Name: Décrypter et de limagerie et la pathogenèse de Cording Mycobacterium abscessus Dans embryons de poissons zèbres (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2015-09-09T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 38 s
Description: Découvrez l'imagerie en fluorescence pour étudier la virulence de Mycobacterium abscessus et ses interactions avec le système immunitaire inné chez les embryons de poissons zèbres.

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Les auteurs sont reconnaissants à K. Kissa pour des discussions utiles et pour fournir lipo-clodronate et L. Ramakrishnan pour le don généreux de pTEC27 et pTEC15 qui permettent l&#39;expression de tdTomato et Wasabi, respectivement. Ce travail fait partie des projets de l&#39;Agence Nationale de la Recherche française (ZebraFlam ANR-10-MIDI-009 et DIMYVIR ANR-13-BSV3-007-01) et septième programme-cadre de la Communauté européenne (FP7-PEOPLE-2011-ITN) en vertu de convention de subvention aucune. PITN-GA-2011-289209 pour le Marie-Curie de formation initiale Réseau FishForPharma. Nous tenons également à remercier l&#39;Association Gregory Lemarchal et Vaincre La Mucoviscidose (RF20130500835) pour le financement CM Dupont.

<ol><li>Brown-Elliott, B. A., Wallace, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+and+taxonomic+status+of+pathogenic+nonpigmented+or+late-pigmenting+rapidly+growing+mycobacteria%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Microbiology+Reviews%22%5BJournal%5D)">Clinical and taxonomic status of pathogenic nonpigmented or late-pigmenting rapidly growing mycobacteria.</a> Clinical Microbiology Reviews. 15 (4), 716-746 (2002).</li>
<li>Aitken, M. L., Limaye, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Respiratory+outbreak+of+Mycobacterium+abscessus+subspecies+massiliense+in+a+lung+transplant+and+cystic+fibrosis+center%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Respiratory outbreak of Mycobacterium abscessus subspecies massiliense in a lung transplant and cystic fibrosis center.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 185 (2), 231-232 (2012).</li>
<li>Gilljam, M., Lindblad, A., Ridell, M., Wold, A. E., Welinder-Olsson, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+epidemiology+of+Mycobacterium+abscessus%2C+with+focus+on+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Molecular epidemiology of Mycobacterium abscessus, with focus on cystic fibrosis.</a> Journal of Clinical Microbiology. 45 (5), 1497-1504 (2007).</li>
<li>Roux, A. -L., Catherinot, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multicenter+study+of+prevalence+of+nontuberculous+mycobacteria+in+patients+with+cystic+fibrosis+in+France%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Multicenter study of prevalence of nontuberculous mycobacteria in patients with cystic fibrosis in France.</a> Journal of Clinical Microbiology. 47 (12), 4124-4128 (2009).</li>
<li>Lee, M. -R., Cheng, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CNS+infections+caused+by+Mycobacterium+abscessus+complex%3A+clinical+features+and+antimicrobial+susceptibilities+of+isolates%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">CNS infections caused by Mycobacterium abscessus complex: clinical features and antimicrobial susceptibilities of isolates.</a> The Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 67 (1), 222-225 (2012).</li>
<li>Talati, N. J., Rouphael, N., Kuppalli, K., Franco-Paredes, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectrum+of+CNS+disease+caused+by+rapidly+growing+mycobacteria%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Infectious+Diseases%22%5BJournal%5D)">Spectrum of CNS disease caused by rapidly growing mycobacteria.</a> The Lancet Infectious Diseases. 8 (6), 390-398 (2008).</li>
<li>Medjahed, H., Gaillard, J. -L., Reyrat, J. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycobacterium+abscessus%3A+a+new+player+in+the+mycobacterial+field%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Mycobacterium abscessus: a new player in the mycobacterial field.</a> Trends in Microbiology. 18 (3), 117-123 (2010).</li>
<li>Griffith, D. E., Girard, W. M., Wallace, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+features+of+pulmonary+disease+caused+by+rapidly+growing+mycobacteria.+An+analysis+of+154+patients%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Review+of+Respiratory+Disease%22%5BJournal%5D)">Clinical features of pulmonary disease caused by rapidly growing mycobacteria. An analysis of 154 patients.</a> The American Review of Respiratory Disease. 147 (5), 1271-1278 (1993).</li>
<li>Nessar, R., Cambau, E., Reyrat, J. M., Murray, A., Gicquel, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycobacterium+abscessus%3A+a+new+antibiotic+nightmare%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Mycobacterium abscessus: a new antibiotic nightmare.</a> The Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 67 (4), 810-818 (2012).</li>
<li>Sanguinetti, M., Ardito, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fatal+pulmonary+infection+due+to+multidrug-resistant+Mycobacterium+abscessus+a+patient+with+cystic+fibrosis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Fatal pulmonary infection due to multidrug-resistant Mycobacterium abscessus a patient with cystic fibrosis.</a> Journal of Clinical Microbiology. 39 (2), 816-819 (2001).</li>
<li>Griffith, D. E., Aksamit, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+official+ATS%2FIDSA+statement%3A+diagnosis%2C+treatment%2C+and+prevention+of+nontuberculous+mycobacterial+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">An official ATS/IDSA statement: diagnosis, treatment, and prevention of nontuberculous mycobacterial diseases.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 175 (4), 367-416 (2007).</li>
<li>Howard, S. T., Rhoades, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+reversion+of+Mycobacterium+abscessus+a+smooth+to+a+rough+morphotype+is+associated+with+reduced+expression+of+glycopeptidolipid+and+reacquisition+of+an+invasive+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiology+%28Reading%2C+England%29%22%5BJournal%5D)">Spontaneous reversion of Mycobacterium abscessus a smooth to a rough morphotype is associated with reduced expression of glycopeptidolipid and reacquisition of an invasive phenotype.</a> Microbiology (Reading, England). 152 (Pt 6), 1581-1590 (2006).</li>
<li>Chardi, A., Olivares, F., Byrd, T. F., Julián, E., Brambilla, C., Luquin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Demonstration+of+cord+formation+by+rough+Mycobacterium+abscessus+variants%3A+implications+for+the+clinical+microbiology+laboratory%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Demonstration of cord formation by rough Mycobacterium abscessus variants: implications for the clinical microbiology laboratory.</a> Journal of Clinical Microbiology. 49 (6), 2293-2295 (2011).</li>
<li>Byrd, T. F., Lyons, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preliminary+characterization+of+a+Mycobacterium+abscessus+mutant+in+human+and+murine+models+of+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Preliminary characterization of a Mycobacterium abscessus mutant in human and murine models of infection.</a> Infection and Immunity. 67 (9), 4700-4707 (1999).</li>
<li>Catherinot, E., Clarissou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypervariance+of+a+rough+variant+of+the+Mycobacterium+abscessus+type+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Hypervariance of a rough variant of the Mycobacterium abscessus type strain.</a> Infection and Immunity. 75 (2), 1055-1058 (2007).</li>
<li>Catherinot, E., Roux, A. -L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+respiratory+failure+involving+an+R+variant+of+Mycobacterium+abscessus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Acute respiratory failure involving an R variant of Mycobacterium abscessus.</a> Journal of Clinical Microbiology. 47 (1), 271-274 (2009).</li>
<li>Bernut, A., Le Moigne, V., Lesne, T., Lutfalla, G., Herrmann, J. -L., Kremer, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+assessment+of+drug+efficacy+against+Mycobacterium+abscessus+using+the+embryonic+zebrafish+test+system%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">In vivo assessment of drug efficacy against Mycobacterium abscessus using the embryonic zebrafish test system.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 58 (7), 4054-4063 (2014).</li>
<li>Oh, C. -T., Moon, C., Jeong, M. S., Kwon, S. -H., Jang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+melanogaster+for+Mycobacterium+abscessus+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Microbes+and+Infection+%2F+Institut+Pasteur%22%5BJournal%5D)">Drosophila melanogaster for Mycobacterium abscessus infection.</a> Microbes and Infection / Institut Pasteur. 15 (12), 788-795 (2013).</li>
<li>Bernut, A., Herrmann, J. -L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mycobacterium+abscessus+cording+prevents+phagocytosis+and+promotes+abscess+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Mycobacterium abscessus cording prevents phagocytosis and promotes abscess formation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (10), E943-E952 (2014).</li>
<li>Dubée, V., Bernut, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%CE%B2-Lactamase+inhibition+by+avibactam+in+Mycobacterium+abscessus%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Antimicrobial+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">β-Lactamase inhibition by avibactam in Mycobacterium abscessus.</a> Journal of Antimicrobial Chemotherapy. 70 (4), 1051-1058 (2015).</li>
<li>Torraca, V., Masud, S., Spaink, H. P., Meijer, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macrophage-pathogen+interactions+in+infectious+diseases%3A+new+therapeutic+insights+from+the+zebrafish+host+model%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Macrophage-pathogen interactions in infectious diseases: new therapeutic insights from the zebrafish host model.</a> Disease Models Mechanisms. 7 (7), 785-797 (2014).</li>
<li>Alibaud, L., Rombouts, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Mycobacterium+marinum+TesA+mutant+defective+for+major+cell+wall-associated+lipids+is+highly+attenuated+in+Dictyostelium+discoideum+and+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A Mycobacterium marinum TesA mutant defective for major cell wall-associated lipids is highly attenuated in Dictyostelium discoideum and zebrafish embryos.</a> Molecular Microbiology. 80 (4), 919-934 (2011).</li>
<li>Clay, H., Volkman, H. E., Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+necrosis+factor+signaling+mediates+resistance+to+mycobacteria+by+inhibiting+bacterial+growth+and+macrophage+death%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Tumor necrosis factor signaling mediates resistance to mycobacteria by inhibiting bacterial growth and macrophage death.</a> Immunity. 29 (2), 283-294 (2008).</li>
<li>Palha, N., Guivel-Benhassine, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+whole-body+visualization+of+Chikungunya+Virus+infection+and+host+interferon+response+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+pathogens%22%5BJournal%5D)">Real-time whole-body visualization of Chikungunya Virus infection and host interferon response in zebrafish.</a> PLoS pathogens. 9 (9), e1003619(2013).</li>
<li>Mostowy, S., Boucontet, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+as+a+new+model+for+the+in+vivo+study+of+Shigella+flexneri+with+phagocytes+and+bacterial+autophagy%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+pathogens%22%5BJournal%5D)">The zebrafish as a new model for the in vivo study of Shigella flexneri with phagocytes and bacterial autophagy.</a> PLoS pathogens. 9 (9), e1003588(2013).</li>
<li>Prajsnar, T. K., Cunliffe, V. T., Foster, S. J., Renshaw, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+vertebrate+model+of+Staphylococcus+aureus+reveals+phagocyte-dependent+resistance+of+zebrafish+to+non-host+specialized+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A novel vertebrate model of Staphylococcus aureus reveals phagocyte-dependent resistance of zebrafish to non-host specialized pathogens.</a> Cellular Microbiology. 10 (11), 2312-2325 (2008).</li>
<li>Van der Sar, A. M., Appelmelk, B. J., Vandenbroucke-Grauls, C. M. J. E., Bitter, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+star+with+stripes%3A+zebrafish+as+an+infection+model%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A star with stripes: zebrafish as an infection model.</a> Trends in Microbiology. 12 (10), 451-457 (2004).</li>
<li>Vergunst, A. C., Meijer, A. H., Renshaw, S. A., O’Callaghan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Burkholderia+cenocepacia+creates+an+intramacrophage+replication+niche+in+zebrafish+embryos%2C+followed+by+bacterial+dissemination+and+establishment+of+systemic+infection%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Burkholderia cenocepacia creates an intramacrophage replication niche in zebrafish embryos, followed by bacterial dissemination and establishment of systemic infection.</a> Infection and Immunity. 78 (4), 1495-1508 (2010).</li>
<li>Levraud, J. -P., Disson, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+observation+of+Listeria+monocytogenes-phagocyte+interactions+in+living+zebrafish+larvae%5BTitle%5D)+AND+%22Infection+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Real-time observation of Listeria monocytogenes-phagocyte interactions in living zebrafish larvae.</a> Infection and Immunity. 77 (9), 3651-3660 (2009).</li>
<li>Meijer, A. H., Spaink, H. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host-pathogen+interactions+made+transparent+with+the+zebrafish+model%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Drug+Targets%22%5BJournal%5D)">Host-pathogen interactions made transparent with the zebrafish model.</a> Current Drug Targets. 12 (7), 1000-1017 (2011).</li>
<li>Westerfield, M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWesterfield%2C+M+%22The+Zebrafish+Book%3A+A+Guide+for+the+Laboratory+Use+of+Zebrafish+%28Danio+Rerio%29%22">The Zebrafish Book: A Guide for the Laboratory Use of Zebrafish (Danio Rerio)</a>. , (2007).</li>
<li>Benard, E. L., van der Sar, A. M., Ellett, F., Lieschke, G. J., Spaink, H. P., Meijer, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infection+of+zebrafish+embryos+with+intracellular+bacterial+pathogens%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Infection of zebrafish embryos with intracellular bacterial pathogens.</a> Journal of Visualized Experiments. (61), e3781(2012).</li>
<li>Van Rooijen, N., Sanders, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liposome+mediated+depletion+of+macrophages%3A+mechanism+of+action%2C+preparation+of+liposomes+and+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Liposome mediated depletion of macrophages: mechanism of action, preparation of liposomes and applications.</a> Journal of Immunological Methods. 174 (1-2), 83-93 (1994).</li>
<li>Adams, K. N., Takaki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+tolerance+in+replicating+mycobacteria+mediated+by+a+macrophage-induced+efflux+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Drug tolerance in replicating mycobacteria mediated by a macrophage-induced efflux mechanism.</a> Cell. 145 (1), 39-53 (2011).</li>
<li>Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Looking+within+the+zebrafish+to+understand+the+tuberculous+granuloma%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Experimental+Medicine+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Looking within the zebrafish to understand the tuberculous granuloma.</a> Advances in Experimental Medicine and Biology. 783, 251-266 (2013).</li>
<li>Davis, J. M., Clay, H., Lewis, J. L., Ghori, N., Herbomel, P., Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+visualization+of+Mycobacterium-macrophage+interactions+leading+to+initiation+of+granuloma+formation+in+zebrafish+embryos%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Real-time visualization of Mycobacterium-macrophage interactions leading to initiation of granuloma formation in zebrafish embryos.</a> Immunity. 17 (6), 693-702 (2002).</li>
<li>Lamason, R. L., Mohideen, M. -A. P. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SLC24A5%2C+a+putative+cation+exchanger%2C+affects+pigmentation+in+zebrafish+and+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Science+%28New+York%2C+NY%29%22%5BJournal%5D)">SLC24A5, a putative cation exchanger, affects pigmentation in zebrafish and humans.</a> Science (New York, NY). 310 (5755), 1782-1786 (2005).</li>
<li>Renshaw, S. A., Loynes, C. A., Trushell, D. M. I., Elworthy, S., Ingham, P. W., Whyte, M. K. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+transgenic+zebrafish+model+of+neutrophilic+inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">A transgenic zebrafish model of neutrophilic inflammation.</a> Blood. 108 (13), 3976-3978 (2006).</li>
<li>Hall, C., Flores, M. V., Storm, T., Crosier, K., Crosier, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+zebrafish+lysozyme+C+promoter+drives+myeloid-specific+expression+in+transgenic+fish%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+developmental+biology%22%5BJournal%5D)">The zebrafish lysozyme C promoter drives myeloid-specific expression in transgenic fish.</a> BMC developmental biology. 7, 42(2007).</li>
<li>Takaki, K., Davis, J. M., Winglee, K., Ramakrishnan, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+the+pathogenesis+and+treatment+of+Mycobacterium+marinum+in+zebrafish%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocols%22%5BJournal%5D)">Evaluation of the pathogenesis and treatment of Mycobacterium marinum in zebrafish.</a> Nature Protocols. 8 (6), 1114-1124 (2013).</li>
<li>Stoop, E. J. M., Schipper, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Zebrafish+embryo+screen+for+mycobacterial+genes+involved+in+the+initiation+of+granuloma+formation+reveals+a+newly+identified+ESX-1+component%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Zebrafish embryo screen for mycobacterial genes involved in the initiation of granuloma formation reveals a newly identified ESX-1 component.</a> Disease Models Mechanisms. 4 (4), 526-536 (2011).</li>
<li>Carvalho, R., de Sonneville, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+high-throughput+screen+for+tuberculosis+progression%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">A high-throughput screen for tuberculosis progression.</a> PloS One. 6 (2), e16779(2011).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Le poisson zèbre a récemment émergé comme un excellent système de modèle vertébré pour étudier la dynamique de l&#39;infection bactérienne utilisant large champ et imagerie confocale en temps réel 36. La combinaison de suspensions mycobactériennes dispersées (protocole 2.2) ainsi que les méthodes de micro-injection (protocole 4) permet infections reproductibles systémiques, et le suivi ultérieur et la visualisation de la progression de l&#39;infection avec un accent particulier sur les interactions bactérienn...

Mycobacterium abscessus est un pathogène émergent qui provoque une large gamme de syndromes cliniques chez l&#39;homme. Ceux-ci comprennent les infections cutanées ainsi que des infections pulmonaires chroniques sévères, principalement rencontrées dans immunodéprimés et chez les patients atteints de fibrose kystique 1,2,3,4. M. abscessus est également considéré comme l&#39;un des principaux espèces de mycobactéries à croissance rapide responsables des infections nosocomiales et iatrogènes chez les humains. En outre, plusieurs rapports récents ont mis en évidence la possibilité que M. abscessus pourrait traverser la barrière hémato-encéphalique et induire des lésions importantes dans le système nerveux central (SNC) 5,6. En dépit d&#39;être un producteur rapide, M. expositions abscessus aussi plusieurs fonctionnalités pathogènes qui sont liés à ceux de Mycobacterium tuberculosis, y compris la capacité de garder le silence pendant des années au sein des structures granulomateuses et de générer des lésions dans les poumons caséeuses 7. Plus inquiétante est le faible sensibilité de M. abscessus aux antibiotiques, ce qui rend ces infections extrêmement difficile à traiter conduisant à un taux d&#39;échec thérapeutique significatif 8,9. La menace importante de cette espèce est principalement sa résistance intrinsèque à des antibiotiques, ce qui est une préoccupation majeure dans les établissements 10 de santé publique et d&#39;une contre-indication à la transplantation pulmonaire 11. M. de les écrans lisses (S) ou rugueuses morphotypes (R) de la colonie qui mènent à différents résultats cliniques. A la différence de la souche S, R bactéries ont tendance à croître de bout en bout, ce qui conduit à une corde ou un cordon structure semblable à 12,13. Plusieurs études indépendantes basées sur des modèles cellulaires ou animaux soit révélé le phénotype hyper-virulence de la R morphotype 14,15. Des études épidémiologiques, les cas les plus graves de M. infections pulmonaires abscessus semblent être associés avec des variantes R 16 qui sont la seule variantea vu persister pendant des années dans un hôte infecté 3. La différence de morphotype repose sur la présence (en S) ou perte (en R) de glycopeptidolipides de surface associée (GPL) 12. Toutefois, en raison des limites inhérentes aux modèles cellulaires / animales actuellement disponibles utilisés pour étudier M. infection abscessus, nos connaissances concernant les événements physiopathologiques des variantes de R ou S reste obscure. L&#39;infection des souris immuno-compétentes par voie intraveineuse ou en aérosol conduit à la colonisation transitoire, d&#39;empêcher l&#39;utilisation de souris pour étudier les infections persistantes et pour vivo tests de sensibilité dans la drogue 17. Par conséquent, le développement de modèles animaux qui se prêtent à la manipulation de la réponse de l&#39;hôte est un défi majeur. Dans ce contexte, les modèles non-mammifères d&#39;infection ont été récemment mis au point, y compris Drosophila melanogaster 18 qui offre plusieurs avantages tels que le coût, la rapidité et l&#39;acceptabilité éthique oVer le modèle de la souris. Le modèle de poisson zèbre (Danio rerio) de l&#39;infection a également été explorée de visualiser, par imagerie non invasive, la progression et la chronologie de M. abscessus infection chez un animal en direct 19. Surtout, une preuve de concept a également été établi pour démontrer son aptitude pour les évaluations antibiotiques in vivo contre M. abscessus 17,20. Le poisson zèbre ont été largement utilisés au cours des deux dernières décennies pour étudier les interactions entre les différents agents pathogènes et le système immunitaire de l&#39;hôte 21. Le succès croissant de ce modèle vertébré alternatif repose sur les opportunités majeurs et uniques qui ont motivé et validés son utilisation pour une meilleure compréhension de nombreuses infections virales et bactériennes 19,22,23,24,25,26,27,28,29. Contrairement à la plupart des autres modèles animaux, embryons de poisson zèbre sont optiquement transparent, ce qui permet l&#39;imagerie de fluorescence non invasive 30. Cette has conduit à étudier M. abscessus infecté embryons de poisson zèbre avec des détails sans précédent, culminant avec la description de Cording extracellulaire, qui représentent un exemple de plasticité morphologique bactérienne. Cording représente un nouveau mécanisme de subversion du système immunitaire et un mécanisme essentiel dans la promotion pathogenèse de M. aiguë infection abscessus 19. Ce rapport décrit les nouveaux outils et les méthodes utilisant l&#39;embryon de poisson zèbre à déchiffrer les traits physiopathologiques de M. abscessus infection et d&#39;étudier les interactions intimes entre le bacille et le système immunitaire inné. Tout d&#39;abord, la micro-injection d&#39;un protocole détaillé qui comprend le traitement de l&#39;inoculum bactérien, la préparation de l&#39;embryon, et l&#39;infection en soi, est présentée. Méthodes spécifiquement adaptés pour évaluer M. virulence abscessus par la mesure de différents paramètres, tels que la survie de l&#39;hôte et de la charge bactérienne, sont présentés. Une attention particulière est donnée sur la façonà surveiller, à un niveau spatio-temporel, et le sort progression de l&#39;infection et la réponse immunitaire de l&#39;hôte à M. abscessus par microscopie vidéo. En outre, pour enquêter sur la contribution et le rôle des macrophages lors de M. abscessus infection, les méthodes pour générer des macrophages-appauvri embryons (en utilisant des approches soit génétiquement ou chimiquement base-) sont décrites. Enfin, les protocoles de visualiser les interactions spécifiques avec les macrophages ou les neutrophiles en utilisant soit des embryons fixes ou vivant sont documentés. Le but de ce rapport est de stimuler de nouvelles études pour jeter une lumière nouvelle sur M. les mécanismes de virulence abscessus et notamment le rôle de Cording dans la mise en place d&#39;un processus d&#39;infection aiguë et incontrôlée.

<table><tbody><tr><td>BBL MGIT PANTA</td><td>BD Biosciences</td><td>245114</td><td></td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine&nbsp ;</td><td>Euromedex</td><td>04-100-811-E</td><td></td></tr><tr><td>Catalase de foie de bovin</td>.<td>Sigma-Aldrich</td><td>C40</td><td></td></tr><tr><td>Difco Middlebrook 7H10 Agar</td><td>BD Biosciences</td><td>262710</td><td></td></tr><tr><td>Difco Middlebrook 7H9 Bouillon</td><td>BD Biosciences</td><td>271310</td><td></td></tr><tr><td>Sel de méthanesulfonate d’éthyle 3-aminobenzoate (tricaïne)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>A5040</td><td></td></tr><tr><td>Acide oléique</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>O1008</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldéhyde</td><td>Delta Microscopie</td><td>15710</td><td></td></tr><tr><td>Rouge phénolique</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>319244</td><td></td></tr><tr><td>Tween 80</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P4780</td><td></td></tr><tr><td>Agar</td><td>Gibco Life Technologie</td><td>30391-023</td><td></td></tr><tr><td>Agarose à bas point de fusion</td><td>Sigma-Aldrich</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sels de mer instantanés de mer&nbsp ;</td><td>Aquarium Systems Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Capillaires en verre borosilicaté&nbsp ;</td><td>Instrument Sutter Inc</td><td>BF100-78-10</td><td>1 mm D.E. X 0,78 mm D.I.</td></tr><tr><td>Dispositif d’extraction de micropipettes&nbsp ;</td><td>Sutter Instrument Inc</td><td></td><td>Extracteur de micropipette flamme/marron P-87</td></tr><tr><td>Microinjecteur</td><td>Tritech Research&nbsp ;</td><td></td><td>Micro-injecteur numérique, pince à épiler MINJ-D</td></tr><tr><td></td><td>Sciences Tools inc</td><td></td><td>Dumont # M5S&nbsp ;</td></tr><tr><td>Pointes de microchargeur</td><td>Eppendorf</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

décrypter et de l&#39;imagerie et la pathogenèse de cording<em&gt; mycobacterium abscessus</em&gt; dans embryons de poissons zèbres

Deciphering and Imaging Pathogenesis and Cording of Mycobacterium abscessus in Zebrafish Embryos

Les embryons de poisson-zèbre (Danio rerio) sont de plus en plus utilisés comme modèle d’infection pour étudier la fonction du système immunitaire inné des vertébrés dans les interactions hôte-pathogène. La facilité d’obtention d’un grand nombre d’embryons, leur accessibilité due au développement externe, leur transparence optique ainsi que la disponibilité d’une large panoplie d’outils génétiques/immunologiques et de collections de lignées rapporteures transgéniques, À cet égard, le présent manuscrit décrit l’utilisation du poisson-zèbre comme système modèle in vivo pour étudier la chronologie de l’infection à Mycobacterium abscessus. Cet agent pathogène humain peut exister sous forme lisse (S) ou rugueuse (R), selon la composition de la paroi cellulaire, et leur virulence respective peut être imagée et comparée chez les embryons et les larves de poisson-zèbre. La micro-injection de variants fluorescents S ou R directement dans la circulation sanguine via la veine caudale entraîne des infections chroniques ou aiguës/mortelles, respectivement. Ce système biologique permet la visualisation et l’analyse à haute résolution du rôle des cordons mycobactériens dans la promotion de la formation d’abcès. De plus, l’utilisation de bactéries fluorescentes ainsi que de lignées de poissons-zèbres transgéniques hébergeant des macrophages fluorescents offre une occasion unique d’imagerie multicolore des interactions hôte-pathogène. Cet article décrit des protocoles détaillés pour la préparation d’un inoculum homogène de M. abscessus et pour l’injection intraveineuse d’embryons de poisson-zèbre pour l’imagerie ultérieure par fluorescence de l’interaction avec les macrophages. Ces techniques ouvrent la voie à de futures recherches impliquant des mutants défectueux dans la formation de la moelle épinière et visent à comprendre comment cela affecte la pathogénicité de M. abscessus chez un vertébré entier.

Bien que différents sites anatomiques peuvent être injectés 32, les injections de veine caudale sont souvent utilisés pour générer une infection systémique pour les analyses ultérieures, y compris les expériences de survie, la détermination de la charge bactérienne, une activité de phagocytose ou la formation du cordon. Les injections dans les muscles de la queue sont utilisés pour évaluer le recrutement des macrophages au site d&#39;injection (figure 3A). Pour étudier et de comparer la virul...

Les embryons de poisson-zèbre optiquement transparents sont largement utilisés pour étudier et visualiser en temps réel les interactions entre les micro-organismes pathogènes et les cellules immunitaires innées. La micro-injection de Mycobacterium abscessus, combinée à l’imagerie par fluorescence, est utilisée pour examiner les caractéristiques pathogènes essentielles telles que la formation de la moelle épinière chez les embryons de poisson-zèbre.

Décrypter et de l&#39;imagerie et la pathogenèse de Cording<em&gt; Mycobacterium abscessus</em&gt; Dans embryons de poissons zèbres

Zebrafish (Danio rerio) embryos are increasingly used as an infection model to study the function of the vertebrate innate immune system in host-pathogen ...

L'objectif général de cette procédure est d'étudier et de comparer la virulence de souches de Mycobacterium abscessus et de décrire les interactions entre ces bactéries et le système immunitaire inné de l'hôte in vivo à l'aide d'embryons de poisson zèbre transparents. Cela est réalisé en préparant tout d'abord une inoculum bactérien homogène. Ensuite, les embryons sont injectés par voie intraveineuse avec les suspensions bactériennes à 30 heures post-fécondation.En outre, afin d'étudier plus précisément le rôle des macrophages dans le contrôle de l'infection, une procédure d'injection basée sur des lipocholates est utilisée pour générer des embryons dépourvus de macrophages. Enfin, les embryons infectés sont préparés et observés par microscopie à fluorescence et microscopie confocale afin de suivre l'évolution de l'infection. En définitive, les résultats obtenus permettent de visualiser les interactions spécifiques entre les cellules phagocytaires fluorescentes et M. abscessus, soit sous forme de bâtonnets isolés, soit sous forme de cordons serpentinés à l'intérieur d'un embryon transparent.Le principal avantage de l'utilisation du poisson zèbre par rapport à d'autres modèles animaux comme la souris est qu'il permet d'étudier spécifiquement le processus d'infection en temps réel et d'observer les interactions spécifiques entre les microbactéries abscessus et les macrophages ou les neutrophiles. Cette étape constitue un point critique pour la pression d'injection ultérieure chez le poisson zèbre. En raison de la forte propension de la mycobactérie abscessus rugueuse à former de grands agrégats et à produire des biofilms, un traitement spécifique est donc nécessaire pour préparer un inoculum homogène et quantitativement contrôlé avant la microinjection.Pour préparer m abscessus, inoculer les cultures en croissance exponentielle provenant de flacons de culture tissulaire de 150 centimètres carrés dans des tubes en plastique stériles de 50 millilitres et centrifuger à 4 000 ×g et à température ambiante pendant 15 minutes. Utiliser un millilitre de Middlebrook 7H9, enrichi avec l'appoint OADC et du Tween 80, ci-après appelé milieu 7H9, pour resuspendre le culot et éloquer. Transférer 200 microlitres des suspensions bactériennes dans des tubes de 1,5 millilitre à l’aide d’une aiguille de calibre 26 et homogénéiser chaque ALI quad de suspension bactérienne 15 fois.Ensuite, à l’aide d’un bain à ultrasons, soniquez trois fois pendant 10 secondes chacune, avec des pauses de dix secondes. Entre chaque sonication, ajoutez un millilitre de milieu DMEM 7H9 et vortexez brièvement, puis centrifugez à 100 × g pendant trois minutes. Récupérez soigneusement les surnageants contenant les mycobactéries afin d’éviter les agrégats, et transférez les suspensions homogènes dans un tube en plastique stérile de 50 millilitres.Centrifuger la suspension à 4 000 × g pendant cinq minutes et utiliser 200 microlitres de milieu 7H9 pour resuspendre le culot afin d'évaluer l'inoculum bactérien final. Selon le protocole écrit, la démonstration visuelle de cette méthode est essentielle, car les étapes sont difficiles à apprendre en raison de la manipulation délicate précise requise pour l'injection dans les embryons de poisson zèbre au microscope, ainsi que du temps nécessaire à l'acquisition de la technique de microinjection. Pour réaliser la microinjection de M. abscessus environ 24 heures après la fécondation (hpf), utiliser une pince pour disposer les embryons dans une boîte de Pétri de 100 millimètres et les maintenir à 28,5 degrés Celsius.Transférez 30 à 48 embryons HPF vers une chambre de positionnement en forme de V remplie de 25 millilitres d’eau pour poisson contenant 270 milligrammes par litre de trica, à l’aide d’une pointe de microchargeur coupée. Disposez correctement les embryons dans les canaux pour faciliter les manipulations. Utilisez du PBST avec 0,05 % compris entre 80 et 90 pour diluer l’inoculum microbactérien à l’UFC souhaitée à administrer, et ajoutez 10 % de rouge de phénol afin de vérifier une injection correcte à l’aide d’une pointe de microchargeur.Chargez une aiguille de microinjection avec cinq à 10 microlitres de l'inoculum bactérien. Insérez l'aiguille de microinjection dans le porte-aiguille d'un micromanipulateur relié à l'injecteur, puis utilisez de fines pinces pour briser l'extrémité de l'aiguille afin d'obtenir un diamètre d'ouverture compris entre cinq et 10 micromètres.Étalonnez le volume d'injection en ajustant la pression et la durée de microinjection. Ensuite, pour obtenir le volume d'injection requis, mesurez le diamètre d'une gouttelette expulsée dans le vitellus d'un embryon afin de réaliser une microinjection dans la veine coddale. Positionnez l'embryon avec le côté ventral tourné vers l'aiguille et placez la pointe de l'aiguille près de l'orifice urogénital.Poussez délicatement la pointe de l'aiguille dans l'embryon jusqu'à ce qu'elle perce légèrement la région de la veine coddle. Ensuite, injectez le volume souhaité de suspension bactérienne, généralement d'un à trois nanolitres contenant environ 100 UFC par nanolitre. Incubez et surveillez les embryons conformément au protocole décrit dans le texte afin de réaliser le lipo Choate, l'épuisement des macrophages et les embryons à 24 HP.Fate, les embryons, puis transférez-les dans une boîte d'injection remplie d'eau pour poissons contenant de la trica.Ensuite, orientez-les avec le côté dorsal vers le bas. Après avoir vortexé la solution de clodronate encapsulé dans des liposomes, chargez l'aiguille capillaire micro et étalonnez le volume d'injection. Percez la région de la veine coddle comme démontré précédemment, et injectez deux à trois litres de solution.Répétez l'injection trois fois. Incubez les embryons à 28,5 degrés Celsius et utilisez la microscopie à fluorescence pour contrôler l'épuisement adéquat des macrophages avant l'infection. Comme démontré précédemment dans cette vidéo, dénombrez les unités formant des colonies ou CFU au point temporel souhaité.Prélevez cinq embryons par condition d'infection et transférez chaque embryon dans un tube microcentrifuge de 1,5 millilitre. Anesthésiez les embryons par congélation en les incubant sur de la glace pendant 10 minutes après avoir euthanasié les embryons avec 300 à 500 milligrammes par litre de Trica. Utilisez de l'eau stérile pour laver les embryons deux fois dans un nouveau tube.Ensuite, après avoir retiré l'eau, ajoutez 2 % de Triton X-100 dans un XPBS à chaque embryon, puis utilisez une aiguille de calibre 26 pour homogénéiser le tissu afin d'obtenir une lyse complète. Après centrifugation de la suspension, utilisez du X-P-B-S-T 1X pour remettre en suspension le culot. Diluez ensuite par séries le homogénat sur du Middlebrook 7H10 OADC.Supplémentez avec B-B-L-M-G-I-T Panta et incubez les plaques à 30 degrés Celsius pendant quatre jours avant de compter les colonies. Pour l'imagerie en direct de l'infection par M abscessus, montez les embryons anesthésiés dans 1 % d'agarose à bas point de fusion dans une boîte de Pétri de 35 millimètres à fond en verre destinée à un microscope inversé, ou sur une lame creuse simple pour la microscopie confocale droite. Orientez l'embryon dans la position souhaitée et recouvrez l'agarose solidifiée par de l'eau pour poisson contenant de la trica. Pour l'imagerie fixée de l'infection par M abscessus, après euthanasie des embryons, transférez-les dans des tubes microcentrifugeurs de 1,5 millilitre et fixez les embryons dans du paraformaldéhyde 4 % dans du PBS-T 1X pendant deux heures.À température ambiante, éliminer l'aldéhyde paraformique en lavant les embryons deux fois avec du X-P-B-S-T pendant 10 minutes afin de préserver l'intégrité des tissus et la fluorescence de manière successive. Incuber les embryons dans des concentrations croissantes de solution de glycérol pendant 10 minutes par condition. Déposer l'embryon inclus dans du glycérol à 50 % dans une chambre d'observation.Enfin, utilisez un microscope à fluorescence avec un objectif 10 x ou un microscope confocal à fluorescence avec des objectifs 40 x ou 63 x pour l'acquisition séquentielle de fluorescence et l'imagerie en transmission de l'embryon. Afin d'étudier et de comparer la virulence des variants rugueux et lisses de M. abscessus, des bactéries fluorescentes ont été injectées par voie intraveineuse dans 30 embryons présentant un taux normal de PCHF. Contrairement au variant lisse, le variant rugueux induit une infection plus sévère et létale, accompagnée du développement d'abcès au niveau du système nerveux central.Les différences de virulence ont été quantifiées soit en dénombrant les UFC, soit en déterminant les comptages de pixels fluorescents qui sont corrélés. Cela indique des charges bactériennes plus élevées pour la variante rugueuse. Comme le montre cette figure, la cinétique de la formation des cordons peut être suivie et visualisée par microscopie vidéo de manière non invasive, démontrant la propension de la variante rugueuse à se répliquer de façon extracellulaire, comme illustré ici. L'infection d'embryons déplétés en macrophages par la variante rugueuse de M. abscessus entraîne une augmentation massive des charges bactériennes et de la production de cordons, ainsi qu'une mort larvaire rapide.Cela indique clairement que les macrophages sont nécessaires pour contrôler l'infection par M. abscessus afin d'observer en temps réel les interactions entre les macrophages et M. abscessus. La lignée transgénique EGFP-mCherry, qui produit des macrophages fluorescents rouges, peut être utilisée. Les infections induisent un recrutement marqué de macrophages avec une phagocytose efficace des bactéries individuelles, tandis que les cordons mycobactériens représentent une stratégie développée par M. abscessus pour échapper à la phagocytose après leur développement.Cette technique a ouvert la voie à l'exploration du rôle important du codage en tant que nouveau mécanisme d'évasion immunitaire. Grâce au modèle de zebrafish d'infection, il devient désormais possible d'observer et de décrire la contribution in vivo des codes dans la pathogenèse de Mycobacterium abscessus.

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