Protocoles pour les essais la résistance aux herbicides robuste chez différentes espèces de mauvaises herbes

L’objectif général de cette procédure est de tester et de confirmer la résistance aux herbicides chez un large éventail d’espèces de mauvaises herbes et d’herbicides, ainsi que de déduire les niveaux de résistance aux herbicides. Pour ce faire, on brise d’abord la dormance des graines recueillies sur les plantes qui ont survécu à un traitement herbicide afin d’obtenir une germination et une émergence simultanées des plantules. Une période de vernalisation des graines allant de quelques jours à plus d’une semaine est nécessaire.

La deuxième étape consiste à verser un milieu à vis sans fin avec du nitrate de potassium dans des plats en plastique. Les graines de Vern sont ensuite placées sur la vis sans fin solidifiée et les plats sont transférés dans une armoire de germination avec les conditions optimales pour chaque espèce de mauvaises herbes. Ensuite, 15 à 20 semis sont transplantés dans des plateaux en plastique remplis d’un terreau standard.

Un code-barres est attribué à chaque plateau, y compris toutes les informations permettant son identification unique, et les plateaux sont placés dans une serre chauffée jusqu’à ce que les semis atteignent le stade de deux à trois feuilles. La dernière étape est le traitement herbicide à l’aide d’un pulvérisateur de laboratoire de précision, tous les herbicides sont appliqués sous forme de formulations commerciales avec des tensioactifs recommandés à deux doses recommandées sur le terrain, et trois fois plus de trois à quatre semaines après le traitement, l’évaluation finale est effectuée. Un lecteur de code-barres permet d’enregistrer le nombre de plantes survivantes et la biomasse visuelle estimée par unité expérimentale.

Les données sont ensuite téléchargées dans un ordinateur et analysées pour déterminer l’état de résistance aux herbicides. Le principal avantage de cette méthode par rapport aux tests de dépistage diagnostique in vivo ou in vitro est lié à sa robustesse et à sa flexibilité. En d’autres termes, la méthode est fiable et peut être facilement adaptée à un large éventail d’espèces grâce à des adaptations mineures.

Cette méthode permet de répondre à des questions clés liées à l’étude et à la gestion des populations de mauvaises herbes résistantes aux herbicides dans les champs de CRO, telles que le profil et le niveau de résistance. Cela permet également de planifier correctement d’autres étapes expérimentales, telles que les expériences de réponse. En général, les chercheurs qui ne connaissent pas les essais de résistance aux herbicides éprouvent des difficultés en raison des nombreuses étapes et aspects qui doivent être pris en compte et adaptés aux conditions expérimentales spécifiques.

Commencez par prélever un échantillon de graines d’une espèce à la fois et attribuez-lui un code unique. Nettoyez les graines en enlevant la balle et en déroulant les graines. Remplissez un formulaire pour chaque échantillon en indiquant le code unique attribué.

Nom de l’espèce, date de collecte, coordonnées GPS, municipalité, nom de l’agriculteur, taille du champ, niveau d’infestation, herbicides utilisés pendant la saison et registres historiques du champ. Conservez les graines dans des sacs en papier non scellés étiquetés avec le code unique attribué. Laissez l’humidité s’évaporer, mais n’exposez pas les graines à des températures élevées ou à des fluctuations de température extrêmes.

Pour éviter l’induction d’une dormance secondaire. Conservez les graines nettoyées à quatre degrés Celsius dans une pièce sombre pour permettre la vernalisation. Mettez de l’eau déminéralisée dans des plats en plastique.

Coupez deux disques et une bande de papier filtre, qui par capillaire formera un pont entre l’eau et les deux disques. Trempez le papier filtre dans l’eau et placez-le dans la vaisselle en plastique. Placez ensuite les graines séchées à l’air libre sur le papier.

Transférez les plats en plastique à quatre degrés Celsius pendant la période de temps requise, selon l’espèce. Ensuite, préparez une solution de tarière à 0,6 % contenant 0,1 % de nitrate de potassium à l’aide d’eau désionisée, dissolvez la tarière dans un four à micro-ondes et versez la solution de tarière dans des plats en plastique. Une fois le substrat refroidi, placez les graines de Vern à germer sur la vis sans fin solidifiée.

Placez les plats en plastique dans une armoire de germination, la durée de vernalisation, ainsi que la lumière et les conditions de température varient en fonction de l’espèce de mauvaises herbes. Le repiquage au lieu de la couture directe permet d’obtenir un peuplement uniforme de plantes au même stade de croissance, ce qui est une condition préalable importante pour optimiser les performances du traitement herbicide Transplantez 15 à 20 plants dans des plateaux en plastique remplis d’un terreau standard de 60 % de terreau limoneux, terre, 15 % de sable, 15 % de perlite agricole, et 10 % de tourbe. Identifiez chaque plateau à l’aide d’un code à barres, y compris tous les renseignements nécessaires à l’identification unique du code de population de l’herbicide testé, le numéro de répétition et le numéro de plateau progressif.

Placez les plateaux dans une serre chauffée et arrosez les plantes au besoin pour maintenir le substrat à la capacité du champ ou presque. La température de croissance varie selon l’espèce de mauvaise herbe pour les herbicides de post-levée. Les plantes de pulvérisation, lorsqu’elles atteignent le stade de deux à trois feuilles, préparent la solution de tensioactif en vrac conformément aux instructions de l’étiquette, la concentration finale est généralement exprimée en pourcentage du volume final ou le volume doit-il être distribué par unité de surface ?

Calculer la quantité de produit commercial à dissoudre dans la solution de surfactant. À l’aide de cette équation, la dose d’herbicide est calculée en multipliant la dose recommandée au champ par la dose maximale testée et le volume final de la solution divisé par le volume délivré par le pulvérisateur de laboratoire. Préparez la solution herbicide la plus concentrée Tout d’abord, diluez la solution herbicide trois fois pour préparer la solution la moins concentrée.

Cette procédure réduit les risques d’erreurs lors de la pesée ou du pipetage des herbicides. Solution herbicide. La concentration est exprimée en volume à distribuer par unité de surface.

Commencez la séquence de traitement avec une dose d’herbicide plus faible. De cette façon, il n’est pas nécessaire de laver l’armoire de pulvérisation entre deux traitements avec le même herbicide. Distribuer la solution herbicide à l’aide d’un pulvérisateur de banc de précision, délivrant 300 litres par hectare à une pression de 215 kilo pascals et une vitesse de 0,75 mètre par seconde avec une rampe équipée de trois buses hydrauliques à jet plat.

Lavez l’armoire de pulvérisation deux fois lorsque l’herbicide est changé, avec de l’eau de Javel à 1 %, puis rincez. Faites le bilan trois ou quatre semaines après le traitement en fonction du dossier des herbicides testés, du nombre de plantes qui survivent au traitement ainsi que de la biomasse estimée visuelle ou VEB à l’aide d’un lecteur de code-barres, qui identifie automatiquement chaque plateau. Les plantes sont considérées comme mortes si elles ne montrent aucune croissance active, quelle que soit leur couleur ou toute autre apparence.

Le VEB est obtenu par une comparaison visuelle de la biomasse végétale entre un contrôle traité et un contrôle non traité d’une même population. Un score allant de 10 pour les plantes non affectées par l’herbicide à zéro lorsque les plantes sont clairement mortes est attribué à chaque plateau traité. Évaluer l’efficacité générale du traitement en incluant une population sensible dans toutes les expériences, par exemple une population recueillie dans un site qui n’a jamais ou rarement été traité avec des herbicides.

Exprimer le taux de survie des plantes en pourcentage du nombre de plantes traitées comptées juste avant le traitement herbicide et calculer l’erreur-type. La valeur perme attribue les populations à quatre catégories en fonction des résultats obtenus à partir de traitements avec deux doses d’herbicide sensibles lorsque moins de 5 % des plantes survivent à la dose d’herbicide. Un x légèrement résistant lorsque les survivants variaient de 5 % à 20 % à la dose d’herbicide.

Un x résistant lorsque plus de 20 % des plantes survivent à la dose d’herbicide. Un x et très résistant lorsque les survivants sont à plus de 20 % à la dose d’herbicide un x et à plus de 10 % à la dose d’herbicide. Trois résultats x représentatifs d’un traitement herbicide au panolam sur quatre populations d’iopa sont présentés.

Le témoin sensible a été complètement contrôlé, tandis que la population de 1410 a été classée comme légèrement résistante, car moins de 20 % des individus ont survécu. La population 1411 a été contrôlée à la troisième dose x, mais la survie des plantes à la première dose x était supérieure à 20 %, ce qui a donc été attribué à notre état. Enfin, la population 1412 n’a pas été contrôlée à la dose recommandée sur le terrain une fois ou trois fois plus élevée, de sorte qu’elle a été classée dans la catégorie des zones très résistantes.

Un deuxième exemple d’estimation visuelle de la biomasse dans les plantes traitées au trien Ron méthyl est présenté ici. Un score de 10 est attribué au témoin non traité, tandis que les plateaux avec des plantes complètement contrôlées ont un VEB de zéro. Une note intermédiaire de cinq est attribuée aux plateaux.

Ayant une biomasse végétale totale, qui est la moitié des plantes non traitées, les plateaux avec des plantes ayant une biomasse comparable à celle du témoin non traité où les plantes n’ont pas été affectées par les traitements herbicides et se sont donc révélées très résistantes ont un VEB de 10. En tentant cette procédure, il est important de se rappeler que la qualité des graines de mauvaises herbes, qui auraient dû être récoltées à maturité puis restaurées, a un fort impact sur le succès des expériences suivant cette procédure. D’autres méthodes, comme celles de réponse byas, peuvent être effectuées afin de répondre précisément à des questions supplémentaires liées au niveau de résistance.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’aborder les tests de résistance aux herbicides et d’adapter les différentes étapes aux différentes espèces de mauvaises herbes. En particulier, le freinage des graines CY et la germination des graines. N’oubliez pas que travailler avec des herbicides ou des acides concentrés peut être extrêmement dangereux dans des précautions telles que le port de masques, de gants et d’autres équipements de protection individuelle doivent toujours être pris lors de cette procédure.