Name: Lanalyse du filtre à air dans léchantillon dendotoxines et de lADN contenu (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-07T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 16 s
Description: Apprenez à analyser les endotoxines et l'ADN dans les particules aéroportées prélevées sur filtres en fibre de quartz. Cette méthode permet d'étudier les aérosols biologiques intérieurs et extérieurs pour la recherche en santé environnementale.

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Les auteurs remercient le Dr Yoav Barak de la Faculté de chimie de l’Institut Weizmann pour son soutien et ses conseils. Cette étude a été soutenue par la Fondation israélienne des sciences (subvention # 913/12), et par la Fondation Minerva avec un financement du ministère fédéral allemand de l’Éducation et de la Recherche.

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</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Cet ouvrage décrit les méthodes d&#39;extraction et de détection pour quantifier les endotoxines et de l&#39;ADN présent dans des échantillons d&#39;aérosols collectés sur des filtres. Les méthodes nécessitent des routines précises et peuvent être réalisées facilement aussi longtemps que l&#39;expérimentateur adhère à quelques points essentiels et importants discutés ici. Pour l&#39;étape de détection d&#39;endotoxine, notons que la solution de lysat est tout à fait visqueux et tend à produi...

Des prélèvements d&#39;air sur les filtres est un outil de base dans la recherche sur les aérosols atmosphériques. 1 Les filtres échantillonnés sont le point de départ pour diverses caractérisations biologiques des particules ambiantes recueillies chimiques, physiques, et. 2-11 L&#39;avantage de cette approche est que différentes analyses peuvent être effectuée hors ligne sur le même échantillon. Compiler les données de toutes les différentes analyses permet au chercheur d&#39;obtenir une bonne compréhension des caractéristiques des particules collectées et les aides à la résolution des questions complexes dans les sciences de l&#39; atmosphère. 12,13 Par exemple, l&#39; air-échantillons marins et intérieures prises au cours de la même période peut être comparé en ce qui concerne la toxicité des particules échantillonnée et la composition biologique. 14 pour cette étude, les lipopolysaccharides (LPS), des composants sur bactériennes parois cellulaires gram-négatives, également connu sous endotoxines ont été extraites des filtres échantillonnés à terre et à un site intérieur, et ont été évalués en utilisant lelimule amébocyte lysat (LAL). En parallèle, une évaluation génomique de la teneur en bactéries (bactéries totales, Gram-négatives, et les cyanobactéries) a été effectuée sur le même échantillon en utilisant la réaction en chaîne par polymérase quantitative (Q-PCR). Le test LAL est basée sur des mesures de turbidité formées suite à l&#39;ajout d&#39;un extrait aqueux de amœbocytes de la limule, Limulus polyphemus, à une solution aqueuse contenant les endotoxines. Plus la concentration d&#39;endotoxine dans l&#39;échantillon, la turbidité se développe rapidement. 15 L&#39;analyse Q-PCR est basée sur un signal de fluorescence émis sous forme d&#39; un fragment spécifique d&#39;ADN est amplifiée. 16 Par suivi en temps réel du signal pendant la phase exponentielle de la PCR réaction et étalonnage avec une courbe standard, la quantité d&#39;ADN initial peuvent être quantifiés. La combinaison de ces deux analyses avec d&#39; autres, comme détaillé ailleurs, 14 peuvent fournir une bonne estimation des niveaux d&#39;endotoxines et de laquantité de bactéries d&#39;origine dans les échantillons. Le but de la méthode présentée ici est d&#39;obtenir une analyse très précise et fiable de l&#39;endotoxine et l&#39;ADN contenu des bio-aérosols extraits de filtres. Bien que les méthodes d&#39;échantillonnage des caractéristiques physico - chimiques et inorganiques des aérosols sont bien connus et, plus récemment, des méthodes ont été développées pour enquêter sur sa composante de matière organique, 17 il y a eu peu de recherches sur la composante biologique des aérosols. 18 La raison pour laquelle le courant méthode consiste à combler cette lacune en présentant en détail une méthode robuste pour extraire, analyser et identifier la fraction biologique des aérosols atmosphériques 14. La méthode détaillée ici devrait trouver une large utilisation dans les projets intérieurs et extérieurs biologiques aérosol recherche impliquant l&#39; analyse du filtre. 20-24

<table><tbody><tr><td>Filter sampling</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>HiVol 3000 - Échantillonneur d’air à haut volume</td><td>Ecotech</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Filtres en microfibre de quartz</td><td>Whatman</td><td>1851-865</td><td>203 mm x 254 mm</td></tr><tr><td>ELF - Fours à chambre de laboratoire</td><td>Carbolite</td><td>ELF 11series</td><td></td></tr><tr><td>Feuille d’aluminium</td><td>Opale</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nom</td><td>Entreprise</strong</td><td>>Numéro de catalogue</strong</td><td>>Comments</td></tr><tr><td>Endotoxin</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ethanol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>16368&nbsp ;</td><td>Réactif de laboratoire, 96 %</td></tr><tr><td>Enceinte de sécurité biologique Airstream Classe II AC-4E1</td><td>ESCO</td><td>10011712</td><td></td></tr><tr><td>Pyrotell -T</td><td>Associates de Cape Cod, Inc.</td><td>T0051</td><td></td></tr><tr><td>Norme de contrôle Endotoxin</td><td>Associates de Cape Cod, Inc.</td><td>E0005-1</td><td>Escherichia coli&nbsp ; O113 :H10, 0,5 et micro ; g/flacon 1 paquet</td></tr> de <tr><td>réactif LAL Water</td><td>Associates de Cape Cod, Inc.</td><td>W0051</td><td></td></tr><tr><td>Seringue stérile de 10 ml avec embout Luer-Lok</td><td>Becton-Dickinson & Co.</td><td></td><td></td>309605</tr><tr><td>aiguille à seringue BD Precisionglide</td><td>Becton-Dickinson & Co.</td><td>305129</td><td>Stérile&nbsp ;</td></tr><tr><td>Parafilm-M ruban d’étanchéité</td><td>Parafilm</td><td>P7543</td><td>Sigma numéro de catalogue</td></tr><tr><td>Microtubes</td><td>Axigen</td><td>MCT-200-C</td><td>2 ml, apyrogène</td></tr><tr><td>1,12 cm de diamètre Perceur de liège</td><td>Boekel Scientific</td><td>1601 BD Series - Acier</td><td>Partie d’un kit de foreurs de liège contenant des foreurs de différents diamètres.&nbsp ;</td></tr><tr><td>Boîte de Pétri 50 mm</td><td>Miniplast Ein-Shemer</td><td>72050-01</td><td>Aseptic</td></tr><tr><td>Vortex Genie 2&nbsp ;</td><td>Industries scientifiques, inc.</td><td>SI-0297</td><td></td></tr><tr><td>Microcentrifugeuse 5415 D</td><td>Eppendorf</td><td>22621408</td><td></td></tr><tr><td>TC MicroWell 96 F SI avec couvercle</td><td>Nunc</td><td>167008</td><td>Puits à fond plat (avec couvercle (emballé individuellement)), stériles, sans pyrogène</td></tr><tr><td>Synergy HT Multi-Detection Microplate Reader</td><td>Biotek</td><td>7091000</td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Numéro de catalogue</strong</td><td>>Comments<</td></tr><tr><td>strong>DNA</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>DNA away</td><td>Sigma Aldrich</td><td>7010</td><td></td></tr><tr><td>ADN standard de l’espèce microbienne d’intérêt</td><td>ATCC ou autre collection</td><td></td> de cultures <td>Soit la souche microbienne appropriée pour l’extraction de l’ADN, soit l’ADN extrait</td></tr><tr><td>Tampon</td> TE <td>d’hémocytomètre</td><td>Marienfeld</td><td>640030</td> amélioré par Neubauer</tr><tr><td>, Low EDTA</td><td>Life Technologies</td><td>12090-015</td><td>10 mM Tris-HCl (pH 8,0)&nbsp ; 0,1 mM d’EDTA&nbsp ;</td></tr><tr><td>Eau de qualité PCR sans nucléases&nbsp ;</td><td>Sigma Aldrich</td><td>3315959001</td><td></td></tr><tr><td>amorces PCR</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td>Cible les espèces microbiennes d’intérêt</td></tr><tr><td>Sondes à double marquage</td><td>Sigma Aldrich</td><td></td><td>Cible les espèces microbiennes d’intérêt</td></tr><tr><td>Tubes à bouchon à vis</td><td>Axigen</td><td>ST-200-SS</td><td>2 ml&nbsp ;</td></tr><tr><td>Kit d’extraction d’ADN PowerSoil&nbsp ;</td><td>Mo Bio Laboratories</td><td>12888-100</td><td></td></tr><tr><td>Perles de verre, lavées à l’acide 425-600 & micro ; m</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G8772-100G</td><td></td></tr><tr><td>Perles de verre, lavées à l’acide < 106 et micro ; m</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G4649-100G</td><td></td></tr><tr><td>PowerSoil Solution C1</td><td>Mo Bio Laboratories</td><td>12888-100-1</td><td>Tampon de lyse cellulaire , Power soil Kit</td></tr><tr><td>Magic Touch seau à glace</td><td>Bel-Art</td><td>18848-4001</td><td></td></tr><tr><td>Mini-Beadbeater-16</td><td>BioSpec</td><td>607EUR</td><td></td></tr><tr><td>Système de PCR en temps réel StepOnePlus</td><td>Applied Biosystems</td><td>4376600</td><td></td></tr><tr><td>Fast SYBR Green Master Mix</td><td>Applied Biosystems</td><td>4385612</td><td></td></tr><tr><td>TaqMan Expression génique Master Mix</td><td>Applied Biosystems</td><td>4370048</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp Fast Optical 96-Well Reaction Plate avec code-barres, 0,1 ml</td><td>Applied Biosystems</td><td>4346906</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp Splash-Free 96-Well</td> Base <td>Applied Biosystems</td><td>4312063</td><td></td></tr><tr><td>MicroAmp Optical Adhesive Film</td> <td>adhésifApplied Biosystems</td><td>4311971</td><td></td></tr><tr><td>Centrifugeuse 5810 R</td><td>Eppendorf</td><td>5811 000.010</td><td>Rotor A-4-62 avec godets MTP&nbsp ;</td></tr></tbody></table>

l&#39;analyse du filtre à air dans l&#39;échantillon d&#39;endotoxines et de l&#39;adn contenu

Air-sampled Filter Analysis for Endotoxins and DNA Content

la recherche d&#39;aérosol extérieure utilise couramment les matières particulaires échantillonné sur les filtres. Cette procédure permet à diverses caractérisations des particules collectées à effectuer en parallèle. Le but de la méthode présentée ici est d&#39;obtenir une analyse très précise et fiable de l&#39;endotoxine et l&#39;ADN contenu des bio-aérosols extraits de filtres. L&#39;extraction de poids moléculaire élevé des molécules organiques, telles que des lipopolysaccharides, des filtres échantillonnés consiste à secouer l&#39;échantillon dans un milieu à base d&#39;eau exempte de pyrogènes. L&#39;analyse qui suit est basée sur une réaction enzymatique qui peut être détectée au moyen d&#39;une mesure turbidimétrique. En conséquence de la teneur organique élevée sur les filtres de l&#39;échantillon, l&#39;extraction de l&#39;ADN à partir des échantillons est effectuée en utilisant un kit d&#39;extraction d&#39;ADN du commerce qui a été conçu à l&#39;origine pour les sols et modifié pour améliorer le rendement de l&#39;ADN. La détection et la quantification des espèces microbiennes spécifiques à l&#39;aide Reacti en chaîne par polymérase quantitativesur (q-PCR) sont décrits et par rapport aux autres méthodes disponibles.

Il est commun pour étudier les aérosols atmosphériques en utilisant &quot;off-line&quot; analyses de filtres échantillonnés (voir la figure 2). 32 Les analyses chimiques de la matière comprennent organique (par exemple les protéines, les molécules d&#39;hydrocarbures, saccharides) et inorganiques (métaux, sels) contenu échantillonné . Les analyses biologiques comprennent le contenu viable et non viable microorganisme, l&#39;identification des...

Deux analyses complémentaires de particules biologiques atmosphériques provenant de filtres échantillonnés à l’air sont décrites ici : l’extraction et la détection d’endotoxines et d’ADN.

L&#39;analyse du filtre à air dans l&#39;échantillon d&#39;endotoxines et de l&#39;ADN contenu

Outdoor aerosol research commonly uses particulate matter sampled on filters. This procedure enables various characterizations of the collected particles ...

L'objectif général de cette procédure est de décrire comment analyser précisément la teneur en endotoxines et en ADN des particules aéroportées extraites, prélevées sur des filtres. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans la recherche sur les aérosols biologiques en intérieur et en extérieur, notamment en ce qui concerne les raisons sanitaires. La procédure de prélèvement sur filtre sera démontrée par Yinon Mazar, étudiant diplômé de mon laboratoire.Pour un échantillonnage à haut volume, utilisez des filtres en fibres de quartz. Sinon, choisissez le type de filtre spécifique ainsi que la taille de coupure du filtre qui convient le mieux aux besoins de la recherche. Préchauffez les filtres destinés à l'échantillonnage de composés organiques et biologiques en les enveloppant individuellement dans du papier d'aluminium.Puis les faire cuire dans un four de laboratoire à 450 degrés Celsius pendant au moins cinq heures. Cette étape détruira tous les résidus organiques préexistants. Conserver les filtres cuits à 20 degrés Celsius jusqu'à leur utilisation pour l'échantillonnage.Ensuite, nettoyez et désinfectez l'échantillonneur à haut volume, comme celui décrit dans le protocole textuel associé. Puis, placez le filtre préalablement calciné dans la cassette à filtre et faites fonctionner l'échantillonneur conformément aux instructions du fabricant afin de recueillir un échantillon approprié. Dans une cabine de sécurité biologique de classe deux, découpez 22 morceaux circulaires en matériau filtrant propre et préalablement calciné à l’aide d’un foret à liège propre de 1,12 centimètre de diamètre.Utilisez ces morceaux pour préparer une série de filtres additionnés d'endotoxines destinés à servir de témoins. Ensuite, découpez les filtres contenant l'échantillon prélevé à l’aide d’un carottier propre de 1,12 centimètre de diamètre et placez chaque échantillon dans un tube stérile exempt de pyrogènes de deux millilitres. Transférez également les filtres additionnés d'endotoxines séchés dans des tubes stériles exempts de pyrogènes de deux millilitres séparés.Ajouter un millilitre d’eau sans pyrogènes à chaque tube. Et les agiter pendant 60 minutes à température ambiante à l’aide d’un agitateur de laboratoire. Ensuite, centrifuger les tubes d’échantillon dans une microcentrifugeuse à 375 × g pendant 10 minutes.Ensuite, transférez le surnageant contenant les endotoxines dans un nouveau tube pyrogène de deux millilitres. Préparez une microplaque à 96 puits à fond plat, exempte de pyrogènes, avec couvercle pour le test des endotoxines. Commencez par définir les emplacements des échantillons.Ensuite, allumez le lecteur de microplaques et programmez-le pour une réaction cinétique à 37 degrés Celsius avec un brassage toutes les cinq minutes, suivi de mesures à 405 nanomètres. Répétez le brassage de cinq minutes et la lecture de la plaque 18 fois.Chargez les échantillons dans la plaque en plaçant 50 microlitres des solutions standards d'endotoxines précédemment utilisées pour contaminer les filtres dans les puits des lignes A1 à A10 et B1 à B10. Placez les témoins sans ajout dans les puits A11, A12, B11 et B12. Ensuite, ajoutez le surnageant provenant de l'extrait du filtre contaminé centrifugé et ses témoins dans les lignes C et D. Puis, ajoutez les surnageants provenant des échantillons expérimentaux et leurs témoins dans les puits restants selon les besoins.Pour activer le test, ajoutez rapidement 50 microlitres de la solution de glycate d'amébocyte de limule dans chaque puits. Secouez doucement la plaque horizontalement avant de la soulever dans le lecteur de plaques et de démarrer l'expérience.Une fois terminé, retirez la plaque du lecteur de plaques. Déterminez le niveau d'endotoxines dans chaque échantillon à l'aide de la courbe standard, puis calculez également l'efficacité avec laquelle les endotoxines sont extraites des filtres d'échantillonnage. Préparez d'abord les filtres additionnés d'ADN comme décrit dans le protocole textuel associé.Pour chaque échantillon de filtre, préparer un mélange de billes de verre traitées à l'acide dans des tubes stériles de 0,5 millilitre, contenant 0,1 gramme de billes de diamètre compris entre 425 et 600 micromètres et 0,3 gramme de billes de diamètre inférieur ou égal à 106 micromètres. Ensuite, découper trois morceaux circulaires à des emplacements choisis aléatoirement sur chaque échantillon de filtre à l’aide d’un carottier désinfecté de 1,12 centimètre de diamètre. Placer les échantillons de filtre dans des tubes vissables individuels de deux millilitres.Ensuite, ajoutez le mélange de billes de verre à chaque tube, ainsi que 60 microlitres du tampon de lyse cellulaire fourni avec le kit d'extraction de l'ADN. Fermez les tubes et placez les échantillons dans le broyeur à billes. Utilisez le broyeur à billes pour rompre mécaniquement les cellules filtrées pendant une minute, puis refroidissez les échantillons en les plaçant sur de la glace pendant une minute supplémentaire.Répétez ce cycle cinq fois. Poursuivez en suivant le protocole du fournisseur du kit et extrayez l'ADN des cellules lysées. Après l'élution, rechargez l'échantillon éluté à travers la colonne d'extraction une deuxième fois afin d'améliorer le rendement en ADN.Activez à l'avance l'appareil de PCR quantitative pour lui permettre de se réchauffer. Dans un nouveau fichier de programme, saisissez les détails de l'analyse de PCR quantitative dans le logiciel de fonctionnement de l'appareil. Ensuite, désinfectez la surface de travail avec un décontaminant d'ADN pour surfaces et travaillez uniquement avec des tubes, des pointes et des réactifs stériles.Également, placez un seau de glace à côté du poste de travail et mettez le mélange *tac polemoraris* dans le seau. Préparez le mélange de réaction de PCR quantitative comme décrit dans le tableau quatre du protocole accompagnant le texte. Conservez le mélange de réaction à l’abri de la lumière et sur glace jusqu’à son utilisation.Ensuite, placez une microplaque propre dans un support de plaque afin d'éviter qu'elle ne touche la surface de travail et de la maintenir propre. Ajoutez un microlitre d'ADN témoin, d'ADN échantillon ou d'eau sans nuclease à l'intérieur des puits de la microplaque de PCR quantitative, en triple exemplaire. Puis, ajoutez neuf microlitres du mélange réactionnel maître dans chaque puits de réaction.Lorsque l'opération est terminée, recouvrez la plaque d'un film adhésif optique et scellez-la hermétiquement sur tous les côtés. Faites centrifuger la plaque dans une centrifugeuse équipée de godets pour plaque pendant une minute à 1000 ×g avant de la placer dans le thermocycleur. Enfin, activez et lancez le programme de PCR quantitative préparé.Lors de l'extraction des endotoxines, les échantillons filtrés sont centrifugés afin d'extraire les endotoxines du filtre. Différentes vitesses de centrifugation entraînent des efficacités d'extraction variables, particulièrement à des concentrations élevées d'endotoxines.Un test préliminaire d'efficacité d'extraction doit être réalisé pour le filtre spécifique choisi et le protocole mis en œuvre. Des efficacités d'extraction plus élevées sont obtenues en ajoutant des filtres propres par rapport aux filtres en quartz échantillonnés, et ces deux efficacités sont inférieures à celle obtenue par détection directe de la solution standard. Une fois maîtrisée, l'analyse des endotoxines peut être effectuée en trois heures et demie si elle est réalisée correctement.Après avoir suivi cette procédure, d'autres méthodes telles que le séquençage de l'ADN peuvent être réalisées afin de répondre à des questions supplémentaires concernant le transport d'organismes dans l'atmosphère. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière d'extraire efficacement les endotoxines et l'ADN à partir de filtres d'échantillons d'air et de les analyser avec précision.

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JoVE Journal

Environment

Environnement

Cette vidéo présente un essai biologique rapide permettant d’étudier l’activité des endotoxines dans un échantillon de sang entier au moyen d’une méthode basée sur la chimiluminescence. Ce test est un test de biomarqueur rapide et sensible pour le diagnostic précoce du sepsis médié par les endotoxines.

Dosage de l’activité des endotoxines : un essai biologique basé sur la chimiluminescence pour l’étude de l’activité des endotoxines dans un échantillon de sang

Cette vidéo décrit le format turbidimétrique du test de lysat d’amibocytes de Limulus, ou LAL, pour estimer la contamination par les endotoxines dans les nano-formulations de doxorubicine liposomale pégylée. La turbidité de la solution suite à la réaction de l’endotoxine avec le réactif LAL permet d’estimer l’endotoxine dans l’échantillon.

Dosage turbidimétrique du lysat d’amibocytes Limulus : une technique pour détecter et quantifier la contamination par les endotoxines dans les médicaments nanoformulés

Cette vidéo décrit un test de caillot de gel pour déterminer la présence d’endotoxines bactériennes dans des nano-formulations à l’aide de lysat d’amibocytes Limulus dérivé des cellules sanguines de limules. Le test permet de tester la contamination par les endotoxines des produits pharmaceutiques, y compris les formulations nano-dérivées.

Dosage du lysat d’amibocytes Gel-Caillot Limulus : une méthode de détection d’endotoxines bactériennes dans des formulations de nanoparticules

Cette vidéo présente un test visant à examiner l’activité dépendante du récepteur de type Toll (TLR) des facteurs de transcription Nuclear Factor-kappa-B (NF-κB) et activator protein-1 (AP-1) dans les macrophages. Les TLR déclenchent une cascade de signalisation pro-inflammatoire lors de la reconnaissance des motifs moléculaires associés aux dommages (DAMPs), activant NF-κB et AP-1. Les macrophages rapporteurs modifiés produisent l’enzyme phosphatase alcaline embryonnaire (SEAP) sécrétée lors...

Un test pour la signalisation du facteur de transcription NF-&kcy ;B/AP-1 dépendante du TLR dans les macrophages

Nous décrivons un protocole pour la filtration d’échantillons d’eau avec une cartouche filtrante et l’extraction de l’ADN environnemental (ADNe) sans avoir à ouvrir le boîtier pour retirer le filtre. Ce protocole est développé pour le métacodage à barres de l’ADNe des poissons, mais s’applique également à l’ADNe d’autres organismes.

Utilisation d&#39;une cartouche filtrante pour la filtration de l&#39;eau et des échantillons d&#39;extraction de l&#39;ADN de l&#39;environnement

Détermination de la diversité fongique au sein d’un environnement est une méthode utilisée dans les études de santé au travail afin d’identifier les risques pour la santé. Ce protocole décrit l’extraction d’ADN provenant d’échantillons d’air professionnel pour l’amplification et le séquençage des régions ITS fongiques. Cette approche détecte plusieurs espèces fongiques qui peuvent être négligées par les méthodes d’évaluation traditionnelles.

Collecte et Extraction des échantillons d’Air professionnel pour l’analyse de l’ADN fongique

Nous présentons par la présente un protocole pour mesurer au chevet de l'activité endotoxine des échantillons de sang entiers humains. L'analyse d'activité d'endotoxine est un essai simple à exécuter et peut être un biomarqueur utile dans les patients gravement malades présentant le sepsis.

Test d'activité d'endotoxine pour la détection de l'endotoxémie de sang entier dans les patients gravement malades

Comprendre la composition biologique des matières particulaires environnement est important pour l’étude de ses effets sur la santé humaine et de la propagation des maladies. Ici, nous avons utilisé trois types de méthodes d’échantillonnage aux bioaérosols et une analyse biologique des microorganismes aéroportés pour mieux explorer les communautés microbiennes aéroportées sous différentes conditions environnementales.

Composition et analyse de la Distribution des bioaérosols sous différentes Conditions environnementales

Détection d’endotoxines dans les nanomatériaux représente un des grands défis dans le domaine de la nanomédecine. Nous présentons ici une étude de cas décrivant le cadre composé de trois formats différents de LAL pour évaluer la contamination potentielle d’endotoxines dans les nanoparticules.

Détection d’endotoxines dans les Nano-formulations utilisant la Limulus Amébocytes Lysate (LAL)

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A Macrophage Reporter Cell Assay to Examine Toll-Like Receptor-Mediated NF-kB/AP-1 Signaling on Adsorbed Protein Layers on Polymeric Surfaces

Des formes fiables et précises d’analyse ADN déployable sur le terrain sont cruciales pour de nombreux secteurs. Cet article propose deux méthodes d’analyse microbienne environnementale sur le terrain : 1) l’isolement de l’ADN microbien à partir d’échantillons environnementaux à l’aide d’un kit d’extraction biologique sur le terrain, et 2) l’analyse de l’ADN via l’unité qPCR de champ.

Analyse de l’ADN microbien sur le terrain à l’aide d’un kit d’extraction biologique et d’une unité qPCR de terrain

Apprenez à analyser les endotoxines et l'ADN dans les particules aéroportées prélevées sur filtres en fibre de quartz. Cette méthode permet d'étudier les aérosols biologiques intérieurs et extérieurs pour la recherche en santé environnementale.

L'analyse du filtre à air dans l'échantillon d'endotoxines et de l'ADN contenu

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