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DOI: 10.3791/52803-v
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Il y a un manque général de connaissances sur le fonctionnement des vaccins. Ici, nous proposons l’utilisation combinée de la génétique inverse et de souris chimériques de la moelle osseuse pour mieux comprendre les réponses immunitaires précoces de l’hôte aux vaccins, en mettant l’accent sur les cellules dendritiques et l’immunité des lymphocytes T.
L’objectif général de cette procédure est de décrire un système permettant d’évaluer l’initiation physiologique de l’immunité adaptative spécifique au vaccin. Pour ce faire, on utilise d’abord la génétique inverse pour générer des vaccins antigrippaux vivants atténués contenant un peptide immunogène spécifique, puis on utilise un embryon de poulet pour multiplier le virus. Ensuite, les cellules sont prélevées dans les ganglions lymphatiques de souris vaccinées et l’analyse par télécopieur est utilisée pour suivre la migration des cellules dendritiques.
Dans le test suivant, huit lymphocytes T positifs réactifs au peptide immunogène sont marqués et injectés à des souris vaccinées, suivis d’une analyse par fax pour mesurer la prolifération de ces cellules afin d’analyser la réponse immunitaire plus en détail. Un miroir de carillon de moelle osseuse compétitif est fabriqué en infusant des cellules de moelle osseuse exprimant le récepteur de la toxine diphtérique dans des souris congéniques irradiées, qui sont ensuite exposées à la toxine diphtérique. Après une déplétion réussie, la souris est vaccinée et marquée avec des anticorps et des tétramères sont utilisés pour identifier les lymphocytes T CD-8 positifs.
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