Name: Traiter Souris SCA1 avec hydrosolubles composés à non-Spécifiquement Boost Fonction mitochondriale (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-01-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 47 s
Description: Découvrez un protocole pour évaluer l'efficacité de composés hydrosolubles ciblant les mitochondries dans le traitement de l'ataxie spinocérébelleuse de type 1 chez la souris.

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Nous tenons à remercier le Dr Harry Orr de l’Université du Minnesota pour son généreux don de souris transgéniques. Nous tenons également à remercier les anciens élèves du Skidmore College suivants pour leur travail dans la réalisation des expériences précédentes : Monica Villegas, Porter Hall, Mitchell Spring, Nicholas Toker, Jenny Zhang, Chloe Larson et Cheyanne Slocum. De plus, nous tenons à remercier le Skidmore College d’avoir financé le développement de ces méthodes.

<ol><li>Stucki, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+impairments+contribute+to+Spinocerebellar+ataxia+type+1+progression+and+can+be+ameliorated+by+the+mitochondria-targeted+antioxidant+MitoQ%5BTitle%5D)+AND+%22Free+Radic+Biol+Med%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial impairments contribute to Spinocerebellar ataxia type 1 progression and can be ameliorated by the mitochondria-targeted antioxidant MitoQ.</a> Free Radic Biol Med. 97, 427-440 (2016).</li>
<li>Breuer, M. E., Willems, P. H., Russel, F. G., Koopman, W. J., Smeitink, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+mitochondrial+dysfunctions+in+the+brain%2C+from+mice+to+men%5BTitle%5D)+AND+%22J+Inherit+Metab+Dis%22%5BJournal%5D)">Modeling mitochondrial dysfunctions in the brain, from mice to men.</a> J Inherit Metab Dis. 35 (2), 193-210 (2012).</li>
<li>Breuer, M. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+mitochondrial+OXPHOS+dysfunction+in+the+development+of+neurologic+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Dis%22%5BJournal%5D)">The role of mitochondrial OXPHOS dysfunction in the development of neurologic diseases.</a> Neurobiol Dis. , (2012).</li>
<li>Hroudová, J., Singh, N., Fizar, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+dysfunctions+in+neurodegenerative+diseases%2C+relevance+to+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial dysfunctions in neurodegenerative diseases, relevance to Alzheimer's disease.</a> Biomed Res Int. 2014, 175062(2014).</li>
<li>Burright, E. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SCA1+transgenic+mice%2C+a+model+for+neurodegeneration+caused+by+an+expanded+CAG+trinucleotide+repeat%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">SCA1 transgenic mice, a model for neurodegeneration caused by an expanded CAG trinucleotide repeat.</a> Cell. 82 (6), 937-948 (1995).</li>
<li>Clark, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purkinje+cell+expression+of+a+mutant+allele+of+SCA1+in+transgenic+mice+leads+to+disparate+effects+on+motor+behaviors%2C+followed+by+a+progressive+cerebellar+dysfunction+and+histological+alterations%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Purkinje cell expression of a mutant allele of SCA1 in transgenic mice leads to disparate effects on motor behaviors, followed by a progressive cerebellar dysfunction and histological alterations.</a> J Neurosci. 17 (19), 7385-7395 (1997).</li>
<li>Kuznetsov, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+mitochondrial+function+in+situ+in+permeabilized+muscle+fibers%2C+tissues+and+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Analysis of mitochondrial function in situ in permeabilized muscle fibers, tissues and cells.</a> Nat Protoc. 3 (6), 965-976 (2008).</li>
<li>Deng-Bryant, Y., Singh, I. N., Carrico, K. M., Hall, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+tempol%2C+a+catalytic+scavenger+of+peroxynitrite-derived+free+radicals%2C+in+a+mouse+traumatic+brain+injury+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of tempol, a catalytic scavenger of peroxynitrite-derived free radicals, in a mouse traumatic brain injury model.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 28 (6), 1114-1126 (2008).</li>
<li>Vaishnav, R. A., Singh, I. N., Miller, D. M., Hall, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipid+peroxidation-derived+reactive+aldehydes+directly+and+differentially+impair+spinal+cord+and+brain+mitochondrial+function%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Lipid peroxidation-derived reactive aldehydes directly and differentially impair spinal cord and brain mitochondrial function.</a> J Neurotrauma. 27 (7), 1311-1320 (2010).</li>
<li>Matthews, R. T., Yang, L., Browne, S., Baik, M., Beal, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coenzyme+Q10+administration+increases+brain+mitochondrial+concentrations+and+exerts+neuroprotective+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Coenzyme Q10 administration increases brain mitochondrial concentrations and exerts neuroprotective effects.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (15), 8892-8897 (1998).</li>
<li>Ferrante, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuroprotective+effects+of+creatine+in+a+transgenic+mouse+model+of+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neuroprotective effects of creatine in a transgenic mouse model of Huntington's disease.</a> J Neurosci. 20 (12), 4389-4397 (2000).</li>
<li>Ferrante, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+effects+of+coenzyme+Q10+and+remacemide+in+transgenic+mouse+models+of+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Therapeutic effects of coenzyme Q10 and remacemide in transgenic mouse models of Huntington's disease.</a> J Neurosci. 22 (5), 1592-1599 (2002).</li>
<li>Hersch, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creatine+in+Huntington+disease+is+safe%2C+tolerable%2C+bioavailable+in+brain+and+reduces+serum+8OH2%27dG%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Creatine in Huntington disease is safe, tolerable, bioavailable in brain and reduces serum 8OH2'dG.</a> Neurology. 66 (2), 250-252 (2006).</li>
<li>Yang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+therapy+with+coenzyme+Q10+and+creatine+produces+additive+neuroprotective+effects+in+models+of+Parkinson%27s+and+Huntington%27s+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Combination therapy with coenzyme Q10 and creatine produces additive neuroprotective effects in models of Parkinson's and Huntington's diseases.</a> J Neurochem. 109 (5), 1427-1439 (2009).</li>
<li>Yang, X., Dai, G., Li, G., Yang, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coenzyme+Q10+reduces+beta-amyloid+plaque+in+an+APP%2FPS1+transgenic+mouse+model+of+Alzheimer%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Coenzyme Q10 reduces beta-amyloid plaque in an APP/PS1 transgenic mouse model of Alzheimer's disease.</a> J Mol Neurosci. 41 (1), 110-113 (2010).</li>
<li>Sandhir, R., Mehrotra, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quercetin+supplementation+is+effective+in+improving+mitochondrial+dysfunctions+induced+by+3-nitropropionic+acid%2C+implications+in+Huntington%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta%22%5BJournal%5D)">Quercetin supplementation is effective in improving mitochondrial dysfunctions induced by 3-nitropropionic acid, implications in Huntington's disease.</a> Biochim Biophys Acta. 1832 (3), 421-430 (2013).</li>
<li>Ergonul, P. G., Nergiz, C. <a target="_blank" href="http://www.agriculturejournals.cz/publicFiles/31627.pdf">Determination of organic acids in olive fruit by HPLC.</a> 'Czech Food Sci. 28 (3), 202-205 (2010).</li>
<li>Jones, B. J., Roberts, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+quantiative+measurement+of+motor+inco-ordination+in+naive+mice+using+an+acelerating+rotarod%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The quantiative measurement of motor inco-ordination in naive mice using an acelerating rotarod.</a> J Pharm Pharmacol. 20 (4), 302-304 (1968).</li>
<li>Luong, T. N., Carlisle, H. J., Southwell, A., Patterson, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+motor+balance+and+coordination+in+mice+using+the+balance+beam%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of motor balance and coordination in mice using the balance beam.</a> J Vis Exp. (49), (2011).</li>
<li>Servadio, A., Koshy, B., Armstrong, D., Antalffy, B., Orr, H. T., Zoghbi, H. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+analysis+of+the+ataxin-1+protein+in+tissues+from+normal+and+spinocerebellar+ataxia+type+1+individuals%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Genet%22%5BJournal%5D)">Expression analysis of the ataxin-1 protein in tissues from normal and spinocerebellar ataxia type 1 individuals.</a> Nat Genet. 10 (1), 94-98 (1995).</li>
<li>Klement, I. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ataxin-1+nuclear+localization+and+aggregation%2C+role+in+polyglutamine-induced+disease+in+SCA1+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Ataxin-1 nuclear localization and aggregation, role in polyglutamine-induced disease in SCA1 transgenic mice.</a> Cell. 95 (1), 41-53 (1998).</li>
<li>Serra, H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+profiling+links+SCA1+pathophysiology+to+glutamate+signaling+in+Purkinje+cells+of+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Mol+Genet%22%5BJournal%5D)">Gene profiling links SCA1 pathophysiology to glutamate signaling in Purkinje cells of transgenic mice.</a> Hum Mol Genet. 13 (20), 2535-2543 (2004).</li>
<li>Carter, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+progressive+motor+deficits+in+mice+transgenic+for+the+human+Huntington%27s+disease+mutation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Characterization of progressive motor deficits in mice transgenic for the human Huntington's disease mutation.</a> J Neurosci. 19 (8), 3248-3257 (1999).</li>
<li>Anjomani Virmouni, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+GAA-repeat-expansion-based+mouse+model+of+Friedreich%27s+ataxia%5BTitle%5D)+AND+%22Dis+Model+Mech%22%5BJournal%5D)">A novel GAA-repeat-expansion-based mouse model of Friedreich's ataxia.</a> Dis Model Mech. 8 (3), 225-235 (2015).</li>
</ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à dévoiler.

Si ces méthodes sont utilisées, comme décrit, ils sont capables de détecter et d&#39;atténuer l&#39;oxydation dysfonctionnement mitochondrial à médiation par la phosphorylation dans des modèles murins de maladies neuro-dégénératives du cervelet. Les tests biochimiques et comportementaux combinés sont des méthodes multiples pour déterminer l&#39;étendue de la contribution mitochondrial à cérébelleux pathologie de la maladie neurodégénérative. En traitant des souris avec de l&#39;acide succinique pour stimuler le métaboli...

Les mitochondries sont les principaux producteurs de l&#39;adénosine triphosphate (ATP), un coenzyme essentiel pour l&#39;énergie cellulaire, avec la majorité de l&#39;ATP mitochondrial produit par phosphorylation oxydative (OXPHOS) en utilisant la chaîne de transport d&#39;électrons. Le cerveau, compte tenu de ses besoins métaboliques élevés et de sa dépendance à l&#39;égard de la phosphorylation oxydative pour alimenter l&#39;activité neuronale, est très sensible à un dysfonctionnement mitochondrial. Par conséquent, un dysfonctionnement mitochondrial est déclenchée au cours du processus de vieillissement, 1 et est impliquée dans la pathogenèse de plusieurs maladies neurodégénératives , 2, 3, 4. Par conséquent, il en résulte que les mitochondries sont des cibles thérapeutiques intéressantes pour la neurodégénérescence. Dans ce protocole, nous avons adopté l&#39;utilisation de ataxie spinocérébelleuse de type 1 (SCA1) comme une maladie neurodégénérative modèle pour l&#39;étude des mitochondriesl dysfonctionnement et le développement de thérapies ciblées mitochondriales. SCA1 est causée par une mutation polyglutamine (polyQ) d&#39;extension de répétition dans le produit du gène ataxine-1 qui provoque une dégénérescence progressive des neurones de Purkinje du cervelet et les neurones d&#39;autres régions du cerveau. La lignée de souris transgénique utilisé ici (désignée comme la souris SCA1), qui exprime un polyQ mutant ataxine-1 transgène sous le contrôle d&#39;un promoteur spécifique de Purkinje cellules, permet l&#39;analyse ciblée de l&#39;élément de Purkinje cellules de SCA1 5. Les souris subissent SCA1 progressive dégénérescence des cellules de Purkinje et développent une démarche ataxique 6. dysfonction mitochondriale et complexe mitochondrial ciblé l&#39;efficacité du traitement peuvent être évalués avec une batterie de tests moléculaires et comportementales. Dysfonction mitochondriale complexe est mesurée ex vivo par des tests de respiration qui détectent la consommation altérée d&#39;oxygène dans les tissus cérébelleusela présence de substrats et inhibiteurs 7 de la chaîne de transport d&#39;électrons. Des dosages de respiration ont déjà été utilisés avec des tissus perméabilisées, les isolats mitochondriaux et les tissus ensemble 7, 8, 9. Ils permettent une évaluation directe de la fonction mitochondriale contrairement aux méthodes de collecte de données morphologiques telles que la microscopie électronique à transmission ou immunofluorescence. L&#39;utilisation de tissu entier plutôt que des mitochondries isolées empêche une sélection biaisée des mitochondries saines qui peuvent survenir au cours du processus d&#39;isolement 7. Lorsque adaptée au protocole comme indiqué, le dosage de la respiration est une méthode utile pour détecter un dysfonctionnement mitochondrial dans les états pathologiques neurodégénératifs cérébelleux. Des activateurs non spécifiques du métabolisme peuvent être utilisées pour déduire la dysfonction mitochondriale dans les modèles de souris transgéniques de diseas neurodégénérativese et de l&#39;aide à la mise au point de nouvelles thérapies. La quercétine, et de la créatine Coenzyme Q10 ont tous été montré pour améliorer la pathologie de la maladie neuro - dégénérative chez les patients et dans des modèles animaux de maladies neuro - dégénératives 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16. Nous présentons ici un activateur métabolique roman, l&#39;acide succinique, pour stimuler le métabolisme et stimuler la fonction mitochondriale dans les maladies neurodégénératives. Faire en sorte que l&#39;activateur est de traverser la barrière hémato - encéphalique, la HPLC a été utilisée pour détecter la délivrance d&#39; un tissu neural chez les souris traitées 17. Pour évaluer les effets thérapeutiques des composés solubles dans l&#39;eau métaboliquement ciblés tels que l&#39;acide succinique, une batterie de paradigmes comportementaux et des études immuno-pathologiques peuvent être utilisés. due aux déficits de la coordination motrice trouvées dans les maladies neuro - dégénératives cérébelleuse, le dosage de la piste de l&#39; empreinte, un dosage de faisceau et l&#39; accélération de dosage de tige de rotation sont utilisés pour détecter le comportement de secours de la pathologie 6, 18, 19. Ces mesures sont complétées par une évaluation de immunopathologique cytoarchitecture cérébelleuse , en évaluant l&#39; épaisseur de la couche moléculaire (définie comme étant la cellule de Purkinje dendritique longueur de l&#39; arbre) et les comptages de Purkinje soma des cellules dans un tissu de lobule défini cérébelleuse 6, 20, 21. Nous présentons ici des méthodes neuropathologiques et comportementales multiples pour la détection et le traitement de la dysfonction mitochondriale avec des composés solubles dans l&#39;eau métaboliquement ciblée. Nous utilisons une analyse ex vivo de la respiration mitochondriale pour analyser un dysfonctionnement mitochondrial dans la tran SCA1souris sgenic. En outre, nous montrons que les symptômes de la maladie et de la pathologie sont améliorées par l&#39;acide mitochondriale rappel succinique soluble dans l&#39;eau, ce qui implique en outre la dysfonction mitochondriale dans progression de la maladie SCA1.

<table><tbody><tr><td>Adénosine diphosphate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A2754</td><td>ADP</td></tr><tr><td>Ascorbate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A7631</td><td></td></tr><tr><td>Albumine sérique bovine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A2153</td><td>BSA</td></tr><tr><td>4',6-Diamidino-2-phénylindole</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D9542</td><td>DAPI</td></tr><tr><td>Digitonin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D141</td><td></td></tr><tr><td>Dithiothreitol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D0632</td><td>DTT</td></tr><tr><td>Sérum d’âne</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D9663</td><td></td></tr><tr><td>Glutamate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>1446600</td><td></td></tr><tr><td>Malate</td><td>Sigma Aldrich</td><td>6994</td><td></td></tr><tr><td>Mannitol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M4125</td><td></td></tr><tr><td>Paraformaldéhyde</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P6148</td><td></td></tr><tr><td>Lactobionate de potassium</td><td>Sucres Bio</td><td>69313-67-3</td><td></td></tr><tr><td>Roténone</td><td>Sigma Aldrich</td><td>R8875</td><td></td></tr><tr><td>Saponine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>47036</td><td></td></tr><tr><td>Acide Succinique</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S3674</td><td></td></tr><tr><td>N,N,N&prime ;,N&prime ; -Tétraméthyl-p-phénylènediamine</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T7394</td><td>TMPD</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma Aldrich</td><td>T9284</td><td></td></tr><tr><td>Urea</td><td>Sigma Aldrich</td><td>U0631</td><td></td></tr><tr><td>Vectashield support de montage</td><td>Vector Labs</td><td>H-1000</td><td></td></tr><tr><td>Antibodies</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>11NQ anticorps (anti-ataxine-1 )</td><td></td><td></td><td>Servadio, et al. 1995, PMID : 7647801</td></tr><tr><td>Alexa Fluor 488 anticorps secondaire anti-souris</td><td>Life Technologies</td><td>A-11015</td><td></td></tr><tr><td>Alexa Fluor 594 anticorps secondaire anti-lapin</td><td>Life Technologies</td><td>A-11012</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps Calbindin (chèvre)</td><td>Santa Cruz</td><td>C-20</td><td></td></tr><tr><td>Animals</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Souris transgéniques de contrôle</td><td>Harry Orr, Ph.D.</td><td>A02</td><td>Burright, et al. 1997, PMID : 9217978</td></tr><tr><td>souris SCA1</td><td>Harry Orr, Ph.D.</td><td>B05</td><td>Burright, et al. 1997, PMID : 9217978</td></tr><tr><td>Souris de type sauvage</td><td>The Jackson Laboratory</td><td>001800</td><td></td></tr><tr><td>Equipment</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ESM-100L microtome</td><td>ERMA</td><td></td><td>Microtome Sledge</td></tr><tr><td>Fluoview FV1200 Microscope confocal</td><td>Olympus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lames de glycérol-gélatine</td><td>FD Neuro Technologies</td><td>PO101</td><td></td></tr><tr><td>Seringue Hamilton</td><td>Sigma Aldrich</td><td>VCAT 80465</td><td></td></tr><tr><td>OXYT1 Oxytherm Électrode Control Unit</td><td>Hansatech Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>P.T.F.E. papier</td><td>Cole-Parmer</td><td>UX-08277-15</td><td></td></tr><tr><td>Rotallion Rotarod</td><td>PPP& G</td><td></td><td>contacter l’auteur correspondant pour plus d’informations</td></tr><tr><td>Ultimate 3000 HPLC</td><td>Dionex</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Software</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>National Institute of Health</td><td></td><td><a href="http://imagej.nih.gov/ij/">http://imagej.nih.gov/ij/</a></td></tr><tr><td>Cell counter plugin (pour ImageJ)</td><td>National Institute of Health</td><td></td><td><a href="http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/cell-counter.html">http://rsb.info.nih.gov/ij/plugins/cell-counter.html</a></td></tr><tr><td>3P& G Rota-Rod v3.3.3 (logiciel rotarod)</td><td>PPP& G</td><td></td><td>contacter l’auteur correspondant pour plus d’informations</td></tr><tr><td>Phidget21.dll (requis pour le logiciel rotarod)</td><td>DLL-Files.com</td><td></td><td><a href="https://www.dll-files.com/phidget21.dll.html">https://www.dll-files.com/phidget21.dll.html</a></td></tr></tbody></table>

traiter souris sca1 avec hydrosolubles composés à non-spécifiquement boost fonction mitochondriale

Treating SCA1 Mice with Water-Soluble Compounds to Non-Specifically Boost Mitochondrial Function

Le dysfonctionnement mitochondrial joue un rôle important dans le processus de vieillissement et dans les maladies neurodégénératives, y compris plusieurs ataxie spinocérébelleuse héréditaires et d&#39;autres troubles du mouvement marqué par une dégénérescence progressive du cervelet. L&#39;objectif de ce protocole est d&#39;évaluer la dysfonction mitochondriale dans ataxie spinocérébelleuse de type 1 (SCA1) et évaluer l&#39;efficacité du ciblage pharmacologique de la respiration métabolique via le composé acide succinique soluble dans l&#39;eau pour ralentir la progression de la maladie. Cette méthode est applicable à d&#39;autres maladies cérébelleux et peut être adaptée à un grand nombre de thérapies solubles dans l&#39;eau. Une analyse ex vivo de la respiration mitochondriale est utilisée pour détecter et quantifier les changements liés à la maladie de la fonction mitochondriale. Avec des preuves génétiques (données non publiées) et des preuves protéomique de la dysfonction mitochondriale dans le modèle SCA1 de la souris, nous évaluons l&#39;efficacité du traitement avec le rappel métabolique s soluble dans l&#39;eaul&#39;acide uccinic en dissolvant ce composé directement dans l&#39;eau potable à la maison de la cage. La capacité du médicament à traverser la barrière sang-cerveau peut être déduit en utilisant la chromatographie liquide à haute performance (HPLC). L&#39;efficacité de ces composés peut ensuite être testé à l&#39;aide de multiples paradigmes comportementaux, y compris le Rotarod accélération, test de poutre d&#39;équilibre et de l&#39;analyse de l&#39;empreinte. l&#39;intégrité cytoarchitecturales du cervelet peut être évaluée en utilisant des tests d&#39;immunofluorescence qui détectent Purkinje noyaux cellulaires et les dendrites des cellules de Purkinje et soma. Ces méthodes sont des techniques fiables pour la détermination de la dysfonction mitochondriale et l&#39;efficacité du traitement avec des composés solubles dans l&#39;eau dans les maladies neurodégénératives cérébelleuse.

Par le ciblage pharmacologique des mitochondries cérébelleux avec de l'acide succinique, nous sommes en mesure d'empêcher un dysfonctionnement mitochondrial dans un modèle de souris de la maladie neuro-dégénérative SCA1 de cérébelleuse. Le donneur d'électrons canonique de la succinate déshydrogénase, acide succinique, a été dissous dans de l' eau potable à la maison de la cage de souris SCA1 pendant un mois, l'évaluation comportementale début au cours de la deuxième semaine de traitement...

Nous présentons un protocole biochimique et comportemental pour évaluer l’efficacité de composés hydrosolubles ciblant les mitochondries pour le traitement de l’ataxie spinocérébelleuse de type 1 (SCA1) et d’autres maladies neurodégénératives cérébelleuses.

Traiter Souris SCA1 avec hydrosolubles composés à non-Spécifiquement Boost Fonction mitochondriale

Mitochondrial dysfunction plays a significant role in the aging process and in neurodegenerative diseases including several hereditary spinocerebellar ...

L’objectif global de cette expérience est d’observer et de quantifier les effets thérapeutiques des activateurs mitochondriaux solubles dans l’eau sur le comportement et les tissus cérébelleux chez les souris atteintes d’ataxie cérébelleuse spinale de type 1. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans les domaines de l’ataxie cérébelleuse spinale, telles que les déficits mitochondriaux contribuent-ils à la pathologie de la maladie et la maladie pourrait-elle être entravée par un activateur mitochondrial soluble dans l’eau. Le principal avantage de cette technique est que l’acide succinique est un composé hydrosoluble peu coûteux approuvé par la FDA qui peut être délivré directement dans le cerveau via l’eau de boisson.Les implications de cette technique peuvent s’étendre à une thérapie d’autres maladies neurodégénératives, car des déficits en complexes de phosphorylation oxydative mitochondriale sont trouvés dans plusieurs maladies neurodégénératives, notamment la maladie d’Alzheimer et la maladie de Huntington. En général, les personnes qui ne connaissent pas cette méthode auront du mal à mettre en place les paradigmes comportementaux qui devront peut-être être

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Dysfonction mitochondriale est une caractéristique de la sénescence cellulaire. Ce document utilise le proche infrarouge (NIR) traitement non-invasif pour améliorer la fonction mitochondriale chez la souris épithélium vestibulaire sensoriel vieillissement.

Proche infrarouge (NIR) Lumière augmente l&#39;expression d&#39;un marqueur de mitochondrial Fonction chez la souris vestibulaire sensoriel épithélium

Un protocole est décrit pour la détection in vivo des effets des inhibiteurs mitochondriaux dans l’organisme modèle Caenorhabditis elegans et pour l’identification de composés potentiellement améliorants. Ce protocole peut être utilisé pour cribler les bibliothèques de médicaments à la recherche de composés modulant la fonction mitochondriale.

Un criblables<em&gt; In Vivo</em&gt; Essai de modulateurs mitochondriale utilisant transgénique Bioluminescent<em&gt; Caenorhabditis elegans</em

Murines études sur des modèles d’inflammation du côlon ont montré qu’un faible pourcentage (1-5 %) des cellules souches mésenchymateuses (CSM) injecté par voie intraveineuse ou par voie intrapéritonéale à domicile à l’inflammation du côlon1,2. Cette étude montre que guidée par échographie intracardiaques injections de MSCs entraîner localisation accrue à l’intestin.

Guidée par échographie intracardiaque Injection des cellules souches mésenchymateuses d’augmenter le retour vers l’intestin pour une utilisation dans des modèles murins de maladies intestinales inflammatoires expérimentale

Comprendre l’influence des pesticides organochlorés environnementaux (PCO) sur la fonction mitochondriale dans les hépatocytes est important dans l’exploration du mécanisme des PCO causant des troubles métaboliques. Cet article présente des méthodes détaillées sur la détection de la fonction mitochondriale hépatique.

Protocole expérimental pour la détection de la fonction mitochondriale chez les hépatocytes exposés aux pesticides organochlorés

Ce protocole vise à fournir une méthode d’imagerie mitochondriale in vitro et in vivo du Ca2+ dans les astrocytes et les neurones.

Imagerie de l’absorption mitochondriale de Ca2+ dans les astrocytes et les neurones à l’aide d’indicateurs ca2+ codés génétiquement (GECI)

Ces protocoles aideront les utilisateurs à sonder le métabolisme énergétique mitochondrial dans les sphéroïdes dérivés de lignées cellulaires cancéreuses 3D à l’aide de l’analyse du flux extracellulaire Seahorse.

Exploration du métabolisme énergétique mitochondrial des sphéroïdes de microtissu 3D uniques à l’aide de l’analyse du flux extracellulaire

Ici, nous décrivons l’administration de médicaments guidée par micropipette (MDA) comme une méthode alternative au gavage oral qui incite l’animal de recherche à ingérer facilement les traitements avec un minimum de stress et d’inconfort.

Utilisation de l’administration de médicaments guidée par micropipette comme méthode alternative au gavage oral chez les rongeurs

Les organoïdes cérébraux servent de modèle précieux pour les études sur l’encéphalomyopathie mitochondriale, l’acidose lactique et les épisodes similaires à l’accident vasculaire cérébral (MELAS), offrant un aperçu de leur physiopathologie sous-jacente et fournissant une plate-forme pour le dépistage des médicaments. Les organoïdes dérivés de lignées cellulaires présentant des niveaux variables d’hétéroplasmie de gènes pathogènes présentent des différences phénotypiques significatives.

Modélisation des maladies mitochondriales à l’aide d’organoïdes cérébraux : un accent sur l’encéphalomyopathie mitochondriale, l’acidose lactique et les épisodes semblables à ceux d’un accident vasculaire cérébral

Injections locales d’une cellule de Schwann terminale marquante mitochondriale in vivo pour microscopie confocale. Cette méthode utilise des preuves de concept démontrées dans le tissu musculaire squelettique de souris avec un muscle sain ou malade pour fournir une visualisation mitochondriale à haute résolution.

Méthodes pour la quantification in situ de la morphologie mitochondriale dans les cellules musculaires et terminales de Schwann de souris

Une procédure non invasive pour évaluer la fonction endothéliale est démontrée en utilisant les 2000 Endo-PAT.

Évaluer la fonction endothéliale Vasodilatateur avec le 2000 Endo-PAT

Découvrez un protocole pour évaluer l'efficacité de composés hydrosolubles ciblant les mitochondries dans le traitement de l'ataxie spinocérébelleuse de type 1 chez la souris.

Traiter Souris SCA1 avec hydrosolubles composés à non-Spécifiquement Boost Fonction mitochondriale

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