Rein murin Transplant Technique

L’objectif global de cette procédure est de démontrer une technique d’anastomose artérielle modifiée pour les greffes de rein chez la souris. Pour ce faire, il faut d’abord disséquer soigneusement les récipients pertinents chez le donneur. La deuxième étape consiste à créer un talon et un revers d’orteil de l’aorte abdominale donneuse adjacente à l’artère rénale.

Ensuite, ce revers du talon et des orteils est utilisé pour former l’anastomose artérielle chez le receveur. En fin de compte, cette technique devrait entraîner de très faibles cas de thrombose artérielle. Cette vidéo vous montrera comment créer un talon artériel et un revers d’orteil pour faciliter les greffes de rein dans la bouche.

Le principal avantage de cette technique de méthodes de résistance est que le chemin de circulation sanguine de l’aorte receveuse dans l’artère rénale du donneur est redressé, ce qui entraîne une réduction de l’activation plaquettaire et de la formation de thrombose À l’aide d’une technique stérile sous un microscope opératoire, prélever le rein du donneur, fonctionner correctement. Le temps de récolte sera de 15 à 20 minutes. Retirez la fourrure puis immobilisez l’animal.

Préparez le site chirurgical en lavant la peau avec de la povidone iodée, drapez la souris et commencez la chirurgie par une incision abdominale médiane de deux centimètres. Rétractez l’intestin sur la poitrine et enveloppez-le dans de la gaze humide. Gardez la gaze humide tout au long de la procédure.

Maintenant, trouvez les grands vaisseaux abdominaux et mobilisez-les. Toutes les branches lombaires doivent être cautérisées ou ligaturées avec une suture en nylon 10 zéro. Ensuite, disséquez une division de deux millimètres de la veine cave inférieure et de l’aorte distale aux vaisseaux rénaux gauches.

Ensuite, ligaturez et divisez toutes les petites branches artérielles et veineuses qui se fixent au vaisseau rénal. Continuez la dissection émoussée pour séparer la veine rénale de l’artère rénale, permettant ainsi la création ultérieure d’un patch Carroll à l’extrémité proximale de la veine rénale, ce patch sera utilisé pour la formation de l’anastomose veineuse. Ensuite, aimez-le et divisez les vaisseaux surrénaliens gauches pour accéder à l’aorte supra-rénale.

Une fois accessible, bouclez six zéro soie. Suture autour de l’aorte suprarénale pour une utilisation ultérieure. Mobilisez maintenant les vaisseaux rénaux et l’uretère du fascia environnant.

Faites pivoter le rein vers la droite sur le côté postérieur, ligaturez et divisez toutes les branches vasculaires en se concentrant sur l’uretère. Libérez soigneusement l’uretère du fascia environnant. Ne dérangez pas le hile rénal et préservez les vaisseaux érétiques.

Ensuite, divisez l’uretère au niveau du canal deens. Le rein peut maintenant être récupéré. Tout d’abord, injectez lentement 300 unités d’héparine dans la VCI distale pour hépariser le donneur.

Deuxièmement, attachez les six points de suture zéro autour de l’aa supra-rénale. Ensuite, perfuser le rein gauche de l’aorte abdominale, en injectant 0,8 millilitre de solution saline d’héparine à raison de 100 unités par millilitre. Après la perfusion, créez immédiatement le patch carylique veineux, évitant ainsi le reflux dans le rein.

Rétractez la veine rénale vers le rein pour révéler l’AA et l’artère rénale. Divisez maintenant l’aorte adjacente à l’artère rénale. Faites un talon et un poignet.

Ensuite, si aucune minute d’ischémie froide n’est nécessaire, transférez le rein récupéré dans un receveur préparé. Alternativement, transférez les organes dans une chambre de stockage à quatre degrés Celsius, puis euthanasiez les donneurs comme indiqué dans le protocole textuel. Cette procédure prendra de 35 à 45 minutes comme pour l’anesthésie du donneur.

Le receveur complète également le bolus initial au besoin. Fournissez au receveur une crème ophtalmique. Ensuite, donnez à l’animal une injection de buprénorphine et continuez son administration après la procédure, après avoir fait l’incision initiale et déplacé l’intestin comme fait avec le donneur, procédez à une néphrectomie droite, ligaturez l’artère rénale et la veine avec six sutures zéro ligaturée et divisez l’uretère proximal au rein avec six suture zéro.

Ensuite, excise le rein distal à la suture vasculaire. Maintenant, sous les vaisseaux rénaux, isolez l’AA et la VCI puis au-dessus du site d’anastomose. Placez une attache en coton zéro autour de l’aorte et IVC faites de même inférieur au site.

Tous les vaisseaux lombaires trouvés dans la région doivent être cautérisés ou ligaturés avec une suture en nylon 10 zéro, pas la suture qui est inférieure, puis étroitement pas la suture supérieure. Cela permettra de conserver une partie du sang dans l’aorte, ce qui facilitera l’autotomie AOR. Effectuez l’atome avec une aiguille de calibre 30, puis étendez l’incision pour qu’elle atteigne environ deux millimètres de long à l’aide de micro-ciseaux fins.

L’étape suivante consiste à faire une anastomose endoscopique du talon et de la coiffe des orteils du donneur à l’aorte du receveur. Tout d’abord, mettez un point de maintien dans le talon de l’aorte donneuse avec 10 points de suture zéro. Continuez ainsi à travers l’extrémité inférieure de l’incision dans l’aorte du receveur et attachez-la.

Deuxièmement, placez une suture 10 zéro à l’extrémité supérieure de l’incision aortique et continuez cela à travers l’orteil du brassard donneur et attachez-le. Troisièmement, en commençant par l’extrémité supérieure, faites une suture coulante dans la paroi latérale de l’aorte et attachez-la contre le point de maintien inférieur précédemment placé. Ensuite, retournez le rein et continuez une suture le long de la paroi médiale et attachez-le contre le point de maintien supérieur.

Complétez l’anastomose veineuse en perforant la VCI à l’aide de l’aiguille, puis en prolongeant l’incision avec des micro-ciseaux fins. À l’aide de nylon 10 zéro, attachez la veine rénale du donneur au coin inférieur de la VCI. Placez une autre suture zéro 10 à l’extrémité supérieure de la VCI et de la veine donneuse et faites une suture courante des deux côtés.

Comme pour l’anastomose artérielle, l’aversion des bords des tissus aide à l’étanchéité et à la guérison. Maintenant, vérifiez votre travail. Les murs opposés ne doivent pas être attrapés par les points de suture ou la circulation sanguine sera trop restreinte.

Un autre facteur d’une importance vitale garantissant que la tension de la ligne de suture anastomotique est optimale : trop lâche et il y aura des fuites irréversibles, trop serrés et il y aura une restriction à l’écoulement. S’il est du côté artériel, cela se traduira par une mauvaise profusion du greffon. Si du côté veineux, il en résultera un rein congestionné.

Une fois l’anastomose terminée, relâchez l’attache distale en coton pour établir le flux veineux. Ensuite, desserrez progressivement le lien proximal et lavez pour l’hémostase au niveau de l’anastomose artérielle. Lorsque les deux anastomoses sont confirmées comme étant sûres, voici la vessie du receveur avec une aiguille de calibre 20 faisant deux trous, passez des pinces à travers les trous et tirez l’uretère donneur à travers la vessie.

Ancrez ensuite l’extrémité proximale de l’uretère à la paroi de la vessie avec 2 10 0 sutures. Coupez l’excédent de longueur de l’uretère saillant pour qu’il se rétracte dans la vessie. Fermez ensuite l’autre trou de la vessie avec 10 points de suture zéro.

Terminez la chirurgie en remplaçant l’intestin, en fermant l’abdomen en deux couches avec une suture en soie et en injectant un microlitre de solution saline dans l’abdomen avant de le fermer. Après avoir fermé l’abdomen, injectez encore 0,8 millilitres de solution saline par voie sous-cutanée et récupérez l’animal sur une couverture chaude. En un an de collecte de données, cette technique a considérablement réduit l’incidence de la thrombose artérielle de 35 % à 0 % et ce taux de thrombose de 0 % a été maintenu depuis que l’immunohistochimie a été réalisée sur un rein non transplanté et un rein transplanté. En utilisant la technique décrite, une coloration périodique par décalage acide a révélé des cellules tubulaires proximales normales chez le témoin et le donneur.

Les cellules sont cuboïdes avec un cytoplasme clair et un noyau clair rond au milieu de la cellule pour les deux flèches. Soulignez les signes d’une légère blessure à la bordure des broussailles, mais la majorité des bordures de broussailles sont régulières et bien conservées. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’effectuer une anastomose artérielle du talon et de la cupule des orteils qui entraînera une réduction des cas de thrombose et des greffes de rein plus réussies.