Livraison des protéines, des peptides ou imperméable aux cellules petites molécules dans des cellules vivantes par incubation avec le réactif dfTAT endosomolytique

L’objectif global de l’expérience suivante est d’administrer des macromolécules dans des cellules vivantes à l’aide d’un dimère, d’un tat fluorescent ou d’un df tat, un réactif capable de pénétrer très efficacement dans les cellules sans les endommager. Ceci est réalisé en générant et en purifiant d’abord l’agent de livraison. Dfta comme deuxième étape.

Dfta est incubé avec des cellules pendant une heure à 37 degrés Celsius en présence de la cargaison de macromolécules d’intérêt, df tat induit l’absorption de la cargaison à l’intérieur des vésicules endocytaires. Les vésicules se transforment en endosomes précoces, atteignant finalement le stade tardif de l’endosome où DF tat est capable de libérer la cargaison dans l’espace cytosolique des cellules. Ensuite, les cellules sont imagées par microscopie à fluorescence afin d’évaluer l’efficacité de livraison de la detta et de la cargaison d’intérêt.