Name: Un All-laser Endothelial Transplant (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-07-06T15:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 59 s
Description: Apprenez une technique de transplantation endothéliale cornéenne entièrement au laser utilisant un laser femtoseconde pour la préparation du greffon. Cette méthode minimalement invasive améliore l'adhésion tissulaire et réduit les risques de déplacement postopératoire.

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Les auteurs tiennent à remercier projet FORTE, financé par la Région Toscane (POR Creo FESR 2007-2013, Bando Unico R &amp; S 2012), les EU FP7 ECHORD ++ Expérience LA-ROSES que partiellement pris en charge les activités de recherche, et le 7e PC BiophotonicPlus projet &quot;LITE&quot; accordé par la Région Toscane.

L&#39;étude a été réalisée avec l&#39;approbation du comité d&#39;éthique prospective de l&#39;hôpital; le consentement éclairé a été obtenu. L&#39;étude était dans le respect des principes de la Déclaration d&#39;Helsinki. 1. Préparation donateurs endothélium <ol><li> Utilisez une cornée du donneur tel que préparé par la banque des yeux locale à la température ambiante. </li><li> Dans la salle de chirurgie, tirez la cornée du donneur de son conteneur de livraison et mis à part la solution pour la préservation des tissus et de la nutrition qui est utilisé pour le transport de la cornée. </li><li> Placez le donneur cornéo-sclérale sur une jante chambre antérieure artificielle, dans lequel un liquide peut couler et créer une pression variable; couvrir la cornée avec la tête de retenue de tissu. </li><li> Branchez la chambre antérieure artificielle (AAC) par un connecteur 3-way à une seringue remplie de la préservation de la cornée et du liquide de la nutrition. </li><li> Utilisez l&#39;anneau de compression pour maintenir la retenue solidement en place. </li><li> Utilisez le syringe reliée à l&#39;AAC pour maintenir la pression intracamérulaire: remplir la chambre antérieure avec la solution de conservation de tissu jusqu&#39;à atteindre la pression optimale (voir 1.7). Fermez le connecteur. </li><li> Test de la pression à l&#39;intérieur de la chambre antérieure avec un doigt. Changez la pression à l&#39;intérieur jusqu&#39;à atteindre la pression interne droite (dans la gamme 60-70 mmHg). Fermez le connecteur 3-way. </li><li> Mesurer l&#39;épaisseur de la cornée du donneur avec cohérence optique Thomography (OCT). Maintenir la chambre antérieure avec cette cornée dans une position fixe à l&#39;avant de l&#39;optique de l&#39;instrument et puis prendre une acquisition épaisseur-OCT plein. </li></ol> 2. Préparation Laser femtoseconde de l&#39;endothélium des donateurs <ol><li> Effectuer aplanissement de la cornée du donneur dans le cadre du dispositif de laser femtoseconde. Utilisez le laser femtosec pour couper le tissu du donneur avec trois coupes ultérieures: coupe latérale postérieure, plein lamellaire et la coupe de côté antérieur. Définissez les paramètres suivants pour les trois coupes.<ol><li> Pour la coupe pleine lamellaire (de configuration de trame, commencer), régler la profondeur de coupe correspondant au point de la cornée du donneur (mesurée avec les PTOM comme décrit dans 1.8) plus mince, toujours soustrayant 95 um. Réglez l&#39;énergie d&#39;impulsion dans la gamme 0,8-0,9 pJ (en fonction de la profondeur de travail). Réglez le diamètre à 8,7 mm. Réglez la séparation spot tangentielle à 2 pm. Réglez la séparation spot radiale à 2 pm. </li><li> Pour la coupe de côté antérieur, régler la profondeur de 30 um plus profond que la coupe lamellaire complète précédente postérieure. Réglez l&#39;énergie d&#39;impulsion à 2.10 pJ; le diamètre de 8,6 mm; la séparation spot à 3 pm, tandis que la séparation de la couche à 3 pm. </li><li> Pour la coupe de côté postérieur, localiser la profondeur antérieure de la face postérieure coupé 30 um avant qu&#39;en coupe lamellaire complet. Réglez la profondeur postérieure à 900 um. Réglez l&#39;énergie d&#39;impulsion à 2.10 pJ; le diamètre de 8,3 mm; la séparation de place à 2 pm; la séparation de la couche à 2 pm. </li></ol></li&gt; </ol> 3. Préparation bénéficiaire Eye <ol><li> Préparer le patient pour la chirurgie. Faire une incision de la cornée 4,00 mm à 12 heures avec une lame de 4,0 mm précalibrés. Faire une paracentèse limbique avec une lame préétalonné 1,2 mm, placé à 02 heures. Faire un autre ponction limbique à 6 heures avec un coup de couteau 30 °. </li><li> Insérez une chambre mainteneur antérieure dans la chambre antérieure du patient, à travers les 2 paracentèse o&#39;clock. </li><li> Effectuer un diamètre de 8,2 mm descemetorexis circulaire avec le crochet dédié. </li><li> Dépouiller la membrane Descemet et de l&#39;endothélium du stroma postérieur et enlever les tissus avec un crochet de Descemet. </li></ol> 4. Préparation Chromophore <ol><li> Mettez 1 mg de poudre Indocyanine vert dans un tube de 1,5 ml. </li><li> Ajouter 9 mg de l&#39;eau stérile (la solution aqueuse est ICG 10% en poids / poids). </li><li> Manuellement mélanger la poudre ICG et l&#39;eau avec un agitateur métallique. </li&gt; </ol> 5. Coloration de l&#39;endothélium des donateurs <ol><li> Mettre l&#39;endothélium donneur sur la partie la plus large d&#39;un Busin-injecteur, avec la face intérieure en contact avec la surface de l&#39;injecteur. </li><li> Colorer le côté intérieur de l&#39;endothélium du donneur avec la solution de chromophore, dans sa partie périphérique, à l&#39;aide d&#39;une spatule. Le tissu correctement colorés a une couleur verdâtre homogène. Attendre 3 min avant l&#39;étape 5.3 de départ. </li><li> Tirez l&#39;endothélium des bailleurs de fonds sur la partie antérieure de la Busin-injecteur, laminés. </li></ol> 6. Mise en place de l&#39;endothélium des donateurs <ol><li> Saisir et insérez l&#39;endothélium des donateurs plié en utilisant une pince coaxiaux atraumatiques pour endothéliale lenticulaire. </li><li> Retirer la chambre antérieure mainteneur. </li><li> Suturer l&#39;incision de la cornée et de la paracentèse (effectuée à l&#39;étape 3.1) avec un Nylon 10,0 seule Stich. </li><li> Injecter une bulle d&#39;air de se dérouler le tissu du donneur et pour le presser contre la cornée bénéficiaire. La bulle d&#39;air doit completely remplir l&#39;espace de la chambre antérieure. </li></ol> 7. Soudage laser <ol><li> Placer la lenticule donneur dans le centre de la cornée de destinataire, à partir de l&#39;intérieur d&#39;un crochet ou le déplacement de la bulle d&#39;air de l&#39;extérieur de la cornée avec une spatule. </li><li> Utilisation d&#39;un laser à diode émettant à 810 nm, équipé d&#39;un diamètre de 300 um de noyau de fibre optique stérile, à 0,22 comme une ouverture numérique (NA). </li><li> Gardez la pointe de la fibre à l&#39;extérieur du globe oculaire, et de fournir la lumière laser vers l&#39;endothélium taché, à travers le tissu de la cornée transparente. La pointe de la fibre est dans la configuration non-contact. </li><li> Utilisez les paramètres suivants pour le laser: mode Spot d&#39;émission unique, 70-80 durée d&#39;impulsion ms, 35-40 mJ par impulsion. He-Ne visant faisceau sur. </li><li> Livrer spots laser unique à la périphérie teinté de l&#39;endothélium des bailleurs de fonds. Livrer les taches séquentiellement: l&#39;aspect final est un anneau de taches dans la périphérie de la lenticule des bailleurs de fonds. La distance entre deux adjacentre de taches de cent est le double d&#39;un diamètre de spot. </li><li> Appliquer une lentille de contact sur l&#39;oeil du patient, ainsi que 0,3% de tobramycine et 0,1% de dexaméthasone suspension ophtalmique. </li></ol>

<ol><li>Tan, D. T., Dart, J. K., Holland, E. J., Kinoshita, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Corneal+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Corneal transplantation.</a> Lancet. 379 (9827), 1749-1761 (2012).</li>
<li>El Husseiny, M. A., Manero, F., Gris, O., Elies, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Historical+Review+and+Update+of+Surgical+Treatment+for+Corneal+Endothelial+Diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Ther%22%5BJournal%5D)">Historical Review and Update of Surgical Treatment for Corneal Endothelial Diseases.</a> Ophthalmol Ther. , (2014).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+tissue+welding+in+ophthalmic+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">Laser tissue welding in ophthalmic surgery.</a> J Biophotonics. 1 (4), 331-342 (2008).</li>
<li>Pini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combining+femtosecond+laser+ablation+and+diode+laser+welding+in+lamellar+and+endothelial+corneal+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XVIII%22%5BJournal%5D)">Combining femtosecond laser ablation and diode laser welding in lamellar and endothelial corneal transplants.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XVIII. 6 (844), 684411-1-684411-7 (2008).</li>
<li>Rossi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((All-laser%27+endothelial+corneal+transplant+in+human+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+SPIE+Ophthalmic+Technologies+XXII%22%5BJournal%5D)">All-laser' endothelial corneal transplant in human patients.</a> Proc. SPIE Ophthalmic Technologies XXII. 8209, 82091O-1-82091O-3 (2012).</li>
<li>Rossi, F., Pini, R., Menabuoni, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+and+model+analysis+on+the+temperature+dynamics+during+diode+laser+welding+of+the+cornea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Opt%22%5BJournal%5D)">Experimental and model analysis on the temperature dynamics during diode laser welding of the cornea.</a> J Biomed Opt. 12 (1), 014031-1-014031-7 (2007).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+corneal+welding+in+cataract+surgery%3A+retrospective+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted corneal welding in cataract surgery: retrospective study.</a> J Cataract Refract Surg. 33 (9), 1608-1612 (2007).</li>
<li>Buzzonetti, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser+Welding+in+Penetrating+Keratoplasty+and+Cataract+Surgery+in+Pediatric+Patients.+Early+Results%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cataract+Refract+Surg%22%5BJournal%5D)">Laser Welding in Penetrating Keratoplasty and Cataract Surgery in Pediatric Patients. Early Results.</a> J Cataract Refract Surg. 39 (12), 1829-1834 (2013).</li>
<li>Menabuoni, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+%27anvil%27+profile+in+femtosecond+laser-assistedpenetrating+keratoplasty%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The 'anvil' profile in femtosecond laser-assistedpenetrating keratoplasty.</a> Acta Ophthalmol. 91 (6), e494-e495 (2013).</li>
<li>Canovetti, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laser-assisted+penetrating+keratoplasty%3A+one+year%E2%80%99s+results+in+patients%2C+using+a+laser-welded+%E2%80%9Canvil%E2%80%9D-profiled+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Laser-assisted penetrating keratoplasty: one year’s results in patients, using a laser-welded “anvil”-profiled graft.</a> Am J Ophthalmol. 158 (4), 664-670 (2014).</li>
</ol>

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

Le «tout laser» endothéliale greffe est une approche originale de la greffe de cornée minimalement invasive. Toutes les procédures décrites dans le protocole ont été effectués dans la salle de chirurgie, en observant la procédure d&#39;hygiène et de stérilisation qui sont des pratiques courantes lors de chirurgies, telles que l&#39;utilisation de stérilisée gants, blouse, masque et chapeau. On a préparé la solution ICG dans la salle d&#39;opération, peu de temps avant son application dans la...

Dans ce travail, nous présentons une approche originale de la kératoplastie endothéliale, basé sur l&#39;utilisation d&#39;un laser femtoseconde pour préparer tissu du donneur et une diode laser proche infrarouge à souder sur le lit receveur. Mesure peropératoire de la cornée du donneur est nécessaire de concevoir correctement les dimensions de tissu du donneur. Kératoplastie endothéliale a été proposée dans les dernières années pour remplacer kératoplastie dans le traitement de la maladie 1,2 endothéliale. Le principal avantage de cette technique est une récupération visuelle plus rapide, par rapport à la kératoplastie, l&#39;anesthésie réduite pendant la chirurgie, une diminution du risque de rejet du greffon et de la préservation de l&#39;intégrité de l&#39;oeil. Le principal facteur de risque est postopératoire donateurs lenticulaire dislocation. La technique standard est effectuée en insérant l&#39;endothélium des bailleurs de fonds dans sa position finale où il est maintenu par l&#39;injection d&#39;une bulle d&#39;air: pas de sutures sont utilisés en raison de la chara mécanique, biophysique et dimensionscteristics de l&#39;endothélium. En outre, la récupération de l&#39;acuité visuelle peut être limitée en raison principalement d&#39;une inadéquation entre les tissus donateurs et bénéficiaires en raison d&#39;un épais tissu transplanté. Ici, nous présentons une procédure dans l&#39;exécution de kératoplastie endothéliale qui peut surmonter ces problèmes principaux. L&#39;endothélium du donneur peut être assuré dans sa position finale par l&#39;utilisation de la technique de soudage au laser. Ceci est un processus photothermique contrôlée et localisée: elle peut être induite à l&#39;interface donneur / receveur. Il a été étudié au cours des dix dernières années et proposé dans kératoplastie et la greffe de l&#39;endothélium 3-5. La lumière du proche infrarouge (longueur d&#39;onde: 810 nm) émis par une diode laser de faible puissance est délivré vers le tissu biologique au niveau du site de la plaie. La cornée est naturellement transparent à cette longueur d&#39;onde: afin de rendre ce tissu à absorber la lumière laser, il est nécessaire de teindre avec un chromophore. Le colorant est proposé un saturer stérilesolution d&#39;eau d de vert d&#39;indocyanine (ICG). Nous avons démontré que lorsque le tissu cornéen est correctement colorée avec cette préparation d&#39;ICG, elle montre un pic d&#39;absorption à 810 nm 6. En outre, l&#39;ICG est largement utilisé dans le diagnostic clinique et sa sécurité a déjà été démontrée chez des sujets humains. La cornée teinté absorbe l&#39;énergie de lumière laser à diode et le principal effet résultant est une élévation de la température contrôlée au niveau du site de soudage. Pas d&#39;effets thermiques sont induites dans les tissus non colorées. La mise en valeur de la température provoque une dénaturation thermique réversible dans le collagène du stroma, avec un closuring immédiate des parois de la plaie lors du refroidissement. Cet effet de soudage au laser a d&#39;abord été mise en évidence dans la chirurgie de la cataracte et 7,8 kératoplastie 9,10. Une approche optimisée que nous présentons dans le présent document a été étudié pour l&#39;application dans la kératoplastie endothéliale. Dans l&#39;opération proposée, spots laser simples (des dizaines durables de msec) are délivrée au tissu, résultant en un effet photothermique localisée dans la dimension du spot (quelques centaines de um de diamètre): l&#39;effet induit est un soudage laser dur, constitué d&#39;une photocoagulation du collagène confinée à l&#39;interface donneur / hôte. Le résultat de la dénaturation du collagène au niveau du site est soudée une forte adhérence entre les tissus de donneur et l&#39;hôte, fournissant ainsi un effet de suture qui est impossible à obtenir avec la technique standard (points). Le tissu retrouve son apparence naturelle dans un court suivi (1 mois) et l&#39;adhérence entre les tissus donneur / accueil est améliorée par le soudage prévu dans le stade très précoce de la phase de guérison. Pour éviter l&#39;autre risque principal de la kératoplastie endothéliale, à savoir la transplantation d&#39;un tissu de donneur d&#39;épaisseur, intraoperatorie tomographie par cohérence optique (OCT) est utilisé: un dispositif commercial de mesurer l&#39;épaisseur du donneur cornée, de telle sorte qu&#39;un bon profil de coupe peut être conçu avec lafemtosec laser. Le projet de «tout laser» endothéliale greffe semble donc d&#39;améliorer les résultats cliniques de cette chirurgie mini-invasive.

<table><tbody><tr><td>Indocyanine Green</td><td>Pulsion Medical Systems, Allemagne</td><td>ICG-PULSION (http://www.pulsion.com/international-english/perfusion/icg-pulsion/)</td><td>Produit alternatif : IC-GREEN, Akorn&nbsp ; Inc., Lake Forest, Illinois- US (http://www.icginjection.com/)</td></tr><tr><td>Laser femtoseconde&nbsp ;</td><td>Abbott Medical Optics,&nbsp ; Abbott Laboratories Inc. Abbott Park, Illinois, États-Unis</td><td>iFS150 (http://www.abbottmedicaloptics.com/products/refractive/ilasik/ifs-advanced-femtosecond-laser)</td><td></td></tr><tr><td>Tomographie par cohérence optique (OCT)</td><td>Carl-Zeiss Meditec, Dublin, Californie- États-Unis (http://www.zeiss.com/meditec/en_de/home.html)</td><td>Visante</td><td></td></tr><tr><td>Diode Laser</td><td>E.l.En. Groupe s.pa., Calenzano-FI, Italie (http://www.elengroup.com/en/divisions/medical)</td><td>Mod. Chambre antérieure artificielle WELD 800</td><td></td></tr><tr><td></td><td>CORONET, produits de greffe de cornée. Network Medical Products Ltd. Coronet House, Kearsley Road, Ripon, North Yorkshire, HG4 2SG, Royaume-Uni</td><td>Chambre antérieure artificielle (A.A.C.) avec grandes et petites têtes de rétention des tissus. Code 51-935 (http://www.networkmedical.co.uk/ophthalmic_artificial__ anterior_chamber.html)</td><td></td></tr><tr><td>Solution pour la préservation et la nutrition des tissus&nbsp ; &nbsp ;</td><td>Al. CHI.MI.A. Srl, Viale Austria 14, 35020 - Ponte S. Nicol&ograve ; - &nbsp ; ITALIE</td><td>Milieu Carry-C pour la déturgescence cornéenne et le transport à température ambiante - 12 x 50 ml (http://www.alchimiasrl.com/en/organ-culture-at-31&deg;-c-eb/carry-c-eb)</td><td></td></tr></tbody></table>

un «all-laser&quot; endothelial transplant

An &#8220;All-laser&#8221; Endothelial Transplant

La kératoplastie endothéliale assistée par laser est une procédure réalisée à l’aide d’un laser femtoseconde utilisé pour couper le tissu donneur à la profondeur voulue, et d’un laser à diode proche infrarouge pour souder le tissu cornéen. La technique proposée permet d’atteindre les trois objectifs principaux de la kératoplastie endothéliale : un contrôle précis de l’épaisseur du tissu donneur ; Son insertion facile dans le lit receveur et une réduction du risque de luxation du lenticule du donneur. L’épaisseur de la cornée du donneur est mesurée dans la salle d’opération par tomographie par cohérence optique (OCT), afin de concevoir correctement les dimensions du tissu du donneur. Un laser femtoseconde est utilisé pour couper la cornée du donneur. L’œil récepteur est préparé par décapage manuel de la membrane descémétique. L’endothélium du donneur est inséré dans un injecteur de busin, la face interne périphérique est colorée avec un chromophore approprié (une solution aqueuse de vert d’indocyanine), puis elle est tirée dans la chambre antérieure. Le tissu transplanté est placé à l’endroit final et correct, puis le soudage au laser à diode est induit de l’extérieur du globe oculaire. L’intervention a été réalisée sur plus de 15 patients, mettant en évidence une amélioration des performances chirurgicales, avec une bonne récupération de l’acuité visuelle et une réduction de la luxation de la luxation de la lentille du donneur.

Le «tout laser&quot; procédure chirurgicale est proposé d&#39;effectuer la greffe de cornée minimalement invasive. La procédure est facile à réaliser (voir la figure 1): par rapport à une greffe endothéliale norme uniquement les étapes de mesure de l&#39;épaisseur de la cornée, la coloration du tissu du donneur et la prestation de la lumière laser sont ajoutés. Les avantages obtenus compensent largement un temps opératoire augmenté de quelques minutes. L&#39;utilisation de peropératoire OPO pour mesurer...

Une procédure entièrement laser est proposée dans la greffe endothéliale. La technique chirurgicale est basée sur l’utilisation d’un laser femtoseconde pour préparer le tissu donneur. La technique de soudage au laser est ensuite utilisée pour fixer l’endothélium donneur dans la bonne position.

Un «All-laser&quot; Endothelial Transplant

The &#8220;all laser&#8221; assisted endothelial keratoplasty is a procedure that is performed with a femtosecond laser used to cut the donor tissue at an ...

L’objectif global de cette procédure est d’effectuer une chirurgie mini-invasive au laser pour la greffe de cornéennes minces. Pour ce faire, on mesure d’abord la cornée du donneur et on la coupe à l’aide d’un laser femtoseconde. Ensuite, des incisions sont pratiquées dans le lit cornéen du receveur et la membrane du desme et l’endothélium sont retirés en préparation du tissu donneur.Ensuite, le lambeau donneur est coloré et inséré dans sa position finale. Enfin, l’acue prêtée par le donneur est soudée au laser à la cornée du receveur. En fin de compte, l’adhésion de l’endothélium du donneur peut être observée un jour après la chirurgie.La principale amélioration de cette technique par rapport à la méthode existante comme la méthode standard est qu’avec le laser brandissant le lambeau, le risque de luxation est réduit après la chirurgie. Les implications de cette technique s’étendent à la chirurgie de la greffe de cornée, car l’application de la procédure de soudage au laser a également été étudiée en neurochirurgie et en ORL. En général, les personnes novices en matière de cette méthode n’auront pas de difficultés car elle est très facile à réaliser.Pour commencer dans la salle d’opération, retirez la cornée du donneur de son récipient d’administration à température ambiante et mettez de côté la solution de transport cornéen. Connectez la chambre antérieure artificielle ou un C à travers un connecteur à trois voies à une seringue remplie de préservation et de nutrition de la cornée. Liquide. Placez le bord scléral cornéen donneur au-dessus d’une chambre artificielle dans laquelle un liquide peut s’écouler et créez une pression variable.Ensuite, avec la tête de rétention de tissu, couvrez la cornée. Utilisez ensuite un anneau de compression pour maintenir le dispositif de retenue solidement en place. Ensuite, avec la seringue connectée à l’A, A, C, pour maintenir la pression intracamérale, utilisez une solution de préservation des tissus pour remplir la chambre antérieure jusqu’à ce qu’elle atteigne la pression optimale.Fermez ensuite le connecteur à trois voies à l’aide d’un doigt. Testez la pression à l’intérieur de la chambre antérieure, en l’ajustant jusqu’à ce que la pression interne correcte soit atteinte. Pour mesurer l’épaisseur de la cornée donneuse, maintenez la chambre antérieure avec une cornée en position fixe et avec une tomographie par cohérence optique ou OCT.Après son explication de l’application, commencez par une coupe complète ou une coupe en réglant la profondeur de coupe correspondant au point le plus fin de la cornée du donneur moins 95 microns. Réglez l’énergie d’impulsion dans la plage de 0,8 à 0,9 microjoules. Réglez le diamètre sur 8,7 millimètres.Réglez la séparation tangentielle des points à deux micromètres et réglez la séparation radiale des points à deux micromètres à l’endroit où le côté antérieur se coupe. Réglez la profondeur postérieure, 30 micromètres plus profonde que le lamire complet précédent. Couper. Réglez l’énergie d’impulsion à 2,10 microjoules, le diamètre à 8,6 millimètres pour la face postérieure. Couper.Localisez la profondeur antérieure de la face postérieure et coupez à 30 micromètres en avant de la lame complète ou de la coupe. Réglez la profondeur postérieure à 900 micromètres. Réglez l’énergie d’impulsion sur 2,10 microjoules.Le diamètre à 8,3 millimètres, la séparation des taches à deux micromètres et la séparation des couches à deux micromètres. Ensuite, faites la coupe pour préparer le patient à la chirurgie avec une lame pré-calibrée de 1,2 millimètre. Faites une paracentèse limbique à deux heures à travers la paracentèse de deux heures.Insérez un mainteneur de la chambre antérieure dans la chambre antérieure du patient. Puis à l’aide d’un couteau à 30 degrés. Faites une deuxième paracentèse limbique à six heures.Utilisez une lame pré-calibrée de 2,0 millimètres pour faire une incision cornéenne de 2,00 à 12 heures. Ensuite, à l’aide d’un crochet dédié, effectuez un desme ou un axe circulaire de 8,2 millimètres de diamètre. Retirez la membrane du desme et l’endothélium du stroma postérieur et utilisez un crochet de desme pour retirer les tissus.Pour préparer le chromophore à colorer le tissu donneur, ajoutez un milligramme de vert d’indocyanine ou de poudre ICG dans un microtube à centrifuger de 1,5 millilitre. Ajoutez ensuite neuf milligrammes d’eau stérile avec un agitateur en métal. Mélangez manuellement la solution ICG pour suspendre la poudre.Placez l’endothélium du donneur sur la partie la plus large d’un abus et injectez avec la face interne en contact avec la surface de l’injecteur. À l’aide d’une spatule, ajoutez une solution de chromo quatre sur la face interne de l’endothélium du donneur pour le colorer d’une couleur verte homogène. Après avoir attendu trois minutes, roulez l’endothélium et insérez-le dans la partie antérieure de l’injecteur de busin.À l’aide d’une pince coaxiale atraumatique, saisissez et insérez l’endothélium du donneur plié à l’aide d’un seul point de nylon 10.0. Suturer l’incision cornéenne et la paracentèse. Injectez une bulle d’air remplissant complètement l’espace de la chambre antérieure pour déplier le tissu donneur et le presser contre la cornée du receveur.Retirez ensuite le mainteneur de la chambre antérieure de l’intérieur à l’aide d’un crochet ou à l’aide d’une spatule pour déplacer la bulle d’air de l’extérieur. Placez le lenti donneur au centre de la cornée receveuse. Réglez un laser DDE émettant à 810 nanomètres avec un diamètre de noyau de 300 micromètres, une fibre optique stérile et une ouverture numérique de 0,22 à l’aide des paramètres répertoriés ici pour le laser et, tout en gardant la fibre optique à l’extérieur du globe oculaire et en configuration sans contact séquentiellement, délivrez des points laser uniques le long de la périphérie de l’endothélium coloré à travers le tissu cornéen transparent.L’aspect final est un anneau de taches à la périphérie du lenti. La distance entre les centres de deux points adjacents est le double du diamètre d’un point. Lorsque le soudage au laser est terminé, appliquez 0,3 % de tobramycine et 0,1 % de suspension ophtalmique de dexaméthasone sur l’œil du patient.Appliquez ensuite une lentille de contact. Cette procédure chirurgicale entièrement au laser permet d’effectuer une greffe de cornée mini-invasive par rapport à une greffe endothéliale standard. Seules les étapes de mesure de l’épaisseur de la cornée, de coloration du tissu donneur et de distribution de la lumière laser sont ajoutées.Les avantages obtenus compensent en grande partie l’augmentation du temps opératoire de quelques minutes. L’utilisation de l’OCT peropératoire pour mesurer l’épaisseur de la cornée donneuse et du laser femtoseconde utilisé pour personnaliser les dimensions de la lentille donneuse permet d’améliorer l’adhésion de l’interface hôte-donneur par rapport à l’absence de mesure de l’épaisseur de la cornée donneuse comme indiqué ici, ce qui entraîne une mauvaise adhérence à la périphérie. Ce faisant, l’opération est conçue en fonction des besoins et des caractéristiques morphologiques de chaque patient.Dans une technique standard, il n’est pas possible de suturer le tissu donneur de quelque manière que ce soit en raison de ses caractéristiques biomécaniques et de son emplacement. Cependant, la procédure de soudage au laser permet d’obtenir un anneau complet de points couvrant le diamètre externe de l’interface donneuse-receveuse, et permet une fermeture immédiate de l’interface. Un jour après l’opération, un endothélium partiellement soudé présente une luxation de l’occu du donneur, sauf aux sites de soudure.Suite à cette procédure, d’autres méthodes telles que l’otoplastie oculaire antérieure peuvent être effectuées afin de répondre à des questions supplémentaires telles que comment éviter l’utilisation de la poursuite standard après son développement. Cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la microchirurgie pour explorer la suture dans les tissus minces, les sites inaccessibles, comme dans l’anastomose de bout en bout en chirurgie du cerveau. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne idée de la façon de réaliser une otoplastie endothéliale avec un faible risque de déplacement linéaire après la chirurgie.Cette matière nous fournit très mince linéaire qui adhère au receveur med avec une bonne satisfaction de notre patient.

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Cette vidéo présente une procédure non invasive assistée par laser pour endommager sélectivement les cellules endothéliales cornéennes de l’œil porcin. Le modèle ex vivo développé des lésions des cellules endothéliales peut être utilisé pour étudier les maladies de l’endothélium cornéen.

Ablation sélective assistée par laser des cellules endothéliales cornéennes porcines : une technique pour induire des lésions endothéliales cornéennes porcines focalisées pour des études ex vivo

Vascularisé composite allotransplantations (VCA) sont devenus une réalité clinique. Cependant, une large application clinique de VCA est limitée par l'immunosuppression chronique multi-drogue. Les auteurs présentent un modèle animal grand fiable et reproductible de traduire de nouvelles stratégies immunomodulateurs qui peuvent réduire ou potentiellement éliminer le besoin de l'immunosuppression en VCA.

Un Heterotopic porcine Hind Membre Transplant modèle modifié translationnelle vascularisé composite Allotransplantation (VCA) de recherche

Transplantation hépatique auxiliaire fournit un support temporaire en insuffisance hépatique aiguë, jusqu'à la régénération du foie défaillant. La transplantation hétérotopique auxiliaire du foie (HALT) avec artérialisation de la veine porte (PVA) rend une fonction hépatique suffisante. Nous avons développé une technique analogue chez le rat afin d'examiner l'influence de l'artérialisation de la veine sur la morphologie et la fonction de la greffe.

Hétérotopique auxiliaire Rat Liver Transplantation avec un débit régulé veine porte artérialisation dans l&#39;insuffisance hépatique aiguë

Pour certains patients, la seule option pour la préservation de la fertilité est cryopréservation de tissu ovarien. Malheureusement, revascularisation tardive sape la viabilité folliculaire. Nous présentons ici un protocole co transplantation de tissu ovarien humain avec des cellules endothéliales pour utilisation comme une stratégie axée sur la cellule qui combinerait accélérée de perfusion avec une livraison directe paracrine de molécules bioactives.

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Le Stripping Only de Descemet est une procédure expérimentale dans laquelle les patients atteints de guttase cornéenne centrale résultant d’une dystrophie cornéenne endothéliale de Fuchs ont la membrane de Descemet dépouillée pour que les cellules périphériques régénèrent la couche endothéliale. Nous présentons une nouvelle méthodologie simulant le DSO dans les cornées humaines dystrophiques ex vivo avec une guérison accélérée stimulée par eFGF1 (NM141).

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Nous décrivons ici une plateforme qui permet une imagerie in vivo non invasive de sphéroïdes hépatiques greffés dans la chambre antérieure de l’œil de souris. Le flux de travail s’étend de la génération de sphéroïdes à partir de cellules hépatiques primaires à la transplantation dans l’œil de la souris et à l’imagerie in vivo à résolution cellulaire par microscopie confocale.

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Ce protocole décrit un modèle de transplantation intestinale avec iléostomie basé sur le rat pour l’évaluation de l’évolution temporelle de l’intervention médicamenteuse sur le rejet de greffe.

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Administration de cellules souches guidée par ultrasons de précision pour la réparation vasculaire dans les maladies de l’aorte

Nous présentons un modèle murin reproductible d’allotransplantation composite vascularisée hétérotope du membre postérieur au cou. Ce protocole supermicrochirurgical, impliquant des anastomoses de vaisseaux de 0,3 à 0,5 mm, intègre un guidage de filament de nylon et un menottage veineux. Il offre une plateforme fiable pour des études translationnelles sur la tolérance, la lésion ischémie-reperfusion et les mécanismes immunologiques dans l’allotransplantation vascularisée composite.

Transplantation hétérotopique du membre postérieur au cou chez la souris : un modèle supermicrochirurgical d’allotransplantation composite vascularisée

Détermination de la prise de greffe de cellule donneuse présente un défi dans des modèles de souris moelle osseuse greffe qui n'ont pas bien définis marqueurs phénotypiques. Nous avons décrit une méthodologie pour quantifier les hommes greffe de cellule donneuse dans des souris femelles bénéficiaires de greffes. Cette méthode peut être utilisée dans toutes les souches de souris pour l'étude des fonctions HSC.

Utilisation quantitative PCR en temps réel pour déterminer prise de greffe de donneurs de cellules dans un modèle murin concurrentiel greffe de moelle osseuse

Apprenez une technique de transplantation endothéliale cornéenne entièrement au laser utilisant un laser femtoseconde pour la préparation du greffon. Cette méthode minimalement invasive améliore l'adhésion tissulaire et réduit les risques de déplacement postopératoire.

Un «All-laser" Endothelial Transplant

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