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DOI: 10.3791/53250-v
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Ce protocole décrit l’utilisation de préparations de tissus intestinaux excisés ou « sacs intestinaux » comme modèle ex vivo de la fonction de la barrière intestinale. Ce modèle peut être utilisé pour évaluer l’intégrité de la barrière épithéliale et de la couche de gel muqueux à des sites intestinaux spécifiques dans des modèles animaux de maladies digestives.
L’objectif global de cette procédure est d’évaluer l’intégrité intestinale localisée dans des modèles animaux de maladies gastro-intestinales. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés sur les maladies gastro-intestinales, par exemple si l’intégrité musossale est perdue ou s’il y a une augmentation de l’absorption d’une molécule ou d’une bactérie spécifique pendant la maladie. Le principal avantage de cette technique est qu’elle peut être utilisée pour évaluer des zones spécifiques du tractus gastro-intestinal. Pour préparer le tractus gastro-intestinal, commencez par vaporiser l’abdomen et le thorax de la souris avec de l’éthanol à 70 % et utilisez des ciseaux pour faire une incision horizontale au milieu de l’abdomen, afin d’exposer le péritoine. Ensuite, coupez la partie supérieure de l’intestin grêle de l’estomac au niveau du sphincter pylorique et le gros intestin au niveau de la bordure anale. Ensuite, à l’aide d’une pince, vous retirez délicatement le mésentère et placez le tractus intestinal dans un milieu oxygéné préchauffé. Déterminer la zone à évaluer pour la perméabilité, en mesurant les sections du duodénum et du jéjunum par rapport à l’estomac dans les sections du côlon et de l’ilium par rapport au cæcum afin de maintenir l’uniformité entre les animaux de laboratoire. Notez la présence de tissus lymphoïdes associés aux muqueuses tels que les plaques de Peyer, qui peuvent être identifiées comme de petits nodules sur le côté sarosale de la lumière. Ensuite, coupez la section sélectionnée et utilisez une seringue de 1 ml pour rincer doucement le contenu luménal du segment dans une boîte de Pétri contenant 37
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