8 juin 2015
L’enrichissement de l’environnement pour les souris nécessite une configuration complexe et difficile, ainsi que des techniques d’élevage et de manipulation complètes pour assurer des effets métaboliques et anticancéreux robustes chez les souris. Ce protocole fournit des procédures détaillées pour reproduire les effets mentionnés ci-dessus chez la souris.
Le but de cette procédure est de fournir les détails nécessaires à l’hébergement et au maintien des animaux dans l’enrichissement de l’environnement, ce qui produit des effets métaboliques et anticancéreux robustes chez la souris. Pour ce faire, il faut d’abord mettre en place l’environnement de logement enrichi dans un grand bac avec des objets tels que des roues, des sources de roulement, des clapiers, des tubes, des bûches et des cages. La deuxième étape consiste à introduire les animaux dans le nouvel environnement.
Ensuite, l’environnement enrichi est maintenu en changeant l’emplacement et le type d’objets dans le bac et en fournissant régulièrement de la nourriture fraîche et de l’eau. La dernière étape consiste à nettoyer les objets qui ont été remplacés dans l’environnement afin qu’ils soient prêts à être échangés à l’avenir. Enfin, lors de l’euthanasie et de l’analyse de tissus animaux.
Cette technique d’enrichissement de l’environnement montre une diminution de l’adiposité, une augmentation de la résistance à la dépense énergétique contre l’obésité induite par l’alimentation et un changement phénotypique de la graisse blanche à brune en activant l’axe adipocytaire neural sym hypothalamique. Cette méthode décrit les détails de la mise en place d’un environnement enrichi pour les rongeurs de laboratoire qui améliore la résistance au cancer et aux maladies métaboliques. Tout d’abord, vaporisez et essuyez l’intérieur d’un grand bac d’enrichissement avec des désinfectants à base de sporicidine.
En suivant les instructions du fabricant, essuyez le bac avec du papier imbibé d’éthanol à 30 % ou d’eau du robinet, une serviette et sécheuse avec une serviette en papier pour éliminer toute odeur du désinfectant précédent. Utilisez des igloos en tube de plastique avec des roues de type SOR et d’autres jouets en plastique de type hutcher dans l’environnement enrichi. Lavez ces jouets comme avant, utilisez des roues de roulement en métal qui ont été lavées comme auparavant.
Si la peinture de la roue commence à s’estomper de sorte que la roue devient bruyante lorsque les animaux courent dessus, appliquez une petite quantité de vaseline à l’endroit où la roue et l’essieu se connectent. Utilisez des bûches de bois dans un environnement enrichi. Nettoyez les bûches en enlevant toute litière ou autre débris à la main.
Stérilisez ensuite les bûches en les autocavant sur un cycle de séchage ou un cycle textile, qui atteint une température de 121 degrés Celsius pendant 15 minutes. Utilisez des cages d’alimentation propres entre les dimensions de 29 centimètres sur 18 centimètres sur 12,5 centimètres et de 30,5 centimètres sur 19 centimètres sur 14 centimètres à tenir. Une grille d’alimentation et d’abreuvement fait un trou d’au moins cinq centimètres de diamètre dans le fond avant de la cage pour que les souris puissent entrer et sortir.
Pour commencer. Pour un animal de laboratoire en épis de maïs d’un quart de pouce, placez-le dans le bac d’enrichissement propre à grand à une profondeur de deux à 2,5 centimètres. Ensuite, placez deux ou trois des bûches de la clave aortique précédente dans un coin du bac pour séquestrer une zone d’environ 1 225 centimètres carrés.
Ensuite, dans la zone séquestrée par les bûches, placez trois colles avec des roues SOR sur le dessus. Assurez-vous que les roues ont de l’espace pour tourner librement. Maintenant, assemblez le tube en plastique de manière à ce que plusieurs bras se ramifient à partir de la pièce de connexion centrale.
Placez ce tube au milieu du bac aux deux coins du bac. Placez une cage d’alimentation remplie de la même litière que le bac. Le trou à l’avant de chaque cage d’alimentation doit être orienté vers le centre du bac.
Placez un fil de nourriture et d’eau contenant de la nourriture de souris sur chaque cage d’alimentation. Ajoutez la bouteille d’eau. Placez une roue de 11,5 centimètres, une roue de 20,5 centimètres et une roue de 28 centimètres dans le bac.
Ensuite, placez quatre à cinq autres clapiers en plastique comme des jouets ou des tunnels dans le bac d’enrichissement. Couvrez le bac avec du papier filtre micro-isolant et utilisez des pinces à reliure pour fixer le papier filtre au bac. Lorsque vous placez des animaux dans le bac d’enrichissement à partir d’une cage standard, placez la cage dans le bac sur le côté afin que les animaux puissent se déplacer librement de la cage standard au bac d’enrichissement.
Ne laissez pas les matériaux de nidification être transférés dans le bac d’enrichissement. De 10 à 20 animaux du même âge, du même sexe et de la même souche génétique peuvent être hébergés dans l’environnement enrichi en même temps. Assurez-vous que les animaux sont observés quotidiennement pour détecter tout signe de maladie ou de détresse.
Si nécessaire, manipulez doucement les animaux pour inspecter davantage leur état deux fois par semaine. Vérifiez les niveaux de nourriture et d’eau, en vous assurant que la nourriture et l’eau dureront les deux prochains jours. Redressez également les roues de roulement et les jouets d’enrichissement afin qu’ils soient étalés et puissent être facilement utilisés.
Remplacez tous les articles d’enrichissement qui sont sales une fois par semaine, idéalement lorsque les souris sont retirées de l’environnement. À des fins expérimentales, retirez les cages d’alimentation et les grilles et remplacez-les par des cages propres et des grilles remplies d’aliments frais. Remplacez les bouteilles d’eau par des bouteilles d’eau propres.
Réorganisez de manière cruciale les éléments d’enrichissement afin que les aspects clés de la configuration soient conservés, mais que les éléments d’enrichissement soient placés différemment. Tache. Vérifiez le reste du grand bac d’enrichissement et nettoyez-le si nécessaire. En ramassant la litière sale et en étalant une nouvelle litière propre une fois toutes les deux semaines.
Lors de l’élevage hebdomadaire, lavez les jouets à la main ou en les envoyant dans la cage. Chaque mois, nettoyez la majorité de la litière en retirant les jouets d’enrichissement et les cages d’alimentation et en ramassant la litière. Remplacez-la par de la litière fraîche en vous assurant qu’il y a deux centimètres de litière dans toutes les zones de la cage une fois tous les trois mois ou selon le protocole de votre animal, retirez toute la litière et les jouets et désinfectez le bac d’enrichissement en le lavant comme avant le contrôle de la maison Regroupez les animaux sur le même cycle d’obscurité légère de 12 heures.
Comme les souris dans l’environnement enrichi dans des cages micro-isolées, fournissez la même litière d’épis de maïs dans la cage de contrôle que dans l’environnement enrichi, et ajoutez un nid de quatre centimètres sur quatre centimètres éclairé par un nid de maître logeant trois à cinq souris du même sexe dans une cage de souris normale. Ne fournissez pas de tube de jouet ou de clapier dans la cage. Incluez une grille dans la cage pour contenir la nourriture et une bouteille d’eau si la cage n’est pas reliée à un système d’arrosage automatique.
Surveillez quotidiennement la santé des animaux, en vous assurant qu’ils ont beaucoup de nourriture et d’eau. Remplacez ou nettoyez les cages, les fils d’alimentation, la nourriture et l’eau. Une fois par semaine, nettoyez les cages et les grilles comme avant.
Des souris mâles âgées de trois semaines ont été logées dans un environnement enrichi ou des cages de contrôle pendant cinq semaines avant l’inoculation sous-cutanée de la tumeur avec 10 à cinq cellules par animal. Les résultats montrent que le poids de la tumeur du mélanome B 16 est de 17 jours après l’inoculation. Chaque groupe était composé de 10 animaux.
L’astérisque représente une valeur P inférieure à 0,05 calculée par le test T des étudiants ici. Des souris âgées de trois semaines ont été soumises à un enrichissement de l’environnement pendant six jours. Six jours dans un environnement enrichi, diminution du rétropéritonéal, tissu adipeux blanc, poids du coussinet adipeux.
Ce graphique montre que six jours dans un environnement enrichi, diminution du tissu adipeux brun, du tissu adipeux blanc épidermique et du tissu adipeux blanc rétropéritonéal, poids des coussinets adipeux par rapport au poids corporel. Les deux graphiques suivants partagent les résultats de souris hébergées dans un environnement enrichi pendant quatre semaines, comme on le voit ici, quatre semaines d’enrichissement environnemental, une diminution du poids des coussinets adipeux dans tous les types de graisse, à l’exception du tissu adipeux brun. Quatre semaines d’enrichissement environnemental, diminution du poids des coussinets adipeux par rapport au poids corporel pour tous les types de graisse, à l’exception du tissu adipeux brun.
Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de mettre en place et de maintenir un environnement enrichi qui induit des effets anticancéreux et anti-obésité chez les souris.
Ce protocole décrit les procédures permettant de mettre en place un environnement enrichi pour les souris, qui favorise la santé métabolique et réduit le risque de cancer. Il détaille l'installation, l'entretien et la surveillance de l'environnement afin de garantir des conditions optimales pour les animaux.
Des protocoles normalisés d'enrichissement environnemental pour les souris de laboratoire sont essentiels afin de générer des phénotypes métaboliques et en oncologie reproductibles dans la recherche préclinique. Un enrichissement contrôlé permet des tests d'hypothèses solides concernant la dépense énergétique, l'adiposité et la biologie tumorale, influant directement sur la validation des cibles et la réduction des risques mécanistiques. Une mise en œuvre cohérente soutient la continuité translationnelle et la confiance dans les portefeuilles de modèles métaboliques et de cancer.
Les protocoles d'enrichissement environnemental se situent à l'interface entre la découverte précoce et le développement de modèles précliniques, soutenant à la fois la validation des cibles et la recherche translationnelle.