Cathétérisme à long terme de l'Intestinal lymphe Tronc et Collection de lymphe dans néonatales Pigs

Le cathétérisme lymphatique est une technique importante utilisée pour étudier les mécanismes impliqués dans le métabolisme des lipides et des médicaments, les métastases cancéreuses et la fonction immunitaire, et la collecte de grandes quantités de lymphe à partir de divers modèles animaux permet aux chercheurs d’étudier ces processus. La vidéo montre en détail la procédure chirurgicale utilisée pour cathétériser le tronc lymphatique intestinal chez les porcs nouveau-nés en utilisant une approche ventrale médiane. Toutes les procédures ont été approuvées par le comité institutionnel de protection et d’utilisation des animaux de l’Université de l’Alberta.

Pour accéder au vaisseau lymphatique, la cavité abdominale a été ouverte. L’électrocautérisation sur le réglage de coupe a été utilisée pour ouvrir la couche musculaire. Un écarteur a été placé pour maintenir la paroi abdominale ouverte pendant toute la durée de l’intervention.

Les principaux organes abdominaux sont identifiés pour aider à localiser le vaisseau lymphatique. Pour un meilleur accès aux vaisseaux lymphatiques, des segments de l’intestin grêle et du côlon sont extériorisés vers le côté gauche du corps. Le vaisseau lymphatique est marqué par l’identification du foie et du segment ventral droit de la veine porte.

Chez les porcs nouveau-nés, les vaisseaux lymphatiques sont délicats et se déchirent facilement, de sorte qu’une dissection méticuleuse avec des écouvillons et des instruments contondants est nécessaire. Voici le vaisseau lymphatique intestinal. Maintenant, la suture est passée sous le vaisseau lymphatique à l’aide d’une pince émoussée.

Maintenant, il y a trois sutures en soie 2-0 passées sous le vaisseau lymphatique. La suture la plus caudale est utilisée pour dilater le vaisseau et fixer le cathéter au vaisseau. Les sutures crâniennes sont utilisées pour fixer le cathéter à l’intérieur du vaisseau.

Une petite incision dans le vaisseau lymphatique permet aux pinces émoussées de dilater le vaisseau. Le cathéter est inséré dans le vaisseau. Cela doit être fait doucement pour s’assurer que le vaisseau lymphatique ne se déchire pas.

Le cathéter doit être avancé au-delà de la suture la plus crânienne pour s’assurer qu’il est bien en place. Les trois sutures en soie 2-0 fixent le cathéter dans le vaisseau lymphatique. Il est important de noter que les deux sutures crâniennes sont d’abord utilisées pour fixer le cathéter dans le vaisseau et que la suture la plus caudale est ensuite utilisée pour attacher le cathéter, ajoutant ainsi de la stabilité.

Il est important de s’assurer qu’il y a une bonne circulation lymphatique avant de fermer la cavité abdominale. Le cathéter est extériorisé sur le milieu du flanc gauche du porc. De grandes pinces sont utilisées pour tirer le cathéter de la cavité abdominale vers la surface externe du flanc du porc.

Les couches musculaires sont fermées par une suture vicryl 2-0 sur une aiguille effilée selon un simple motif de suture interrompue. La peau est fermée par une suture vicryl 2-0 sur une aiguille coupante dans un motif de suture sous-cuticulaire. Avec l’incision de sortie, le cathéter traverse la peau et est fermé par une suture en nylon 2-0 sur une aiguille coupante dans un motif de suture à cordon de bourse.

Cette fermeture permet d’éviter que les infections ascendantes ne se propagent vers l’intérieur le long du cathéter. La veste contenant les flacons de collecte de lymphe est placée sur le porc alors que le porc est encore sous anesthésie. Le cathéter est inséré dans le flacon collecteur et une bonne circulation lymphatique est assurée avant le réveil du porc.

Les porcs se remettent bien de la procédure et un excellent flux lymphatique est maintenu tout au long de l’expérience. Le tableau présente les composants de la lymphe prélevés dans le vaisseau lymphatique. Ces composants comprennent l’apolipoprotéine B48, les triglycérides et le cholestérol.

La figure du Western Blot montre la présence à la fois d’apolipoprotéine B48 et de petites quantités d’apolipoprotéine B100 dérivée du plasma dans l’échantillon de lymphe prélevé. Bien que le cathétérisme lymphatique chez les jeunes porcs puisse être techniquement difficile, car les vaisseaux lymphatiques sont à la fois délicats et friables, cette vidéo démontre que l’utilisation d’une technique chirurgicale appropriée et minutieuse chez les jeunes porcs peut fournir aux chercheurs un excellent modèle pour recueillir la lymphe intestinale.