Name: Test pour Odeur discrimination et laccoutumance chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-05-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 41 s
Description: Découvrez le test d'habituation/dishabituation aux odeurs pour évaluer la fonction olfactive chez la souris. Cette méthode permet de mesurer la discrimination entre odeurs sociales et non sociales.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ce travail est soutenu par une subvention du Conseil de recherche de l’Université Baylor et par une subvention de recherche de la Fondation pour l’épilepsie.

Les souris mâles adultes utilisés dans l&#39;expérience suivante ont été générées et logés à l&#39;Université Baylor à une température ambiante de 22 ° C, avec une lumière de 14 h et 10 h foncé (20:00-06h00 h) cycle diurne. Les souris ont reçu un accès ad libitum à la nourriture et de l&#39;eau. Toutes les procédures aux souris étaient en conformité avec les Instituts nationaux de la santé Lignes directrices pour le soin et l&#39;utilisation des animaux de laboratoire et le protocole des animaux a été approuvé par l&#39;Université Baylor de protection des animaux et l&#39;utilisation Comité. Les souris ont été testés en fin de matinée / début d&#39;après midi. Pour toutes les procédures ci-dessous l&#39;enquêteur doivent porter des gants pour éliminer les odeurs et éviter la contamination. 1. Préparation des odeurs non-sociaux <ol><li> Préparer les odeurs non-sociaux fraîches chaque jour de test. Note: L&#39;enquêteur doit utiliser des gants pour préparer les odeurs. <ol><li> Remplissez 3 tubes de centrifugation avec 10 ml d&#39;eau chacun. </li><li> Pipette 100 pi d&#39;extrait de banane dans un 15 ml &amp; #160; tube conique et 100 ul de l&#39;extrait d&#39;amande dans un deuxième tube conique de 15 ml d&#39;une dilution à 1: 100. Remarque: Le troisième tube de 15 ml ne contenir de l&#39;eau. </li></ol></li></ol> 2. Préparation des odeurs sociaux <ol><li> Préparer les odeurs fraîches sociaux sur les essais du matin se produira. Obtenir odeurs sociaux de deux cages qui ne l&#39;ont pas été nettoyés pendant au moins trois jours et contenir un nombre égal de souris. Obtenir odeurs sociaux de souris du même sexe que le sujet de test. Note: Ce sont pour être stocké à température ambiante et doivent être utilisées dans 4-6 heures pour maintenir l&#39;odeur forte et cohérente. <ol><li> Déterminer combien odeur sociale des cotons-tiges doivent être créés: chaque souris testée sera présenté avec trois tampons des odeurs sociale 1, et trois des odeurs sociale 2. </li><li> Préparer odeurs sociaux en essuyant un coton-tige en zigzag à travers le fond d&#39;une cage sale. Secouez toute la literie excès accroché à la pointe. </li><li> tampons de magasins dans de grandes jarres en verre à couvercle ou dans des béchers couverts avec du parafilm. Désigner un conteneur pour l&#39;odeur sociale 1 et un second pour l&#39;odeur sociale 2. </li></ol></li><li> Maintenir cages de source des odeurs à l&#39;extérieur de la salle d&#39;essais expérimentaux. </li></ol> 3. acclimatation de la souris test <ol><li> Mettez des gants et peser la souris pour être testé et placer individuellement dans une cage propre avec un couvercle métallique sur le dessus et la bouteille d&#39;eau éliminée. </li><li> Laisser la souris pour acclimater à la nouvelle cage pendant 45 min dans une autre pièce que la salle d&#39;examen. Assurez-vous qu&#39;il n&#39;y a pas d&#39;odeurs inhabituelles ou des bruits dans la chambre. </li><li> Comme test prend environ 45 min, décaler les temps d&#39;acclimatation en mettant la prochaine souris pour être testé dans une cage propre pour acclimater droit avant de tester la souris actuelle. </li></ol> 4. Préparation de la salle d&#39;essai <ol><li> Placez écouvillons frais de coton, ruban de laboratoire, les flacons contenant des tampons d&#39;odeur sociaux, les tubes de nsur-sociale odeurs, une micro-pipette, deux minuteurs, et une bouteille de déchets avec un couvercle dans la salle d&#39;examen. </li><li> Assurez-vous que la salle de test est raisonnablement exempts d&#39;odeurs, les bruits forts, et la lumière vive. Ne pas porter de Cologne ou lotions parfumées. Remarque: L&#39;observateur ne devrait pas être le chewing-gum ou des bonbons pendant la période d&#39;essai et doit essayer de limiter leur exposition à des aliments de forte odeur. </li></ol> 5. Procédure de test <ol><li> Apportez la souris acclimatés dans sa cage dans la salle d&#39;examen et de placer la cage sur le comptoir à une hauteur qui est confortable pour la visualisation en position assise. </li><li> Présenter chaque odeur 3 fois de suite pendant 2 minutes à chaque fois. Utilisez l&#39;ordre de présentation qui peut être trouvé dans le tableau 1. <ol><li> Pipette 50 ul de substance odorante dans le parfum à tester à la pointe de la coton-tige et re-cap de la source de l&#39;odeur. Soulevez le haut du fil de la cage et insérez l&#39;extrémité non parfumé, de bois de la tige dans l&#39;ouverture de la bouteille d&#39;eau, Pushing à travers la longueur de la face inférieure de la toile vers le haut. Évitez de toucher le bout de coton pour quoi que ce soit, y compris les doigts, de sorte que la contamination des odeurs est évitée. </li><li> Continuer à tirer la tige à travers l&#39;ouverture de la bouteille d&#39;eau jusqu&#39;à environ 1 pouce de l&#39;extrémité de coton pend dans la cage. Apposer la fin de l&#39;écouvillon en bois sur le côté de la cage en utilisant du ruban de laboratoire. Remarque: Veillez à ne pas laisser le couvercle retombe sur la cage, causant un bruit fort qui perturberait la souris de test. </li><li> Commencer immédiatement moment pendant 2 min. Utilisez une minuterie pour chronométrer la présentation de 2 min. Noter le temps cumulé passé renifler l&#39;odeur pendant le procès de 2 min. Comptez le comportement de reniflement de l&#39;animal à l&#39;aide d&#39;un chronomètre séparé. Sniffing active est définie lorsque le nez de l&#39;animal est orientée vers la pointe de coton avec son nez ~ 2 cm ou plus près de la pointe. </li><li> Après l&#39;achèvement de chaque essai, soulevez le couvercle de fil et enlever le coton-tige en le tirant vers le bas par l&#39;ONUderside du couvercle (ce qui évite la contamination des odeurs en empêchant la pointe de coton de toucher le fil). Sceller le tampon utilisé dans un 500 de la bouteille de déchets. </li><li> Préparer et insérez le suivant écouvillon et commencez à chronométrer. Laissez environ 1 min entre chaque intervalle entre les essais. Continuer jusqu&#39;à ce que chaque parfum a été présenté trois fois de suite, pendant 2 minutes à chaque fois. </li></ol></li><li> Une fois que la souris a terminé tous les essais, vider la bouteille de déchets contenant des tampons de coton utilisés dans une poubelle à l&#39;extérieur de la salle d&#39;essai. Retour de la souris à sa cage. </li></ol> 6. Analyse <ol><li> Analyser les données pour chaque groupe par condition de l&#39;odeur en utilisant ANOVA à deux voies suivie par Newman-Keuls ou un test similaire post hoc pour déterminer accoutumance importante (moins de temps renifler successives mêmes odeurs), et dishabitutation (plus de temps reniflant une odeur de neuf). </li></ol>

<ol><li>Doty, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Odor-guided+behavior+in+mammals%5BTitle%5D)+AND+%22Experientia%22%5BJournal%5D)">Odor-guided behavior in mammals.</a> Experientia. 42, 257-271 (1986).</li>
<li>Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+views+on+the+distinct+but+related+roles+of+the+main+and+accessory+olfactory+systems+in+responsiveness+to+chemosensory+signals+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Behav%22%5BJournal%5D)">Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in responsiveness to chemosensory signals in mice.</a> Horm Behav. 46, 247-256 (2004).</li>
<li>Keverne, E. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Importance+of+olfactory+and+vomeronasal+systems+for+male+sexual+function%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Importance of olfactory and vomeronasal systems for male sexual function.</a> Physiol Behav. 83, 177-187 (2004).</li>
<li>Gregg, B., Thiessen, D. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+simple+method+of+olfactory+discrimination+of+urines+for+the+Mongolian+gerbil%2C+Meriones+unguiculatus%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">A simple method of olfactory discrimination of urines for the Mongolian gerbil, Meriones unguiculatus.</a> Physiol Behav. 26, 1133-1136 (1981).</li>
<li>Yang, M., Crawley, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+behavioral+assessment+of+mouse+olfaction%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Simple behavioral assessment of mouse olfaction.</a> Curr Protoc Neurosci. Chapter 8 (Unit 8 24), (2009).</li>
<li>Pan, Y. W., Kuo, C. T., Storm, D. R., Xia, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inducible+and+targeted+deletion+of+the+ERK5+MAP+kinase+in+adult+neurogenic+regions+impairs+adult+neurogenesis+in+the+olfactory+bulb+and+several+forms+of+olfactory+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+ONE%22%5BJournal%5D)">Inducible and targeted deletion of the ERK5 MAP kinase in adult neurogenic regions impairs adult neurogenesis in the olfactory bulb and several forms of olfactory behavior.</a> PLoS ONE. 7, e49622(2012).</li>
<li>Wesson, D. W., Levy, E., Nixon, R. A., Wilson, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+dysfunction+correlates+with+amyloid-beta+burden+in+an+Alzheimer%27s+disease+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Olfactory dysfunction correlates with amyloid-beta burden in an Alzheimer's disease mouse model.</a> J Neurosci. 30, 505-514 (2010).</li>
<li>Fadool, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kv1.3+channel+gene-targeted+deletion+produces+%27Super-Smeller+Mice%27+with+altered+glomeruli%2C+interacting+scaffolding+proteins%2C+and+biophysics%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Kv1.3 channel gene-targeted deletion produces 'Super-Smeller Mice' with altered glomeruli, interacting scaffolding proteins, and biophysics.</a> Neuron. 41, 389-404 (2004).</li>
<li>Arakawa, H., Arakawa, K., Blanchard, D. C., Blanchard, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scent+marking+behavior+in+male+C57BL%2F6J+mice%3A+sexual+and+developmental+determination%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Scent marking behavior in male C57BL/6J mice: sexual and developmental determination.</a> Behav Brain Res. 182, 73-79 (2007).</li>
<li>Baum, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sexual+differentiation+of+pheromone+processing%3A+links+to+male-typical+mating+behavior+and+partner+preference%5BTitle%5D)+AND+%22Horm+Behav%22%5BJournal%5D)">Sexual differentiation of pheromone processing: links to male-typical mating behavior and partner preference.</a> Horm Behav. 55, 579-588 (2009).</li>
<li>Ferguson, J. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+amnesia+in+mice+lacking+the+oxytocin+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Social amnesia in mice lacking the oxytocin gene.</a> Nat Genet. 25, 284-288 (2000).</li>
<li>Yang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low+sociability+in+BTBR+T%2Btf%2FJ+mice+is+independent+of+partner+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Behav%22%5BJournal%5D)">Low sociability in BTBR T+tf/J mice is independent of partner strain.</a> Physiol Behav. 107, 649-662 (2012).</li>
<li>Best, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-associative+learning+in+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Non-associative learning in larval zebrafish.</a> Neuropsychopharmacology. 33, 1206-1215 (2008).</li>
<li>Wolman, M. A., Jain, R. A., Liss, L., Granato, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemical+modulation+of+memory+formation+in+larval+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Chemical modulation of memory formation in larval zebrafish.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. , (2011).</li>
<li>Sorge, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+exposure+to+males%2C+including+men%2C+causes+stress+and+related+analgesia+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Olfactory exposure to males, including men, causes stress and related analgesia in rodents.</a> Nat Methods. 11, 629-632 (2014).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Les résultats fournis dans le présent document sont optimales pour les souris. Les souris démontrent une réponse forte à un roman odeur, puis habituent rapidement. Une des étapes clés de cette méthode est la préparation des odeurs. L&#39;enquêteur doit prendre grand soin d&#39;isoler les odeurs un de l&#39;autre pour éviter la contamination. Un autre aspect important est la présentation du coton-tige. L&#39;enquêteur doit résoudre le meilleur emplacement de la pointe de coton de sorte que la souris peut enquêter sur la ...

Les souris sont dépendants de l&#39;olfaction pour naviguer nouveaux environnements, trouver de la nourriture, pour reconnaître d&#39;autres personnes, et le comportement sexuel 1-3. Il est essentiel que les enquêteurs d&#39;établir si oui ou non les animaux de laboratoire ont un sens de l&#39;odorat de fonctionnement avant d&#39;administrer des tests de comportement qui impliquent la nourriture, l&#39;interaction sociale, ou les odeurs destinés à obtenir une réponse de la souris. Anosmie ou de l&#39;impossibilité de faire la distinction entre les différentes odeurs, peut entraîner des faux positifs ou négatifs dans une grande variété de paradigmes comportementaux, donc la capacité d&#39;une souris pour détecter et distinguer les odeurs devraient être établis avant d&#39;autres types de tests comportementaux sont effectuées. Le test habituation / de déshabituation olfactive a été décrite pour la première dans les années 1980 4. Le test a été conçu pour être utilisé chez la souris par les Drs. Mu Yang et Jacqueline Crawley 5. Ceci est un test simple et peu coûteuse qui permet à l&#39;enquêteur de l&#39;ESTAblish qu&#39;une souris peut détecter et différencier les odeurs. En plus de tester l&#39;olfaction, ce test permet à l&#39;enquêteur d&#39;observer le comportement général de la souris et doit être fait au début d&#39;un programme de tests. Les observations qualitatives concernant la locomotion de la souris, des signes d&#39;anxiété, niveau d&#39;activité, et la réponse aux odeurs sociaux contre les odeurs de nourriture peuvent signaler de nouveaux domaines dans lesquels des tests pourrait être effectuée. Dans cet essai, des cotons-tiges trempés dans diverses odeurs sont présentés à une souris à trois reprises dans une rangée. Avec chaque présentation répétée d&#39;une odeur, la souris sera habituer à le coton-tige, en dépensant moins de temps à étudier avec chaque présentation ultérieure. Quand une nouvelle odeur est présenté, déshabituation se produit, et une souris typique passer plus de temps à enquêter sur l&#39;écouvillon, indiquant qu&#39;il peut distinguer les odeurs actuels et antérieurs 5. Ce test est administré à une souris à la fois et comprend un 45 min acclimation période de suivi de 45 min de l&#39;essai. Bien que ce test est facile à réaliser, il peut être utilisé pour étudier les questions complexes sur le système olfactif de la souris. D&#39;autres tests populaires de l&#39;olfaction, tels que le test de la nourriture enfouie, établissent simplement la présence ou l&#39;absence d&#39;anosmie. Toutefois, le critère de discrimination et d&#39;accoutumance olfactive permet à l&#39;enquêteur de déterminer qu&#39;une souris a non seulement la capacité de détecter les odeurs mais peut discriminer entre les différentes odeurs. Le motif de l&#39;habituation et déshabituation a été utilisé pour établir que les nouveaux mutants peuvent discriminer entre 6,7 odeurs. Dans une étude surprenante, Fadool et ses collègues ont utilisé des mélanges complexes d&#39;odeurs pour montrer que les souris avec délétion du gène ciblé du canal Kv1.3 sont «super smellers» qui peuvent discriminer les odeurs très similaires mieux que les souris normales 8. Lors de l&#39;examen d&#39;un nouveau modèle de souris knock-out il est utile de Establish la présence d&#39;un comportement normal pour les tâches sensorielles de base. Quand cela est fait au début d&#39;un programme de tests, la discrimination fondée sur l&#39;odeur et le test d&#39;habituation donne un enquêteur l&#39;occasion d&#39;observer des comportements inhabituels. Ces observations pourraient éviter des résultats positifs ou faussement négatifs dans des essais ultérieurs qui sont attribuables à confondre caractéristiques du mutant. Comme les chercheurs continuent d&#39;enquêter sur le comportement social la nécessité de vérifier la fonction olfactive de base devient de plus en plus importante. En plus d&#39;examiner l&#39;olfaction en lignées mutantes, ce test peut être utilisé pour répondre à des questions spécifiques telles que si un traitement pharmacologique augmente spécifiquement la réponse d&#39;un animal à des stimuli sociaux ou d&#39;odeurs si leur réponse augmente à tous les stimuli d&#39;odeurs.

<table><tbody><tr><td>Cage à souris</td><td>Allentown</td><td>Cage</td><td></td>à souris standard</tr><tr><td>Couvercle en fil métallique</td><td>Allentown</td><td>BCU Souris WBL 2500</td><td></td></tr><tr><td>Literie</td><td>Harlan</td><td>7090 Sani-Chips</td><td></td>Cotons-tiges</tr><tr><td></td><td>VWR</td><td>89031-270</td><td>Manche en bois 6"</td></tr><tr><td>Extrait de banane</td><td>McCormick</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Extrait d’amande</td><td>McCormick</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ruban de laboratoire</td><td>VWR</td><td>89098-062</td><td></td></tr><tr><td>Chronomètre</td><td>VWR</td><td>62374-000</td><td></td></tr><tr><td>Gants en nitrile</td><td>VWR</td><td>82026</td><td></td></tr><tr><td>Dispositif de chronométrage</td><td>VWR</td><td>61161-350</td><td></td></tr><tr><td>Tubes coniques de 15 ml</td><td>VWR</td><td>89003-294</td><td></td></tr><tr><td>Béchers de 2 L.</td><td>Pyrex</td><td>1003</td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Parafilm</td><td>PM-992</td><td>4" x 250'</td></tr><tr><td>Bouteille de 1 L avec bouchon</td><td>VWR</td><td>89000-240</td><td></td></tr></tbody></table>

test pour odeur discrimination et l&#39;accoutumance chez la souris

 Testing for Odor Discrimination and Habituation in Mice

Cette vidéo montre une technique pour établir la présence d’un système olfactif fonctionnant normalement chez une souris. Le test permet de déterminer si la souris peut faire la distinction entre les odeurs non sociales et les odeurs sociales, si la souris s’habitue à une odeur présentée à plusieurs reprises et si la souris démontre une désaccoutumance lorsqu’elle est confrontée à une nouvelle odeur. Étant donné que de nombreux tests de comportement social mesurent la réponse de l’animal de laboratoire à une souris familière ou nouvelle, les faux positifs peuvent être évités en établissant que les animaux peuvent détecter et discriminer les odeurs sociales. Il existe des considérations similaires dans les tests d’apprentissage, tels que le conditionnement de la peur qui utilisent l’odeur pour créer un nouvel environnement ou des indices olfactifs comme stimulus associatif. Les déficits du système olfactif nuiraient à la capacité de distinguer les contextes et de former une association avec un signal olfactif pendant le conditionnement de la peur. 
Dans le test d’habitation/déshabituation des odeurs, la souris est présentée à plusieurs reprises avec plusieurs odeurs. Chaque odeur est présentée trois fois pendant deux minutes. L’enquêteur enregistre le temps de reniflement dirigé vers l’odeur comme mesure de la réactivité olfactive. Une souris typique montre une diminution de la réponse à l’odeur au cours de présentations répétées (habituation). L’expérimentateur présente alors une nouvelle odeur qui suscite une augmentation du reniflement vers la nouvelle odeur (déshabituation). Après la présentation répétée de la nouvelle odeur, l’animal montre à nouveau une accoutumance. Ce protocole implique la présentation de l’eau, de deux odeurs non sociales ou plus et de deux odeurs sociales. En plus de réduire les facteurs de confusion expérimentaux, ce test peut fournir des informations sur la fonction des systèmes olfactifs de nouvelles lignées de souris knock-out, knock-in et conditional knockout.

Suivant le protocole décrit, les résultats ont été enregistrés à l&#39;aide de dix adultes (de jour postnatal 90-120) mâles C57BL / 6J et huit hommes FVB souche mixte fond (jour postnatal 50-70). Le test a été effectué par un seul enquêteur sur plusieurs jours. Chaque point sur les graphiques représente le temps moyen passé enquête une odeur. Lorsque le coton-tige trempé dans de l&#39;eau est d&#39;abord introduit, les souris passent beaucoup de temps à étudier ce roman objet (Figure...

Ce manuscrit décrit un protocole pour examiner le système olfactif des rongeurs. Le test d’habituation/déshabituation olfactive permettra aux enquêteurs de déterminer si une souris s’habitue à une odeur présentée à plusieurs reprises et si la souris démontre une déshabituation lorsqu’on lui présente une nouvelle odeur.

Test pour Odeur discrimination et l&#39;accoutumance chez la souris

This video demonstrates a technique to establish the presence of a normally functioning olfactory system in a mouse. The test helps determine whether the ...

L'objectif général de cette procédure est de fournir une méthode permettant d'évaluer la capacité des souris à détecter, s'habituer et se déshabituer à des odeurs tant nouvelles que sociales. Cela est réalisé en préparant d'abord une série d'odeurs nouvelles non sociales, telles que des extraits à base de fruits et de noix, ainsi que des odeurs sociales, comme la litière de cage. La deuxième étape consiste à présenter les odeurs aux souris, en commençant par trois odeurs nouvelles, suivies de deux odeurs sociales différentes.Pendant chaque essai, le comportement olfactif des souris est évalué et enregistré. En fin de compte, le test d’odorat, de discrimination et d’habitation pour l’olfaction ma est utilisé pour démontrer que l’animal peut répondre à une odeur nouvelle, s’habituer à cette odeur, puis faire preuve de désaccoutumance lorsqu’une autre odeur nouvelle ou une odeur sociale lui est présentée. Cette méthode peut être utilisée pour répondre à des questions clés dans le domaine des neurosciences, par exemple pour déterminer si l’animal ne réagit pas à un animal nouveau ou à un stimulus nouveau parce qu’il est incapable de détecter l’odeur.Commencez par préparer les odeurs non sociales en mettant des gants et en remplissant trois tubes coniques de 15 millilitres avec 10 millilitres d'eau. Ajoutez à l'aide d'une pipette 100 microlitres d'extrait d'amande dans le premier tube, 100 microlitres d'extrait de banane dans le second tube, et laissez le troisième tube contenant uniquement de l'eau pour l'utiliser comme témoin. Ensuite, procurez-vous deux cages différentes de souris qui n'ont pas été nettoyées depuis au moins trois jours et qui contiennent un nombre égal de souris du même sexe que les sujets testés.Utilisez un coton-tige pour essuyer le fond de la cage sale en effectuant des mouvements en zigzag. Secouez tout matériau d'habitat éventuellement accroché au coton-tige, puis placez-le, côté prélevé vers le bas, dans un grand bocal en verre muni d'un couvercle hermétique. Répétez ce processus jusqu'à l'obtention de trois coton-tiges provenant des deux cages pour chaque souris devant être testée.Conserver les pots à température ambiante et utiliser les écouvillons dans les quatre à six heures suivant leur prélèvement. Afin de maintenir une odeur forte et constante, déplacer les cages contenant les échantillons odorants dans une pièce située à l'extérieur de la zone de test le jour de l'expérience. Ne pas porter de parfums ou de lotions parfumés et éviter de consommer des aliments à odeur forte.Placer les odeurs sociales et non sociales préparées dans la salle de test, ainsi qu’un ruban de laboratoire, de nouveaux écouvillons en coton, un flacon de déchets muni d’un couvercle et deux minuteurs, juste avant la procédure de test. Mettre des gants propres et peser la première souris. Ensuite, transférer la souris dans une cage propre munie d’un couvercle en grillage et sans bouteille d’eau.Placer la cage dans un endroit sans odeurs ni bruits inhabituels et laisser la souris s'acclimater à la nouvelle cage pendant 45 minutes. À la fin de la période d'acclimatation, déplacer la souris dans sa cage vers la zone de test et commencer à acclimater une autre souris. Placer la souris acclimatée dans sa cage sur le plan de travail à une hauteur confortable pour l'observation en position assise.Ensuite, préparez l'une des odeurs dans l'ordre décrit dans le protocole écrit pour les odeurs non sociales, en déposant 100 microlitres de l'arôme sur l'extrémité d'un écouvillon neuf. À utiliser immédiatement avant emploi. Pour les odeurs sociales, retirez et utilisez l'un des écouvillons préparés auparavant provenant de leurs pots respectifs.Soulevez le couvercle métallique de la cage et insérez l'extrémité non parfumée du coton-tige dans l'ouverture de la bouteille d'eau par le dessous du couvercle grillagé. Évitez de toucher l'extrémité cotonneuse à quoi que ce soit, y compris vos doigts, afin d'éviter toute contamination par des odeurs. Lorsqu'il reste environ un pouce du coton-tige parfumé à l'intérieur de la cage, fixez l'extrémité en bois du coton-tige au dessous du couvercle de la cage à l'aide de ruban adhésif de laboratoire.Abaissez ensuite délicatement le couvercle sur la cage. Pour éviter de perturber la souris test, commencez immédiatement à chronométrer pendant deux minutes. À l’aide du premier chronomètre et d’une seconde montre-chronomètre, enregistrez le temps cumulé que la souris test passe à renifler l’odeur.On définit la respiration active comme l'orientation du nez de la souris vers le coton-tige lorsqu'elle se trouve à moins de deux centimètres du coton-tige. À la fin de l'essai, soulevez le couvercle métallique et retirez soigneusement le coton-tige en le tirant vers le bas à travers la face inférieure du couvercle. Pour éviter tout contact entre le couvercle et l'extrémité du coton-tige contenant l'odeur, scellez le coton-tige utilisé dans la bouteille de déchets tout en laissant la souris se reposer pendant une minute, puis préparez le prochain coton-tige donneur.Présentez chaque odeur trois fois de suite pendant deux minutes. Une fois toutes les essais terminés, videz le flacon de déchets contenant les cotons-tiges usagés dans une poubelle située à l'extérieur de la salle de test et remettez la souris dans sa cage d'origine. Chacun des odorants a d'abord été présenté à des souris de souche C 57 black six J, avec des présentations successives de chaque odeur.Les souris ont passé moins de temps à examiner l'odeur suggérant une présence. Le même schéma de détection et de discrimination peut être observé avec les odeurs sociales, tout comme avec les odeurs non sociales. Toutefois, les souris ont passé plus de temps à examiner les odeurs sociales.Lorsque les mêmes odeurs non sociales ont été présentées à un mâle de souche FVB à fond génétique mixte, un schéma similaire d'habitation a été observé. Chaque nouvelle odeur introduite provoquait une augmentation de la fréquence des reniflements actifs, qui diminuait à chaque présentation de la même odeur. Toutefois, les souris FVB présentaient un schéma différent avec les odeurs sociales, car il n'y avait pas de diminution significative du temps passé à renifler lors des expositions répétées.Les données suggèrent que les souris ne s'habituent pas à des présentations répétées des deux odeurs sociales. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment évaluer la capacité d'une souris à détecter une odeur nouvelle ou sociale, à s'habituer à cette odeur, puis à se désaccoutumer de cette odeur lorsqu'une nouvelle odeur est présentée.

testing-for-odor-discrimination-and-habituation-in-mice

Research

Recherche

JoVE Journal

Behavior

Comportement

Fondamentaux, propriétés encore unique du système olfactif des rongeurs ont conduit à son étude augmente chez les biologistes. Une évaluation relativement simple de sa fonction est alors également nécessaire. Nous décrivons ici les tests sensibles pour la caractérisation de la sensibilité olfactive et la souris de préférence.

Olfactive tests comportementaux chez la souris adulte

L’altération de la fonction olfactive est une caractéristique commune à de nombreux troubles neurodégénératifs, notamment les maladies de Parkinson, d’Alzheimer et de Huntington. Dans le présent article, nous décrivons un ensemble de tests permettant d’évaluer la discrimination et la détection de l’olfaction chez la souris qui peuvent être utilisés pour mesurer les capacités olfactives dans des modèles murins de maladies neurodégénératives.

Les tests olfactifs pour les modèles murins de maladies neurodégénératives

Nous présentons un test olfactif simple et non biaisé chez la souris. Avec ce protocole, la discrimination olfactive, la préférence, l’évitement et la sensibilité à une nouvelle odeur par rapport à l’eau peuvent être évalués en une seule séance comportementale. Cette méthode est indiquée pour un seul expérimentateur et l’analyse est basée sur un traitement vidéo assisté par ordinateur.

Simple et test olfactif pour souris assistée par ordinateur

Les anomalies cognitives de décalage attentionnel sont une caractéristique centrale de nombreuses maladies psychiatriques. Ici, nous présentons le développement d’un nouveau système automatique pour l’étude efficace des capacités de décalage attentionnel, des fonctions exécutives et d’autres capacités cognitives chez la souris avec une validité translationnelle élevée pour les études humaines.

Une opérant intra / extra-dimensionnelle Set-shift Groupe pour souris

Ici, nous formons la souris sur une tâche d’apprentissage associatif pour tester la discrimination à l’odeur. Ce protocole permet également d’études sur l’apprentissage induit par des changements structurels dans le cerveau.

Un Test objectif et reproductible d’apprentissage olfactif et de la Discrimination chez les souris

Cet article fournit une description détaillée d’un nouveau protocole de biais de jugement de souris. Les preuves de la sensibilité de cette tâche de creusement olfactif à l’état affectif sont également démontrées et son utilité dans divers domaines de recherche est discutée.

Évaluation du biais de jugement de la souris par le biais d’une tâche de creusement olfactif

Cet article fournit une description détaillée de l’expérience de test d’aliments enterrés et de discrimination sociale des odeurs pour évaluer les effets de l’exposition aux polluants environnementaux inhalés sur la fonction olfactive chez la souris.

Étude des effets des polluants environnementaux inhalés sur la fonction olfactive chez la souris

Ce protocole décrit la construction d’un olfactomètre pour des expériences de comportement olfactif go/no-go. Des instructions étape par étape, accompagnées d’images, sont fournies pour assurer la réussite de la construction de l’olfactomètre. Des informations sur le dépannage des problèmes rencontrés au cours du processus sont également incluses.

Construction d’un olfactomètre pour l’étude du comportement olfactif des rongeurs

Ici, nous présentons un protocole de test de préférence olfactive qui permet d’évaluer les biais olfactifs négatifs envers les stimuli olfactifs appétitifs et aversifs dans des modèles murins de dépression.

Un test de préférence olfactive pour mesurer les biais hédoniques olfactifs dans des modèles murins de dépression

Cet article présente un protocole pour un test de conditionnement peur contextuelle et indicé l'aide d'un système vidéo d'analyse pour évaluer l'apprentissage peur et la mémoire chez la souris.

Contextuelles et Cued conditionnement de la peur de test en utilisant un système d&#39;analyse de la vidéo chez des souris

Découvrez le test d'habituation/dishabituation aux odeurs pour évaluer la fonction olfactive chez la souris. Cette méthode permet de mesurer la discrimination entre odeurs sociales et non sociales.

Test pour Odeur discrimination et l'accoutumance chez la souris

Explorer plus de vidéos