26 avril 2016
La méthode la plus couramment utilisée pour nanostructuré support lipidique (NLC) synthèse implique huile dans-eau, l'homogénéisation et la solidification. Cela a été modifié ici en appliquant la dispersion à cisaillement élevé après solidification pour obtenir un NLC avec la taille souhaitable, une meilleure encapsulation des drogues et de l'efficacité de chargement de médicament en tant que vecteur potentiel pour la livraison de dacarbazine.
L’objectif global de cette procédure est de préparer un support lipidique nanostructuré pour encapsuler l’agent thérapeutique anticancéreux dacarbazine. Cette procédure est simple et bien optimisée. Permettant la préparation de supports lipidiques nanostructurés avec une capacité bien contrôlée.
Les principaux avantages de la nouvelle formulation de la dacarbazine comprennent une dispersion accrue du médicament en solution aqueuse, une stabilité historique prolongée et un meilleur contrôle de la libération du médicament. Cette amélioration peut également conduire à une demi-vie prolongée in vivo. Commencez par ajouter 6,25 ml d’acétone et d’éthanol dans une fiole.
Aux solvants, ajoutez du palmitosterate de glycéryle, du myristate d’isopropyle, du succinate de polyéthylène glycol D-a-tocophérol et de la lécithine de soja. Dissoudre le mélange à 70 degrés Celsius dans un bain-marie. Dans une fiole supplémentaire, ajoutez 12,5 ml d’eau.
Créez une solution de 1 % de poloxamère 188 en dissolvant 125 mg dans l’eau. Chauffez le ballon à 70 degrés Celsius pour dissoudre complètement le produit chimique. Tout en remuant la solution organique à 400 tr/min par goutte, ajoutez la solution de poloxamère 188 à 1 % pour former une émulsion.
Remuez l’émulsion pendant quatre heures supplémentaires pour évaporer le solvant organique. Au bout de quatre heures, placez l’émulsion dans un réfrigérateur à quatre degrés Celsius pendant deux heures pour qu’elle se solidifie. Pour obtenir des transporteurs lipidiques nanostructurés ou NLC, utilisez un homogénéisateur pour soumettre les émulsions solidifiées à une dispersion de cisaillement élevée.
Mélangez la solution à 15000 tr/min pendant 30 minutes pour disperser l’émulsion. Échantillonnez la solution par incréments de 10 minutes. Prenez 14 microlitres d’émulsion dans une cuvette à diffusion dynamique de la lumière ou DLS.
Et diluer à 1 ml avec de l’eau deutérée pour la mesure. Lisez l’échantillon de la cuvette dans l’instrument. Examinez les échantillons pour déterminer quels échantillons ont la plus petite taille et le plus petit indice de polydispersion.
Par conséquent, il s’agit de déterminer la vitesse et le temps de mélange optimaux pour la création de NLC. Observer les échantillons pour la morphologie et l’ultrastructure du NLC. Appliquez la même dilution d’échantillons à la grille de cuivre recouverte de fibre de carbone d’un instrument de microscope électronique à transmission.
Laissez l’échantillon sécher à l’air, puis analysez-le selon les instructions du fabricant. Maintenant que les conditions ont été optimisées, préparez une solution comme pour les émulsions initiales. Après avoir combiné les réactifs de glycéryle, d’isopropyle, de succinate de polyéthylène glycol et de lécithine de soja, ajoutez 70 mg de dacarbazine, puis chauffez la solution à 70 degrés Celsius.
Préparez 12,5 ml d’une solution aqueuse de poloxamère 188 à 1 %. Chauffer le ballon à 70 degrés Celsius. Après avoir dissous le poloxamère 188, ajoutez la solution goutte à goutte à la solution organique, en agitant à 400 tr/min pour former une émulsion.
Remuez l’émulsion pendant quatre heures supplémentaires pour évaporer le solvant organique. Comme précédemment, placez l’émulsion dans une chambre froide à quatre degrés Celsius pendant deux heures pour qu’elle se solidifie. Utilisez la vitesse de dispersion élevée optimisée de 15000 tr/min pendant 30 minutes pour homogénéiser l’émulsion.
Les préparations du NLC et du NLC chargé en dacarpazine avec différents paramètres ont été caractérisées pour la taille des particules et l’indice de polydispersion. La taille des particules et l’indice de polydispersion des NLC étaient la concentration de tensioactifs, la vitesse de dispersion de cisaillement élevée et la durée dépendante. À en juger par la taille des particules et l’indice de polydispersion, les meilleurs résultats ont été obtenus avec 1 % de tensioactif et une vitesse de dispersion par cisaillement de 15000 tr/min pendant 30 minutes.
Lesquels ont été sélectionnés comme paramètres optimaux pour la préparation de la NLC dans cette étude. Lorsque les paramètres optimaux ont été utilisés pour la préparation de NLC chargée de dacarbazine, la plus petite taille obtenue était de 155 nanomètres pour la NLC et de 190 nanomètres pour la NLC chargée de dacarbazine. Les deux avec un indice de polydispersion de 0,2, indiquant une bonne uniformité.
Le téléchargement et l’encapsulation de la dacarbazine dans la NLC sont indiqués par les changements de taille et de structure. Où la NLC chargée en dacarbazine présente une taille plus grande et des structures internes modifiées par rapport à la NLC. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en huit heures si elle est parfaitement exécutée.
Lors de la tentative de cette procédure, il est très important de se rappeler que les lignes de l’évaporation de la solidification sont très critiques. Comme trop long ou trop court, cela aura un effet négatif sur la génération de transporteurs lipidiques nanostructurés. À la suite de cette procédure, les porteurs lipidiques nanostructurés réduits sont stables pendant six mois à quatre degrés centigrades.
Permettre d’effectuer des caractérisations telles que la pharmacologie et la toxicologie. Cette technique a ouvert la voie à ceux qui sont en recherche constante pour explorer la formulation nanostructurée de la dacarbazine à base de supports pour une variété de traitements contre le cancer. À ce jour, la dacarbazine est l’agent le plus actif dans le traitement du mélanome cutané et métastatique.
Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de préparer un transporteur lipidique nanostructuré et d’utiliser un support lipidique nanostructuré pour encapsuler la dacarbazine. Lorsque vous travaillez avec des matières dangereuses telles que la dacarbazine, un équipement de protection individuelle, y compris une blouse de laboratoire, des gants de protection et une protection oculaire doit toujours être utilisé. L’accès est également nécessaire pour travailler avec le solvant dangereux.
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques
Cette étude présente une méthode modifiée pour la synthèse de transporteurs lipidiques nanostructurés (NLCs) destinés à la délivrance du médicament anticancéreux dacarbazine. La nouvelle approche améliore l'encapsulation du médicament et l'efficacité de chargement, ce qui pourrait améliorer les résultats thérapeutiques.
Les vecteurs lipidiques nanostructurés (NLC) permettent de surmonter la faible dispersion aqueuse de la dacarbazine, une limitation majeure de sa formulation intraveineuse, en améliorant la solubilité et la stabilité du médicament. Ce système de délivrance assure une demi-vie prolongée et un meilleur contrôle de la libération, facilitant ainsi l'évaluation préclinique d'agents chimiothérapeutiques. La méthode offre une plateforme évolutive pour la re-formulation de médicaments anticancéreux hydrophobes, visant à améliorer l'indice thérapeutique et à réduire l'échec lié à la formulation.
Cette formulation de NLC s'inscrit dans le continuum de la découverte en oncologie, allant de la validation du « hit » à l'optimisation du candidat, où la libération contrôlée du médicament et sa solubilité sont essentielles pour évaluer l'engagement de la cible et les marges de sécurité.