à la manipulation par l'expérimentateur. Placer la planche contenant les cylindres au centre de la boîte expérimentale. Ensuite, positionner une lampe de scène au-dessus de la planche afin de créer un contraste d'intensité lumineuse entre la planche et la boîte, et d'augmenter le caractère aversif de la planche.

Pour commencer, placez l'objet familier dans l'appareil à deux centimètres d'un objet nouveau, dans le coin opposé au point de départ. Ensuite, retirez l'animal à tester de sa cage d'origine et placez-le face au mur dans un coin précis de l'appareil. Laissez l'animal explorer librement pendant environ cinq minutes.

Un observateur expérimenté doit évaluer les paramètres comportementaux à l’aide d’un logiciel d’analyse comportementale. Utilisez les paramètres énumérés dans ce tableau et mesurez également le temps que l’animal met pour s’approcher de l’objet nouveau et familier, ou de l’aliment nouveau et familier. Nettoyez l’appareil avec de l’eau du robinet et une serviette en papier après chaque essai.

Afin d'éviter un biais fondé sur les indices olfactifs, placer les congénères dans le compartiment de groupe pendant 10 à 30 minutes avant de tester l'animal expérimental, afin de permettre une habituation. Ensuite, placer l'animal expérimental dans le compartiment de test et lui permettre d'explorer librement la planche entière modifiée pendant cinq minutes, ou pendant la durée requise par votre propre protocole. Là encore, faire évaluer en direct par un observateur expérimenté les paramètres comportementaux à l'aide d'un logiciel d'analyse comportementale, en utilisant les paramètres énumérés dans le tableau 1, comme précédemment.

Avant de commencer cette expérience, familiarisez les animaux avec une récompense très appétissante. Ici, un morceau d'amande est utilisé. Offrez la récompense à l'aide de pinces dans la cage d'origine une fois par jour pendant deux jours consécutifs avant l'expérience, puis insérez une cloison afin de réduire la taille de la boîte à 50 par 50 centimètres.

Pour le test, placer les souris sur une planche plus petite située au centre de la boîte. Ce schéma illustre l'agencement de la planche à trous modifiée. Ensuite, parfumer les 10 cylindres avec une odeur attractive pour les animaux, telle que la vanille, et appâter tous les cylindres avec une récompense placée sous une grille afin qu'elle ne puisse pas être retirée.

Des cylindres Q3 avec un anneau coloré qui contraste avec le PVC et appâter ces cylindres avec une récompense amovible. Placer à nouveau l'animal dans le même coin de l'appareil et faire évaluer en direct par un observateur expérimenté. Les paramètres comportementaux à l'aide d'un logiciel d'évaluation comportementale.

Measurez les paramètres énumérés dans le tableau deux, en plus de ceux précédemment indiqués dans le tableau un, à l'exception des paramètres liés à la reconnaissance d'objets ou à l'inhibition de la prise alimentaire. Effectuez quatre essais d'entraînement par jour avec un intervalle inter-essai constant jusqu'à ce qu'un temps constant pour la collecte des trois morceaux d'amande soit établi. Nettoyez l'appareil avec de l'eau du robinet et une serviette en papier après chaque essai afin d'éviter un biais fondé sur des indices olfactifs lors du test de l'apprentissage par inversion.

Une fois l'animal entièrement entraîné, présentez le signal et placez l'appât dans trois cylindres différents, ou dans autant de cylindres différents que requis par votre propre protocole, puis soumettez l'animal au nombre d'essais requis. Les quatre premières images montrent les résultats du paradigme de test cognitif mesurant le fonctionnement cognitif de souris C57BL/6J ayant subi une hypoxie-ischémie cérébrale légère, étiquetée HI 45, une hypoxie-ischémie sévère, étiquetée HI 75, et des souris témoins sham. Ce graphique représente la latence moyenne nécessaire pour terminer les quatre essais d'une journée de test.

Ce graphique montre le nombre de retours vers un trou appâté chaque jour de test. Une mesure des erreurs de mémoire à court terme. Ici, les visites aux trous non appâtés sont indiquées.

Il s'agit d'une mesure des erreurs de mémoire à long terme. Ici, les données concernant le nombre d'erreurs d'omission sont présentées. Une erreur d'omission est définie comme le nombre de cylindres appâtés non visités.

Pour confirmer que le groupe I 45 ne présentait aucun trouble cognitif, ce groupe a été comparé aux témoins faux opérés. Dans une tâche de renversement, les trois trous appâtés ont été attribués à trois cylindres différents, et les animaux ont été testés sur quatre essais. L'effet de renversement devient apparent lorsqu'on compare le dernier essai de la première étape avec le premier essai de l'étape de renversement.

Cette image montre la latence pour terminer l'essai chez les deux groupes, et un effet thérapeutique global net est évident. Cela signifie qu'il existe une flexibilité cognitive altérée dans le groupe HI 45, qui a pu être détectée à l'aide du plateau modifié avec la tâche d'inversion. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment utiliser le plateau modifié dans les versions générale et cognitive.