Name: Un, test de comportement évolutives et économiques pour mesurer léthanol sédation sensibilité et la tolérance rapide dans Drosophila (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-04-15T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 28 s
Description: Apprenez à mesurer la sensibilité à l'éthanol et la tolérance rapide chez Drosophila avec ce test comportemental évolutif. Cette méthode simple permet d'étudier les comportements liés à l'éthanol et les mécanismes d'addiction.

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Ces études ont été soutenues par des subventions des National Institutes of Health, National Institute for Alcoholism and Alcohol Abuse à M.G. (P20AA017828, R01AA020634, P50 AA022537). Les auteurs remercient Jill Bettinger pour les discussions utiles et Jacqueline DeLoyht pour l’assistance technique.

1. Jour avant le test <ol><li> Recueillir les mouches dans des flacons de produits frais dans des groupes de 11 (même sexe) sous brève (1-5 min) CO 2. </li><li> Permettre aux mouches de récupérer O / N dans des flacons de produits alimentaires dans un espace à environnement contrôlé (généralement 25 ° C, 60% d&#39;humidité relative, 12 h cycle lumière / obscurité). </li><li> Préparer la solution (s) de l&#39;éthanol en diluant pur (100%) dans de l&#39;éthanol purifié (≥18 MQ) de l&#39;eau à la concentration finale (s) approprié à l&#39;essai prévu. Laisser la solution (s) pour revenir à RT O / N. Remarque: La dilution de l&#39;éthanol est exothermique. </li></ol> 2. jour de l&#39;analyse <ol><li> Pour chaque flacon de mouches à tester, préparer (i) un endroit propre, vide alimentaire flacon; ce est à dire, les tests flacon, (ii) une nouvelle fiche d&#39;acétate de cellulose, (iii) un bouchon en silicone et (iv) 1 ml de solution d&#39;éthanol (voir le tableau 3). </li><li> Préparer chambre d&#39;essai en ajustant la température à 20-25 ° C et une humidité relative de 55-65%. </li><li> Avoir un autre travailleurattribuer un code unique à chaque groupe de flacons et d&#39;enregistrer le code pour plus tard. Placez flacons codés avec des mouches dans la salle de test pour se acclimater pendant quelques minutes. </li><li> Étiqueter les flacons d&#39;essai vides pour correspondre codes sur les flacons de mouches de 2,3. </li><li> Construire un disque journal de test de copie en introduisant les codes dans les colonnes (une colonne / flacon) dans une feuille de calcul semblable au tableau 1. </li><li> Utilisation du journal de test comme un guide, organiser des flacons alimentaires codés avec des mouches et des flacons d&#39;essai vides en correspondant à des tableaux dans la salle d&#39;examen. Remarque: Un nombre maximum raisonnable de flacons à tester est 24 (ce est à dire, six séries de quatre flacons chacun). </li><li> Transfert d&#39;oiseau de flacons d&#39;aliments dans appariés flacons d&#39;essai vide / étiquetés et insérer immédiatement cellulose bouchons d&#39;acétate dans des flacons d&#39;essai jusqu&#39;à ce que la cellulose d&#39;acétate bouchons sont 2 cm en dessous de la cime des flacons. </li><li> Ci-après, traiter chaque rangée de quatre flacons comme un ensemble au quinconce des intervalles de 1 min. </li><li> Pour l&#39;évaluation du temps 0, saisir chaque flacon individuellement wième pouce et l&#39;index, appuyez doucement sur la table trois fois pour frapper les mouches au fond du flacon, attendez 30 secondes puis de compter le nombre de mouches qui sont immobiles / morts. Notez le nombre de mouches immobiles / morts pour chaque flacon au temps 0 min dans le journal de test papier. </li><li> Commencez minuterie compter en continu au temps 0 et commencer immédiatement ajoutant 1 ml d&#39;éthanol à la cellulose d&#39;acétate bouchons dans les flacons pour la première ligne / ensemble de 4 flacons. Ajouter 1 ml d&#39;éthanol aux bougies d&#39;acétate de cellulose dans les flacons à intervalles de 5 secondes dans l&#39;ordre où elles seront testés. Ajouter de l&#39;éthanol pour les bouchons d&#39;acétate de cellulose dans un mouvement circulaire de sorte que l&#39;éthanol est absorbé uniformément dans les bouchons d&#39;acétate de cellulose. Lorsque l&#39;éthanol a été ajouté à tous les quatre flacons d&#39;essai dans le jeu, insérez un bouchon de silicone dans chaque flacon pour le sceller. </li><li> Parfois, 1, 2, 3, 4 et 5 min, ajouter 1 ml d&#39;éthanol à la seconde, troisième, quatrième, cinquième et ensembles de quatre flacons sixième, respectivement. Continuer introduction de bouchons en silicone aprèsajouter de l&#39;éthanol à chaque jeu de quatre flacons. </li><li> Au moment de 6 min, tester la première série de quatre flacons en saisissant chaque flacon avec le pouce et l&#39;index, tapotant doucement sur la table trois fois pour frapper les mouches au fond du flacon, en attendant 30 secondes, puis en comptant et en enregistrant le nombre total de mouches qui sont sous sédation. Score vole comme sédatif se ils (i) se tiennent sur le plancher de la fiole, mais ne marchent pas ou (ii) se trouvent sur le dos avec ou sans battant des ailes. </li><li> Tenez chaque flacon dans l&#39;ensemble à intervalles de 5 secondes en utilisant le calendrier dans le tableau 2. </li><li> Parfois, 7, 8, 9, 10 et 11 min, de tester les deuxième, troisième, quatrième, cinquième et sixième ensembles de fioles, respectivement, comme cela se fait pour le premier ensemble. </li><li> Au moment 12 min, tester la première série de quatre flacons à nouveau comme décrit dans 2.12 et continuer à tester les deuxième, troisième, quatrième, ensembles, cinquième et sixième de flacons à 13, 14, 15, 16 et 17 minutes, respectivement. </li><li> Continuer essai mouches comme décrit dans 2.12 jusqu&#39;à ce que toutes les mouches sont sedated. </li><li> Entrez le nombre total de mouches dans chaque flacon dans le disque journal de test de copie. Censurer mouches immobiles / morts au temps 0 à partir du nombre total de mouches. </li><li> Calculer le pourcentage mouches actifs à chaque évaluation point dans le temps et que les données des placettes% mouches actifs (axe des ordonnées) en fonction du temps (axe des x). Quantifier éthanol sédation par interpolation sédation Durée 50 valeurs (ST50, le temps de 50% la sédation) du troisième ordre courbe polynomiale ou sigmoïde se adapte ou calculer l&#39;aire sous la courbe. </li><li> Compiler les données décodées de flacons et effectuer des analyses statistiques (par exemple, une analyse de la variance avec Bonferroni test de comparaison multiple) en fonction de la conception expérimentale. </li></ol>

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<li>Devineni, A. V., Heberlein, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+ethanol+responses+in+Drosophila+are+sexually+dimorphic%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Acute ethanol responses in Drosophila are sexually dimorphic.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109, 21087-21092 (2012).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Tests simples qui quantifient de manière reproductible phénotypes significatives sont d&#39;une grande valeur pour l&#39;analyse du comportement. Les travaux décrits ici traite de plusieurs aspects pratiques d&#39;un test pour mesurer la sensibilité de l&#39;éthanol de sédation et la tolérance rapide chez la drosophile. Bien que pas un objectif de ce travail, des analyses comportementales sont facilitées par le maintien de l&#39;environnement et génétique constante de fond pour les sujets de test dans une étude...

trouble de consommation d&#39;alcool (AUD) est un problème de santé dans le monde énorme (examiné en 1). Bien que les mécanismes favorisant le développement de AUD sont complexes, ces troubles ont une composante génétique importante (par exemple, 2). La grande héritabilité de l&#39;AUD et les réponses comportementales conservés à l&#39;éthanol dans de nombreuses espèces (3,4) examinés en ont généré un vif intérêt dans l&#39;utilisation des organismes modèles génétiques pour enquêter sur l&#39;implication de gènes spécifiques dans les comportements liés à l&#39;éthanol vers une meilleure compréhension de la base moléculaire de AUD. La mouche des fruits, Drosophila melanogaster, a émergé comme un organisme modèle leader pour explorer les mécanismes moléculaires génétique de comportements liés à l&#39;éthanol (examinés dans 3,4). Des études ont mis en évidence chez les mouches rôles pendant plusieurs voies de signalisation dans les réponses comportementales à l&#39;éthanol (examinés dans cinq). Curieusement, certains des gènes et les voies qui influencent responsab comportementaleses à l&#39;éthanol dans les mouches ont également été impliqués dans les comportements liés à l&#39;éthanol rongeurs et / ou AUD humain (par exemple, 6-14). La conservation des mécanismes de conduire les comportements liés à l&#39;éthanol à travers les espèces, couplés avec la suite d&#39;outils génétiques disponibles dans le système de modèle de drosophile, soulignent l&#39;utilité du modèle de la mouche des fruits pour étudier la génétique des réponses comportementales à l&#39;éthanol. Sensibilité 15,16 et la tolérance (revue dans 17) à l&#39;éthanol chez l&#39;homme est lié au développement de AUD. Ces deux réponses comportementales à l&#39;éthanol peut être modélisée en vol via une variété de tests de laboratoire (revue dans 3,4). Tous les tests de mouches connues des auteurs sont fondés sur des dépendant du temps induite par l&#39;éthanol sédation / incoordination ou la récupération en fonction du temps à partir d&#39;éthanol sédation. Dans un précédent article de notre groupe sur la génétique de la sensibilité à l&#39;éthanol et rla tolérance de apid chez la drosophile, un test de comportement à base d&#39;éthanol sédation induite vapeur de mouches a été utilisé 18. Les tests dans ce dosage a été initié en transférant adulte vivant vole sans anesthésie pour vider des flacons de produits alimentaires, le piégeage des mouches dans les flacons avec un bouchon en acétate de cellulose, l&#39;addition d&#39;éthanol à la partie supérieure (c.-à-face non volantes) de la bougie d&#39;acétate de cellulose, et sceller le flacon contenant les mouches, bouchon en acétate de cellulose et de l&#39;éthanol avec un bouchon de silicone (voir schéma de la figure S3, référence 18). Plusieurs flacons représentant différents groupes de mouches ont été évalués en parallèle, augmenter le débit de cet essai. Les flacons ont été donnés un code anonyme et expérimentateurs ont été aveuglés au groupe de traitement pour prévenir biais involontaire dans l&#39;évaluation de la sédation. Dans une expérience standard, les mouches dans des flacons ont été frappa doucement à intervalles de 6 min et, après une récupération de 30 secondes, le nombre de mouches sous sédation dans chaque flacon a été compté et converted pour cent vol actives. Les mouches absorbés vapeur d&#39;éthanol à partir de la prise d&#39;acétate de cellulose de façon dépendante du temps, entraînant des augmentations progressives dans l&#39;éthanol interne 18 et la sédation (cf de référence 18 et la figure 1A et 1B dans ce rapport). Sédation dans cet essai a été opérationnel défini comme mouches (i) permanent en l&#39;absence de la marche ou (ii) couché sur le dos avec ou sans battant des ailes. Ici, ce dosage de la sédation de l&#39;éthanol est décrite en détail, outre l&#39;optimisation opérationnelle pertinente à l&#39;utilisation, il est prévu, et le test est utilisé pour traiter la contribution d&#39;options de supplémentation alimentaire sur la sensibilité mouche de sédation.

<table><tbody><tr><td>flacons alimentaires</td><td>VWR</td><td>89092-772</td><td>étroit</td></tr><tr><td>Flugs</td><td>Genesee/flystuff.com</td><td>49-102</td> bouchon <td>étroit</td></tr><tr><td>en silicone</td><td>Fisher Scientific</td><td>09-704-1l</td><td>#4</td></tr><tr><td>éthanol</td><td>Pharmaco-Aaper</td><td>111000200</td><td>200 proof</td></tr></tbody></table>

un, test de comportement évolutives et économiques pour mesurer l&#39;éthanol sédation sensibilité et la tolérance rapide dans<em&gt; drosophila</em

An Inexpensive, Scalable Behavioral Assay for Measuring Ethanol Sedation Sensitivity and Rapid Tolerance in Drosophila

trouble de consommation d&#39;alcool (AUD) est un grave problème de santé. Malgré une forte composante héréditaire à AUD, quelques gènes ont été clairement mis en cause dans leur étiologie. La mouche des fruits, Drosophila melanogaster, est un modèle puissant pour explorer les mécanismes moléculaires sous-jacents génétique des comportements liés à l&#39;alcool et détient donc une grande promesse pour l&#39;identification et la compréhension de la fonction des gènes qui influencent AUD. L&#39;utilisation du modèle de Drosophila pour ces types d&#39;études dépend de la disponibilité de dosages qui mesurent de façon fiable les réponses comportementales de l&#39;éthanol. Ce rapport décrit un dosage approprié pour évaluer la sensibilité de l&#39;éthanol et de la tolérance rapide de mouches. la sensibilité à l&#39;éthanol mesurée dans ce dosage est influencé par le volume et la concentration d&#39;éthanol utilisé, une variété de manipulations génétiques signalés précédemment, et également la durée de vol sont logés sans nourriture immédiatement avant l&#39;essai. En revanche, l&#39;éthanol sensitivity mesurée dans ce dosage ne est pas affectée par la manipulation de la vigueur à la mouche, sexe du vol, et de suppléments de milieu de croissance avec des antibiotiques ou des levures vivantes. Trois méthodes différentes pour quantifier la sensibilité de l&#39;éthanol sont décrits, tous conduisant à des résultats de sensibilité d&#39;éthanol essentiellement indiscernables. La nature évolutive de ce test, combiné avec sa simplicité globale de set-up et relativement faible coût, le rendent approprié pour petits et grands analyse génétique à grande échelle de la sensibilité de l&#39;éthanol et de la tolérance rapide chez la drosophile.

Les données brutes à partir de ce dosage de l&#39;éthanol sédation est le nombre de mouches qui sont sédation en fonction de la vapeur d&#39;éthanol temps d&#39;exposition. Les données brutes sont converties au pourcentage vol actif en fonction du temps (données primaires, les figures 1A, B, D - F). Sensibilité à la sédation éthanol à partir des données primaires peut être quantifiée comme sédation Temps 50 (ST50), le temps nécessaire pour 50% des mouches pour devenir sous sédation ou A...

Des tests simples pour mesurer la sensibilité à l’éthanol et la tolérance rapide chez la drosophile facilitent l’utilisation de cet organisme modèle pour étudier ces comportements importants liés à l’éthanol. Ici, un test relativement simple et évolutif pour mesurer la sensibilité à l’éthanol et la tolérance rapide chez les mouches est décrit.

Un, test de comportement évolutives et économiques pour mesurer l&#39;éthanol sédation sensibilité et la tolérance rapide dans<em&gt; Drosophila</em

Alcohol use disorder (AUD) is a serious health challenge. Despite a large hereditary component to AUD, few genes have been unambiguously implicated in ...

L'objectif général de l'expérience suivante est d'évaluer la sensibilité à la sédation par l'éthanol chez les mouches à fruits. Cela est réalisé en plaçant les mouches dans des tubes et en les exposant à de la vapeur d'éthanol. La deuxième étape consiste à déterminer le nombre de mouches sédentées dans chaque tube à des intervalles réguliers, jusqu'à ce que toutes les mouches soient sédentées.Ensuite, le point temporel est interpolé. Lorsque 50 % des mouches sont sédatées pour chaque flacon, les résultats indiquent l'indice du temps nécessaire pour séder les drosophiles à l'éthanol. Cette procédure sera réalisée aujourd'hui par Simran Sindu, une étudiante de mon laboratoire. Pour commencer l'expérience, collectez les mouches dans des flacons contenant un milieu frais, par groupes de 11 individus du même sexe, en utilisant un maximum de cinq minutes de CO2, puis laissez les mouches se rétablir toute la nuit dans des flacons contenant du milieu, placés dans un espace aux conditions environnementales contrôlées.Préparer une solution d'éthanol en diluant de l'éthanol pur à 100 % dans de l'eau purifiée jusqu'à une concentration finale de 85 %. Laisser la solution revenir à la température ambiante toute la nuit avant le test. Préparer un flacon alimentaire propre et vide, qui servira de flacon de test. Prévoir un nouveau bouchon en acétate de cellulose, un bouchon en silicone et un millilitre de solution d'éthanol pour chaque flacon de mouches à tester. Régler la température ambiante entre 20 et 25 degrés Celsius et l'humidité relative entre 55 et 65 %. Désigner un autre opérateur pour attribuer un code unique à chaque groupe de flacons et enregistrer ce code pour une utilisation ultérieure. Placer les flacons codés contenant les mouches dans la salle de test afin qu'ils s'acclimatent pendant quelques minutes. Ensuite, étiqueter les flacons de test vides de manière à ce que leurs codes correspondent à ceux des flacons de mouches.Construire un journal d'essai papier en entrant les codes dans des colonnes, une colonne par flacon, dans un tableur. En utilisant le journal d'essai comme guide, disposer les flacons alimentaires codés contenant des mouches et les flacons d'essai vides en séries correspondantes dans la salle de test, puis transférer les mouches des flacons alimentaires vers les flacons d'essai appariés et étiquetés, une par une.Insérez ensuite immédiatement des bouchons en acétate de cellulose dans les tubes d'essai jusqu'à ce que les bouchons en acétate de cellulose se situent à deux centimètres en dessous des extrémités des tubes. Pour l'évaluation au temps zéro. Saisissez chaque tube individuellement entre le pouce et l'index.Tapotez doucement la table trois fois pour faire tomber les mouches au fond du flacon. Attendez 30 secondes et comptez le nombre de mouches immobiles ou mortes. Notez le nombre de mouches immobiles ou mortes pour chaque flacon à chaque instant.Zéro minute dans le journal d'essai sur support papier. Démarrer le chronomètre à l'instant zéro et ajouter immédiatement un millilitre d'éthanol à l'acétate de cellulose. Agiter en mouvement circulaire à des intervalles de cinq secondes pour le premier ensemble de quatre fioles, dans l'ordre.Ils seront testés une fois que l'éthanol aura été ajouté aux quatre flacons d'essai du jeu. Insérez un bouchon en silicone dans chaque flacon pour le sceller à 1, 2, 3, 4 et cinq minutes. Ajoutez un millilitre d'éthanol respectivement au deuxième, troisième, quatrième, cinquième et sixième jeu de quatre flacons.Continuer à insérer des bouchons en silicone après avoir ajouté de l'éthanol à chaque série de quatre flacons LS toutes les six minutes. Tester la première série de quatre flacons en tenant chaque flacon entre le pouce et l'index et en tapotant doucement trois fois sur la table afin de faire tomber les mouches au fond du flacon. Attendre 30 secondes, puis compter et noter le nombre total de mouches sédatées.Considérez les mouches comme sédentaires si elles, premièrement, se tiennent au fond du flacon mais ne marchent pas, ou deuxièmement, sont couchées sur le dos, avec ou sans battement d'ailes. Manipulez chaque flacon du lot à des intervalles de cinq secondes selon ce programme aux temps 7, 8, 9, 10 et 11 minutes.Tester respectivement la deuxième, troisième, quatrième, cinquième et sixième série de tubes comme effectué pour la première série à 12 minutes. Retester la première série de quatre tubes et continuer à tester la deuxième, troisième, quatrième, cinquième et sixième série de tubes à 13, 14, 15, 16 et 17 minutes respectivement. Continuer à tester les mouches jusqu'à ce qu'elles soient toutes sédatées.Saisissez le nombre total de mouches dans chaque flacon lors du test sur support papier. Enregistrez les mouches immobiles ou mortes détectées par le capteur au temps zéro à partir du nombre total de mouches. Les données brutes de l'essai de sédation à l'éthanol ont été converties en pourcentage de mouches actives en fonction du temps.La sensibilité à la sédation par l'éthanol à partir des données primaires a été quantifiée comme le temps de sédation 50 ou ST 50. Le temps nécessaire pour que 50 % des mouches deviennent sédentées ou la surface sous la courbe ou une UC. Ce test détecte les effets de l'ARNi dirigé contre la calnexine 14 D dans le système nerveux, qui atténue la sensibilité à l'éthanol par rapport aux témoins, la mutation de scab et de rouser, une sensibilité accrue à la sédation par l'éthanol et la mutation de happy hour. Une sensibilité atténuée à la sédation par l'éthanol comparée aux témoins, une fois maîtrisée.Cette technique peut être réalisée en une heure et demie si elle est effectuée correctement.

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Un test simple pour mesurer les effets sédatifs de l'éthanol...

Une façon simple de mesurer la sensibilité d&#39;éthanol dans les mouches

Drosophila a émergé comme un système modèle important pour disséquer les fondements cellulaires et moléculaires de réponses comportementales à l'alcool. Nous présentons ici un protocole pour la collecte de données sur la sensibilité de l'alcool dans un contexte circadien qui peut être facilement appliquée à d'autres expériences et est bien adapté pour la recherche de premier cycle.

La barre stabilisatrice: Administration de l&#39;alcool à mouches

Dans cet article, vidéo, nous décrivons un test automatisé pour mesurer l'effet de la faim ou de satiété sur le comportement dépend olfactif de recherche de nourriture dans le fruit de mouche adulte Drosophila melanogaster.

Une simple mouche Essai de comportement alimentaire dans Drosophila

Ici, nous présentons un protocole pour quantifier l’évitement des individus stressés. Ce paradigme est à la fois puissant et facile à utiliser et peut être utilisé pour évaluer l’influence des gènes et de l’environnement sur un type d’interaction sociale chez Drosophila melanogaster.

Essai simple pour la quantification de l'évitement social en Drosophila melanogaster

C. elegans est un modèle utile pour étudier les effets de l'éthanol sur le comportement. Nous présentons un test comportemental qui quantifie les effets de l'éthanol sur la vitesse de locomotion des vers rampants ; la sensibilité initiale et le développement d'une tolérance fonctionnelle aiguë à l'éthanol peuvent tous deux être mesurés avec ce test.

Un test pour mesurer les effets de l&#39;éthanol sur la vitesse de Locomotion<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Nous décrivons un protocole pour induire enrichissante et nonrewarding expériences dans les mouches des fruits (Drosophila melanogaster) en utilisant la consommation volontaire d'éthanol en tant que mesure des changements dans les états de récompense.

Un moyen simple pour mesurer Transformations en récompense le comportement de recherche Utilisation<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Les méthodes actuelles pour mesurer la sensibilité à l’alcool à Drosophila sont conçues pour tester des groupes de mouches. Nous présentons un simple, faible coût, l’essai à haut débit pour évaluer la sensibilité à la sédation de l’alcool dans un grand nombre de mouches simples. La méthode ne nécessite pas d’outils spécialisés et peut être effectuée en laboratoire à l’aide de matériaux communs.

Méthode à haut débit pour mesurer le temps de sédation de l’alcool du mélanogaster individuel de Drosophila

L’essai Flypub mesure les comportements que la mouche des fruits Drosophila melanogaster affiche sous l’influence de l’éthanol. L’essai peut être facilement maîtrisé par des expérimentateurs à tous les niveaux et appliqué à divers stimuli vaporisés, facilitant l’abus de substances et les études de toxicomanie.

Flypub étudier l’éthanol induit la désinhibition comportementale et la sensibilisation

Le protocole présente une méthode à haut débit et rentable pour évaluer la neurotoxicité chez la mouche des fruits grâce à la quantification de la dysfonction locomotrice comme alternative aux modèles traditionnels de mammifères. Il vise à évaluer les effets neurotoxiques de composés pharmaceutiques, d’agents environnementaux ou de modifications génétiques à l’aide d’un modèle sensible, reproductible et éthiquement favorable.

Analyse comportementale de la dysfonction locomotrice chez Drosophila melanogaster comme lecture de la neurotoxicité

La procédure décrite dans ce protocole montre que l'administration de testostérone et les croyances populaires au sujet de testostérone peut être associée à des comportements sociaux directement opposés.

Combinant endocrinologie du comportement et l&#39;économie expérimentale: Décision de la testostérone et social Rendre

Apprenez à mesurer la sensibilité à l'éthanol et la tolérance rapide chez Drosophila avec ce test comportemental évolutif. Cette méthode simple permet d'étudier les comportements liés à l'éthanol et les mécanismes d'addiction.

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Un, test de comportement évolutives et économiques pour mesurer l'éthanol sédation sensibilité et la tolérance rapide dans

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