Un protocole de stress chronique légère imprévisible pour avoir incité symptômes dépressifs, des changements de comportement et résultats négatifs sur la santé chez les rongeurs

L'objectif général de l'expérience suivante est d'exposer une souche de rongeur à une série de stress chroniques et imprévisibles déterminés aléatoirement, de sorte que l'animal ne puisse pas compenser efficacement au fur et à mesure que la gravité des symptômes dépressifs s'aggrave. Cet objectif est atteint par une exposition quotidienne à l'un des stimuli possibles, conçus pour être stressants sans nuire ni blesser l'animal. Les animaux sont exposés aux stress cinq à six jours par semaine pendant huit semaines à intervalles réguliers ; leur suivi porte sur l'apparition de symptômes dépressifs, évaluée par l'analyse du statut codé et des réponses animales à des stimuli imposés, tels qu'un test de pulvérisation de saccharose.

Les résultats montrent que l'application de stress chroniques aléatoires et insolubles dans l'environnement de l'animal empêche sa capacité à s'adapter et provoque l'apparition de symptômes dépressifs sur plusieurs semaines. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des maladies chroniques, telles que la manière dont les symptômes dépressifs chroniques peuvent entraîner des conséquences négatives sur la santé d'autres tissus ou systèmes organiques. Nous avons eu pour la première fois l'idée d'utiliser cette méthode lorsque nous avons pris connaissance des relations comorbides profondes entre les maladies cardiovasculaires avancées et le risque de maladie dans nos populations cliniques, ainsi que de la manifestation concomitante de troubles dépressifs sévères.

La démonstration de cette procédure sera assurée par M. Steven Brooks et Mme Kayla Brannon, étudiants doctorants de nos laboratoires. Afin d'induire un stress modéré, loger les souris domestiques en cages séparées et exposer les souris à un ou deux facteurs de stress par jour pendant un minimum de trois à quatre heures par facteur de stress. La liste suivante de facteurs de stress doit être appliquée selon un planning aléatoire pour le stress dû à la litière humide. Mouiller la litière en versant de 10 à 20 onces d'eau propre dans une cage standard.

Garder la souris dans la cage humide pendant trois à quatre heures. Retirer la litière de la cage pendant trois à quatre heures, puis transférer la souris vers un autre facteur de stress nécessitant une cage vide, ou la placer dans une cage propre avec de la litière fraîche. Incliner les cages sans litière d’environ 45 degrés pendant trois à quatre heures à l’aide d’un objet solide qui restera en place tandis que la souris se déplace dans la cage. Pour ce facteur de stress, modifier les cycles normaux de 12 heures de lumière et 12 heures d’obscurité en successions de périodes de 30 minutes, pour une durée totale de huit heures.

Transférez la souris de sa cage d’origine vers la cage d’une souris voisine qui a été retirée pour la période de stress de trois heures. Retirez la litière de la cage et ajoutez de l’eau jusqu’à une profondeur d’environ 0,25 pouce pour les souris, puis laissez la souris pendant environ quatre heures. À la fin de l’exposition à l’eau, séchez brièvement la souris avec une serviette douce.

Exposer les souris à des odeurs ou des sons de prédateurs en ajoutant dans la cage des touffes distribuées aléatoirement ou 10 à 20 millilitres d'urine provenant d'une espèce de prédateur naturel, et laisser la souris pendant trois à quatre heures. En alternative, diffuser des bruits de grognement ou d'autres sons prédateurs provenant d'espèces de prédateurs naturels à proximité des cages (ENC) pendant trois heures à la fin de chaque période de stress quotidienne. Placer les souris dans des cages propres et les ramener quotidiennement au lieu d'hébergement.

Examinez chaque animal une fois par semaine afin de détecter le développement de plaies ou d'ulcères pouvant nécessiter un traitement vétérinaire, et faites intervenir deux investigateurs formés à l'évaluation du code de toilettage. Examinez chaque animal et attribuez-lui un score hebdomadaire sur une échelle allant de zéro à un. Calculez chaque score individuel en attribuant des notes individuelles de zéro, signifiant propre, ou un, signifiant sale, à chacune des huit régions corporelles.

La tête, le cou, le pelage dorsal, le pelage ventral, la queue, les quatre membres, les membres postérieurs et la région génitale. Placer l'animal dans une cage propre tapissée avec un disque de coton ou une serviette afin d'empêcher la litière de s'attacher à son pelage. Ensuite, pulvériser une solution de saccharose à 10 % sur la tête et le pelage dorsal de chaque animal et enregistrer le comportement total de toilette pendant cinq minutes.

Measurez la latence et la fréquence de l'activité de toilette faciale pendant cette période. La latence correspond à la durée entre le premier pulvérisation et le début de la toilette faciale, et la fréquence doit être mesurée par le nombre de fois où le visage est nettoyé. Après huit semaines de stress modéré chronique imprévisible, des altérations significatives ont été observées tant au niveau comportemental que physiologique chez les rongeurs soumis à un stress chronique par rapport à leurs souches témoins non stressées.

Les souris ont développé des symptômes semblables à ceux de la dépression suite à un stress modéré chronique imprévisible, et ont montré une diminution progressive des scores de toilettage du pelage. Cette dégradation marquée de l'état physique du pelage suggère une activité de toilettage réduite et pourrait refléter un manque de motivation. Des données récentes indiquent qu'il existe une divergence quantitative importante entre les réponses des souris mâles et femelles au stress modéré chronique imprévisible.

Plus précisément, les données suggèrent que les souris femelles exposées au même protocole de stress que des mâles appariés par âge développent des réponses comportementales plus sévères que les mâles. Après cette procédure, d'autres méthodes adaptées à la fonction d'organes spécifiques peuvent être facilement réalisées afin de répondre à des questions supplémentaires, comme l'impact de la présence de symptômes dépressifs chroniques sur le fonctionnement normal du système d'organes étudié. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière d'utiliser les différentes étapes et procédures du protocole UCMS pour créer progressivement les conditions conduisant à l'apparition de symptômes dépressifs croissants dans votre modèle rongeur.