Un protocole de stress chronique légère imprévisible pour avoir incité symptômes dépressifs, des changements de comportement et résultats négatifs sur la santé chez les rongeurs

L’objectif global de l’expérience suivante est d’exposer une souche de rongeur à une série de facteurs de stress chroniques et imprévisibles qui sont déterminés au hasard, de sorte que l’animal ne peut pas compenser efficacement la gravité croissante des symptômes dépressifs qui se développent. Ceci est réalisé par une exposition quotidienne à l’un des stimuli possibles qui sont conçus pour être stressants mais pas dommageables ou nuisibles pour l’animal. Les animaux sont exposés aux facteurs de stress cinq à six jours par semaine pendant huit semaines à intervalles réguliers, les animaux sont surveillés pour le développement de symptômes dépressifs en évaluant l’état du code et les réponses des animaux pour imposer des stimuli, tels qu’un test de pulvérisation de saccharose.

Les résultats montrent que l’imposition de facteurs de stress chroniques, randomisés, insolubles à l’environnement de l’animal empêche la capacité de l’animal à s’adapter et provoque le développement de symptômes dépressifs sur une période de plusieurs semaines. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des maladies chroniques, telles que la façon dont les symptômes dépressifs chroniques peuvent entraîner des résultats négatifs pour la santé dans d’autres systèmes tissulaires ou organiques. Nous avons d’abord eu l’idée d’utiliser cette méthode lorsque nous avons appris les profondes relations comorbides entre les maladies cardiovasculaires avancées et le risque de maladie dans nos populations cliniques, ainsi que la présentation concomitante de maladies dépressives profondes.

M. Steven Brooks et Mme Kayla Brannon, doctorants de nos laboratoires, feront la démonstration de cette procédure. Afin de produire des souris domestiques légèrement stressantes dans des cages séparées et d’exposer les souris à un ou deux facteurs de stress par jour pendant au moins trois à quatre heures pour chaque facteur de stress, la liste suivante de facteurs de stress doit être effectuée selon un calendrier aléatoire pour le facteur de stress de la litière humide. Mouillez la litière en versant 10 à 20 onces d’eau propre dans une cage standard.

Gardez la souris dans la cage humide pendant trois à quatre heures. Retirez la litière de la cage pendant trois à quatre heures, après quoi la souris passe à un autre facteur de stress nécessitant une cage vide, ou placez-la dans une cage propre avec une litière fraîche. Inclinez les cages sans litière à environ 45 degrés pendant trois à quatre heures à l’aide d’un objet solide qui restera en place lorsque la souris se déplacera dans la cage Pour ce facteur de stress, modifiez les cycles normaux de 12 heures de lumière et de 12 heures d’obscurité en successions de périodes de 30 minutes, d’une durée totale de huit heures.

Transférez la souris de sa cage d’accueil à la cage d’une souris voisine qui a été retirée pendant la période de stress de trois heures. Retirez la litière de la cage et ajoutez de l’eau à une profondeur d’environ 0,25 pouce pour les souris, et laissez la souris pendant environ quatre heures. Brièvement, séchez la souris avec une serviette douce à la fin de l’exposition à l’eau.

Exposez les souris à des prédateurs, à des odeurs ou à des sons en ajoutant des touffes réparties au hasard ou 10 à 20 millilitres d’urine d’une espèce de prédateur naturel dans la cage, et laissez la souris pendant trois à quatre heures. Alternativement, jouez des grognements ou des bruits prédateurs provenant d’espèces de prédateurs naturels ENC proximité des cages pendant trois heures à la fin de chaque période de stress quotidienne. Placez les souris dans des cages propres et retournez-les quotidiennement au logement.

Inspecter chaque animal pour détecter l’apparition de plaies ou de plaies pouvant nécessiter un traitement vétérinaire une fois par semaine, avoir deux enquêteurs formés à l’évaluation du toilettage du code. Inspectez chaque animal et attribuez-lui un code hebdomadaire sur une échelle de zéro à un. Ajoutez un score individuel en attribuant des scores individuels de zéro signifiant propre ou un signifiant sale à chacune des huit régions du corps.

La tête, le cou, le poil dorsal, le poil ventral, la queue, les quatre membres, les membres postérieurs et la région génitale. Placez l’animal dans une cage propre recouverte d’un coton ou d’une serviette pour éviter que la litière n’adhère à son pelage. Vaporisez ensuite une solution à 10 % de saccharose sur la tête et le pelage dorsal de chaque animal et enregistrez le comportement de toilettage total pendant cinq minutes.

Mesurez la latence et la fréquence de l’activité de toilettage du visage pendant cette période. La latence est le temps écoulé entre la première pulvérisation et le début du toilettage du visage, et la fréquence doit être mesurée comme le nombre de fois que le visage est toiletté. Après huit semaines de stress chronique léger imprévisible, il y a eu des altérations significatives des résultats comportementaux et physiologiques chez les rongeurs chroniquement stressés par rapport à leurs souches témoins non stressées.

Les souris ont développé des symptômes dépressifs à la suite d’un stress chronique léger imprévisible et ont montré une baisse progressive des scores de toilettage du pelage. Cette dégradation marquée de l’état physique du pelage suggère une diminution de l’activité de toilettage et peut être parallèle à un manque de motivation. Des preuves récentes suggèrent qu’il existe une divergence quantitative substantielle dans les réponses au stress chronique léger imprévisible entre les souris mâles et femelles.

Plus précisément, les données suggèrent que les souris femelles exposées au protocole de stress identique à celui des mâles du même âge développent des réponses comportementales plus sévères au protocole que les mâles. À la suite de cette procédure, d’autres méthodes appropriées à la fonction spécifique d’un organe peuvent être facilement mises en œuvre afin de répondre à des questions supplémentaires telles que la façon dont la présence de symptômes dépressifs chroniques peut affecter le fonctionnement normal du système d’organe d’intérêt. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser les différentes étapes et procédures du protocole UCMS pour créer progressivement les conditions de croissance des symptômes dépressifs dans votre modèle de rongeur.