3 septembre 2015
Les vocalisations ultrasonores (USV) chez la souris diffèrent selon l’âge, le sexe, l’état et le patrimoine génétique. En utilisant deux émetteurs d’ultrasons diffusant simultanément à des endroits différents, ce test à deux choix peut évaluer la reconnaissance murine et les réponses de préférence à différentes caractéristiques des USV.
L’objectif global de cette procédure est de déterminer les préférences de vocalisation ultrasonique ou d’USV chez la souris à l’aide d’un test de lecture à deux choix. Ceci est accompli en enregistrant d’abord U SVS d’un individu en direct. La deuxième étape consiste à éditer et à découper les us vs enregistrés en conséquence et à générer des fichiers sonores stéréophoniques.
Ensuite, les émetteurs d’ultrasons sont calibrés et le volume de l’USV est ajusté. À l’aide de l’atténuateur et des amplificateurs, la dernière étape consiste à introduire la souris du sujet dans la boîte de test et à commencer à lire les deux fichiers audio simultanément. En fin de compte, la surveillance comportementale peut révéler si la souris montre une préférence pour un son plutôt qu’un autre.
Les émetteurs USV que nous avons développés peuvent nous aider à répondre à des questions clés concernant mes communications vocales telles que les parties, la signification biologique de différents types de nous vs. Le principal avantage de notre émetteur caustique par rapport aux dispositifs existants tels que les transducteurs électriques Pazo est que la réponse en fréquence n’a pas de pics de résonance. L’inondation large bande du Mississippi dans la vision par ultrasons sans distorsions d’harmonie permet d’utiliser l’émetteur pour reproduire un cours de communication acoustique compliqué.
Grâce à cette méthode, vous pouvez donner un aperçu de la réponse féminine envers les mâles ou les hommes. Il peut également être appliqué à d’autres types d’interaction sociale tels qu’entre la mère et les pops, entre les mâles adultes et entre les femelles adultes. Pour commencer à obtenir des souris mâles sexuellement expérimentées et des souris femelles vierges, suivez le cycle esra en prenant des frottis vaginaux quotidiennement.
Teignez les frottis avec Giza et déterminez la face du cycle esra selon les procédures standard. Pour enregistrer des vocalisations à ultrasons ou US vs. Connectez un microphone à condensateur à ultrasons à un PC à l’aide d’un convertisseur publicitaire USB.
Réglez le niveau de gain sur le convertisseur publicitaire sur sept pour enregistrer des données acoustiques en 16 bits. Formatez des fichiers avec un taux d’échantillonnage de 400 kilohertz à l’aide d’un logiciel de capture audio pour la lecture du son, connectez un convertisseur DA au PC, puis connectez deux amplificateurs au convertisseur DA via un atténuateur, réparez une petite cage avec un trou dans la paroi latérale de six centimètres de diamètre. Couvrez le trou avec un treillis métallique de 0,5 centimètre.
Évitez d’utiliser de la litière ou tout autre objet susceptible de produire des bruissements et de contaminer l’enregistrement. Placez le microphone à ultrasons à côté du trou recouvert de maille. Quand vous êtes prêt.
Placez une souris mâle et une souris femelle sexuellement mature en couches ou en couches diastraques dans la cage. Enregistrez-nous contre pendant trois à cinq minutes.
Le boîtier d’essai est divisé en trois compartiments, une zone neutre et les portes des salles A et B. Séparez la zone neutre des autres pièces. Les salles A et B ont chacune un trou de quatre centimètres recouvert d’un grillage à l’extrémité.
Placez l’émetteur d’ultrasons contre le grillage et entourez-le de plaques en caoutchouc pour éviter les fuites sonores. Placez des joints en plomb des deux côtés du mur entre les pièces A et B pour l’isolation acoustique afin de créer les sons de lecture. Capturez un 22e segment de clés USB à partir du fichier précédemment enregistré.
À l’aide d’un logiciel de montage audio numérique, sélectionnez et capturez le bruit de fond de ce segment et créez un 22e fichier de bruit de fond en répétant le segment de bruit pour lire les deux fichiers audio. Exportez-les simultanément sous la forme d’un seul fichier audio stéréo avec un fichier pour l’oreille gauche et l’autre fichier pour l’oreille droite. Filtrez les fichiers sonores à l’aide d’un filtre passe-haut avec une coupure de 40 kilohertz.
Réduisez le bruit à l’aide de l’outil de réduction du bruit. Dans un logiciel de post-traitement, sélectionnez et capturez un segment du fichier qui ne contient pas de VS.As le profil de réduction du bruit et exécutez la réduction du bruit avec le niveau 40 pour calibrer les niveaux sonores pendant la lecture. Placez d’abord le microphone à 10 centimètres des émetteurs d’ultrasons.
Commencez la lecture et mesurez le niveau de pression acoustique en décibels. Utilisez l’atténuateur et les amplificateurs pour régler le volume des V US. Généré par les émetteurs d’ultrasons au même niveau de pression acoustique que l’US mâle vs.
Enregistré précédemment. Confirmez que les deux émetteurs d’ultrasons présentent le même niveau de pression acoustique à l’aide d’un son d’étalonnage lors de la reproduction d’un fichier sonore composé de deux flux d’us par rapport à Ajustez les deux niveaux de pression acoustique générés au même niveau.
Pour commencer le test à deux choix, fermez les portes des salles A et B et habituez le sujet féminin à la zone neutre. Pendant 30 minutes, couvrez la boîte avec du carton acrylique pour éviter qu’il ne s’échappe. Après 30 minutes, enregistrez l’ensemble de la procédure à l’aide d’une caméra vidéo montée au-dessus de la boîte.
Retirez la barrière et laissez la femelle explorer librement le reste de la boîte de test, y compris les zones sonores. Une fois que la femelle a exploré les deux cercles de maille et qu’elle est revenue dans la zone neutre, commencez à jouer le 22e fichier sonore préparé précédemment. Surveillez le comportement de l’animal pendant cinq à 10 minutes tout en diffusant le fichier audio à plusieurs reprises.
Changez l’emplacement des émetteurs d’ultrasons de manière aléatoire pour éviter de créer un biais latéral entre les deux pièces. Les souris femelles n’ont pas montré de préférence entre les pièces A et B lorsqu’elles ont été autorisées à explorer les chambres avant la lecture du son. Le nombre d’entrées dans la pièce était similaire entre les chambres contenant du bruit de fond ou des mâles US.
Cependant, les sujets ont passé beaucoup plus de temps dans la chambre dans laquelle les us vs ont été régénérés. Surtout dans les cinq premières minutes. L’exploration de la zone médiane n’a pas été altérée par la lecture du son.
Les femelles ont passé beaucoup plus de temps à l’intérieur de la zone sonore et à fouiller le grillage dans la chambre à jouer les mâles US contre surtout dans les cinq premières minutes, à la fois B six et bub. Les femelles ont passé plus de temps à étudier le côté associé aux mâles par rapport à une autre souche.
Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de déterminer la préférence de pulvérisation chez les souris à l’aide d’un test de saveur à deux choix après son développement. Cette technique a ouvert la voie aux chercheurs sur le terrain ou à la recherche sur les marques pour explorer l’interaction humaine sonore. L’USV doit différer en fonction de l’âge, de la condition sexuelle et des antécédents génétiques.
À la suite de cette procédure, les profils USB de masse transgénique peuvent être mesurés pour déterminer si les clés USB d’envoi et d’enregistrement sont modifiées.
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Cette étude examine les vocalisations ultrasonores (USV) chez la souris, en se concentrant sur leurs préférences selon divers facteurs tels que l'âge, le sexe et l'origine génétique. Un test de lecture à deux choix est utilisé pour évaluer la reconnaissance murine et les réponses de préférence à différentes caractéristiques des USV.
La compréhension des préférences en matière de vocalisations ultrasonores (USV) chez les souris fournit un indicateur comportemental permettant d'évaluer des phénotypes de communication sociale pertinents pour les modèles de maladies neuropsychiatriques. Ce test de lecture comparative à deux choix permet une mesure quantitative de la préférence auditive et de la discrimination, contribuant ainsi à la validation ciblée en découverte de médicaments du système nerveux central en reliant des manipulations génétiques ou pharmacologiques à des modifications mesurables du traitement de la saillance sociale. La méthode participe à la réduction des risques mécanistiques en proposant un test translationnel pour évaluer des composés modulant la motivation sociale, l'anxiété ou les voies de récompense.
La méthode s'inscrit dans le continuum de découverte allant du test d'hypothèses sur une cible jusqu'à l'identification d'un composé précurseur, offrant un lien comportemental entre la manipulation moléculaire et le résultat fonctionnel dans les domaines du comportement social.