Cardiac pression-volume Analyse boucle aide de la conductance cathéters chez la souris

L’objectif global de cette procédure est d’évaluer les mesures dépendantes de la charge et indépendantes de la fonction ventriculaire, systolique et diastolique. Ceci est accompli d’abord par la mise en place d’un cathéter de conductance dans le ventricule gauche d’un cœur de souris. Dans la deuxième étape, l’aorte est rétrécie pour changer de postcharge, suivie de l’altération de la précharge via la constriction de la veine inférieure cva.

Dans la dernière étape, le cathéter de conductance est soigneusement calibré pour évaluer avec précision les changements de volume de la chambre cardiaque. En fin de compte, l’analyse du volume de la pression cardiaque est utilisée pour obtenir les mesures dépendantes de la charge et indépendantes de la fonction cardiaque. Les implications de cette technique s’étendent au traitement de la dysfonction cardiaque, car elle permet à la fois une évaluation rigoureuse de la fonction cardiaque et le potentiel de masquage des phénotypes fonctionnels manqués par les tests non invasifs.

La démonstration de cette procédure sera faite par le Dr Lan Mao, un neurochirurgien de souris de notre laboratoire, 30 minutes avant de placer un cathéter de conductance dans la chambre du ventricule gauche. Faites tremper l’extrémité du cathéter dans une solution saline chaude pendant que l’extrémité trempe. Rasez le cou et la poitrine d’une souris adulte anesthésiée et placez l’animal sur un coussin chauffant.

Après avoir appliqué de la pommade sur les yeux de l’animal, faites une incision médiane dans le cou et disséquez les muscles trachéaux pour exposer la trachée. Ensuite, placez un tube endotrachéal dans la bouche, en visualisant la trachée pour le placement correct du tube, et connectez le tube au respirateur. Réglez les paramètres du ventilateur en fonction du poids de l’animal, comme indiqué.

Ensuite, pour placer le cathéter par une approche carotidienne, faites une incision sur la carotide droite de la mandibule au sternum, et disséquez le tissu environnant pour exposer la carotide droite. Ensuite, coupez le nerf vague qui est adjacent à la carotide et fixez une suture en soie six oh autour de l’extrémité distale de l’artère carotide. Placez deux sutures supplémentaires sous l’artère carotide à proximité de la première suture en attachant lâchement la suture moyenne.

Ensuite, tirez doucement sur la suture proximale et utilisez une pince pour fixer la suture à la peau. Lorsque l’artère carotide a été clampée, faites une petite incision dans l’artère carotide droite proximale à la première suture et s’étendant longitudinalement vers la poitrine. Insérez maintenant l’extrémité du cathéter à conductance imbibée de solution saline dans le vaisseau à travers l’incision à l’aide de la suture centrale pour fixer le cathéter.

Ensuite, avancez doucement le cathéter dans le ventricule gauche à travers la carotide. En observant le tracé de la boucle de volume de pression pour assurer un placement correct, le placement optimal du cathéter produira des boucles de volume de pression qui apparaissent rectangulaires pendant cinq à 10 minutes après l’enregistrement de l’enregistrement de la position Boucles de volume de pression de base jusqu’à ce qu’un état stable soit atteint pour placer le cathéter par une approche apicale. Faites l’incision de départ de l’apophyse xiphoïde à travers la paroi thoracique latéralement jusqu’à ce que le diaphragme soit visible.

Coupez à travers le diaphragme pour visualiser l’apex du cœur et utilisez une aiguille de calibre 25 à 30 pour faire une blessure à l’arme blanche dans l’apex du ventricule gauche. Insérez ensuite le cathéter de conductance dans la plaie jusqu’à ce que l’électrode proximale se trouve juste à l’intérieur du ventricule. Et enregistrez les boucles de volume de pression de base comme nous venons de le démontrer pour faire varier la postcharge avec l’occlusion aortique transitoire.

Commencez par faire une petite incision horizontale dans la partie supérieure de la poitrine et disséquez les tissus environnants pour exposer l’aorte transverse. Placez une ligature de soie 6.0 sous l’aorte transverse. Ensuite, lorsque les boucles de volume de pression sont revenues à la ligne de base, placez les deux extrémités de la ligature dans un petit segment de la classe de tube PE 50 les deux extrémités de la suture avec une pince à aiguille et soulevez doucement et lentement la suture sur une période d’une à deux secondes, suivie d’un relâchement lent de la tension sur le vaisseau.

Les enregistrements optimaux doivent comporter au moins cinq cycles de boucle de volume de pression et présenter une augmentation constante des pressions systoliques finales lors de l’application de la tension sur la suture. Pour varier la précharge avec l’occlusion transitoire de la veine inférieure CVA. Faites une incision verticale sous le processus xiphoïde et sous le diaphragme pour exposer la veine inférieure de l’abdomen.

Placez une ligature de soie six oh sous la veine inférieure de l’abdomen. Ensuite, une fois que les boucles de volume de pression sont revenues à la ligne de base, serrez les deux extrémités de la suture avec une pince à aiguille et soulevez doucement et lentement la suture sur une période d’une à deux secondes, suivie d’un relâchement lent de la tension sur le vaisseau. Les enregistrements optimaux doivent comporter au moins cinq cycles de boucle de volume de pression et présenter une baisse constante des pressions ventriculaire gauche et diastolique lors de l’application de la tension sur la suture pour effectuer un étalonnage salin.

À la fin de l’étude, injectez un bolus de 10 microlitres de solution saline hypertonique dans l’animal par la veine jugulaire pour obtenir une valeur de conductance parallèle. Une augmentation apparente du volume sera observée sans changement de la pression à la suite de la modification de la conductance du pool sanguin. Pour effectuer un étalonnage de vete, réchauffez un vete avec des puits d’un diamètre connu à 37 degrés Celsius et remplissez les trois premiers trous avec de l’héparinisé frais et chaud.

Le sang de souris soumises à des évaluations hémodynamiques s’adapte à un adaptateur en plastique fourni par le fabricant au vétérinaire. Cela maintiendra le cathéter de conductance immobile pendant l’étalonnage. Insérez ensuite le cathéter de conductance dans le premier puits jusqu’à ce que toutes les électrodes soient immergées.

Enfin, enregistrez la conductance dans le canal de volume pour tester si le ligand TR TR RV 1 2 0 0 2 3 influe sur la fonction cardiaque. L’analyse in vivo de la boucle volumique de pression a été réalisée sur des souris de type sauvage recevant des antagonistes conventionnels ou nouveaux des récepteurs de l’angiotensine. En effet, dans cette expérience, la perfusion intraveineuse de TR RV 1 2 0 0 2 3 a augmenté la contractilité cardiaque de manière significative par rapport aux traitements conventionnels et de contrôle.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’effectuer une analyse de la boucle de volume de pression en utilisant à la fois la constriction de la veine cave aortique et inférieure pour obtenir des mesures dépendantes de la charge et indépendantes de la fonction cardiaque.