February 21st, 2016
Les modèles porcins de transplantation d’organes fournissent une plate-forme importante pour étudier les mécanismes de conservation des organes. Cet article décrit un modèle hétérotopique d’autotransplantation rénale porcine, qui permet d’étudier de nouvelles approches pour améliorer le résultat de la transplantation à l’aide de greffes de rein marginales.
L’objectif global de cette intervention chirurgicale est de réaliser de manière fiable une autotransplantation rénale hétérotopique dans un modèle porcin, assurant une bonne fonction de greffe rénale. Cette vidéo et le manuscrit qui l’accompagne peuvent aider à répondre à des questions clés sur la façon d’effectuer un transport automatique rénal hétérotopique dans un modèle porcin. Le principal avantage de cette vidéo est qu’elle fournit toutes les actions clés importantes et met en évidence les différences entre le modèle porcin et le modèle clinique pour assurer une fonction adéquate de la greffe rénale après la transplantation.
Après avoir anesthésié le porc et l’avoir préparé sur la table d’opération, exposez les cordes vocales à l’aide d’un laryngoscope. Vaporisez les cordes avec la solution de lidocaïne à 2 % pour éviter les spasmes induits par l’intubation. Ensuite, intubez le porc avec un tube de 6,5 millimètres et bloquez le brassard avec trois à cinq millilitres d’air.
Régulez le vaporisateur et confirmez une anesthésie profonde avant de continuer. Une fois l’anesthésie confirmée, introduisez un cathéter français à lumière unique 9,5 dans la veine jugulaire en utilisant la technique Seldinger. Cela implique de percer la veine, d’introduire un fil-guide, de remplacer l’aiguille par un introducteur détachable et de remplacer le fil par le cathéter.
Ensuite, fixez le cathéter à l’aide d’une suture en soie 3-0. Tout au long de l’opération, utilisez le cathéter pour introduire un cocktail d’antibiotiques et d’analgésiques. Appliquez également une pommade vétérinaire sur les yeux du porc pour éviter la sécheresse.
Après la désinfection stérile et la couverture du champ opératoire, effectuez une incision médiane de 25 centimètres de long et insérez un écarteur. Couvrez le gros et le petit intestin avec une serviette et positionnez-les sur le côté gauche pour un accès optimal au rein droit. Maintenant, libérez l’uretère et le rein droit lui-même du tissu adhérent à l’aide de la cautérisation.
Ensuite, disséquez la veine rénale et l’artère droites à l’aide de la cautérisation jusqu’à ce qu’elles soient libérées de leurs origines dans la veine cave inférieure et l’aorte. Pour éviter le vasospasme artériel, il peut être utile d’administrer 30 à 65 milligrammes de papavarine. Après avoir terminé le curage ganglionnaire rénal, attachez l’uretère avec une suture en soie 3-0 et coupez l’uretère distalement.
À ce moment, préparez un bol de glace et un sac d’organe stérile. Pour prélever le rein, utilisez des pinces à vaisseaux. Tout d’abord, clampez l’artère rénale près de l’aorte.
Deuxièmement, clampez la veine rénale près de la veine cave. Ensuite, réséquez le greffon rénal et mettez-le sur de la glace. Maintenant, canulez immédiatement l’artère rénale avec la canule de l’artère rénale.
Utilisez 500 millilitres de solution HTK glacée pour évacuer le sang et conservez le rein sur de la glace jusqu’à la transplantation. In situ, fermez l’artère rénale restante avec une ligature en soie 2-0 et fermez la veine rénale avec une suture prolène 6-0. Après avoir traité tout saignement, fermez l’abdomen et la peau.
Ensuite, fixez le cathéter veineux par voie sous-cutanée avec une suture en soie 3-0 et creusez-le dans le dos du porc pour éviter toute manipulation indésirable. Après avoir placé le porc en position couchée, suturez fermement le cathéter sur la peau. Après l’anesthésie du porc et la désinfection stérile du site chirurgical, faites une incision de quatre centimètres à côté de la trachée et disséquez le tissu pour exposer l’artère carotide.
Passez une pince Overholt autour de l’artère pour positionner une suture en soie 2-0. Ensuite, utilisez la technique Seldinger pour introduire un cathéter plastique afin de mesurer en continu la pression artérielle tout au long de la chirurgie. Ensuite, rouvrez la cavité abdominale comme précédemment.
Maintenant, transplantez le greffon de rein préservé d’un bout à l’autre de la veine cave infrarénale et de l’aorte. Pour ce faire, disséquez cinq à huit centimètres de la veine cave et de l’aorte au-dessus de la bifurcation iliaque à l’aide de ramassages et de la cautérisation. Essayez d’éviter les vaisseaux lymphatiques.
Fermez-les avec des sutures prolènes 5-0 au besoin. Vérifiez s’il y a des saignements et retirez tout tissu restant des vaisseaux. L’objectif est d’exposer suffisamment de récipient pour placer des pinces Satinsky.
Ensuite, réséquez le rein controlatéral. Tout d’abord, positionnez l’intestin vers la droite. Ensuite, disséquez l’uretère, le rein lui-même, la veine rénale et l’artère rénale des tissus environnants.
Attachez ensuite l’uretère et les vaisseaux sanguins. Maintenant, réséquez le rein et vérifiez qu’il n’y a pas de saignement. Repositionnez ensuite l’intestin pour exposer l’aorte infrarénale et la veine cave.
Injectez de l’héparine et attendez au moins deux minutes. Prenez le greffon rénal et enveloppez-le dans un chiffon avec de la glace stérile. Commencez par l’anastomose veineuse.
Utilisez une pince Satinsky pour serrer complètement la veine cave. Ensuite, avec une lame numéro 11, faites une incision de fente de la même taille que l’ouverture de la veine rénale. Des ciseaux de pot peuvent être utilisés pour étendre la fente au besoin.
Utilisation de deux sutures prolènes 6-0 à double bras pour effectuer un point crânien et un point d’angle caudal. Retirez maintenant le rein de porc de la glace et placez-le dans le champ opératoire. Effectuez un point de coin crânien et un point d’angle caudal sur la greffe.
Ensuite, approximez le rein. Attachez le coin supérieur et effectuez une suture à l’aide de 6-0 prolène, en commençant par la paroi arrière. Aux 2/3 du chemin, utilisez l’autre extrémité de l’attache pour compléter la suture sur le côté avant.
Après avoir noué les points crâniens, attachez les points au coin caudal. Positionnez maintenant une pince bulldog sur la veine rénale, ouvrez la pince Satinsky et vérifiez l’anastomose veineuse pour détecter un saignement. Placez la pince Satinsky sur l’aorte.
Faites ensuite une incision de fente correspondant à l’ouverture de l’artère rénale. Utilisez une lame numéro 11. Poursuivez avec un poinçon rond de quatre millimètres pour dégager l’ouverture.
Ensuite, à l’aide d’une suture prolène 6-0, en commençant par le côté receveur, effectuez l’anastomose. L’endothélium artériel doit être inclus dans chaque suture pour éviter une dissection. Pendant ce temps, commencez une bande continue de 10 millilitres de noradrénaline diluée dans 500 millilitres de lactate de Ringer.
Titrez-le pour maintenir la pression systolique au-dessus de 100 millimètres de mercure. Avant de terminer l’anastomose artérielle, le vérapamil peut être administré par voie intra-artérielle. Une fois l’anastomose terminée, placez une pince bouledogue sur l’artère rénale, ouvrez la pince Satinsky et vérifiez qu’il n’y a pas de saignement.
Maintenant, déballez davantage le rein et retirez la glace. Ouvrez d’abord la pince bouledogue veineuse, puis la pince bouledogue artériel. Positionnez le rein de manière à maintenir une reperfusion homogène.
Assurez-vous d’administrer la papavérine par voie topique dans le vaisseau pour prévenir le vasospasme. Après la reperfusion, la production d’urine doit commencer immédiatement. Effectuez maintenant l’anastomose urétérale.
Commencez par utiliser des ciseaux de pot pour ouvrir l’uretère sur le greffon sur une longueur longitudinale de 0,5 centimètre. Faites de même avec l’uretère receveur. Ensuite, utilisez deux sutures PDS 6-0 pour une anastomose urétérale d’un côté à l’autre.
Effectuez un point d’angle de chaque côté puis suturez la paroi avant de manière continue. Continuez en tournant l’anastomose pour exposer la paroi arrière et en continuant la suture. Une fois l’anastomose terminée, vérifiez qu’il n’y a pas de saignement.
Fermez maintenant la paroi abdominale avec deux sutures monofil, une suture. Suivi de la fermeture de la peau avec des sutures en soie 3-0. Maintenir en permanence la pression systolique du porc au-dessus de 100 millimètres de mercure en titrant soigneusement la noradrénaline.
Il s’agit d’une étape cruciale de la procédure. Continuez à surveiller la pression artérielle systolique jusqu’à ce que le porc soit mis en position couchée. Quatre autogreffes rénales ont été réalisées.
Lors du prélèvement initial des greffons, les greffons ont été stockés sur de la glace pendant 7,5 heures. Après avoir sevré les porcelets du ventilateur, ils ont été rétablis de l’opération et suivis pendant 10 jours. À partir des échantillons de sang, les valeurs de créatinine sérique et d’azote uréique du sang ont été estimées.
Les valeurs mesurées ont montré des résultats adéquats pour les greffons autotransplantés. L’augmentation de la créatinine sérique et de l’urée du greffon allotransplanté indique un rejet du greffon. L’hémostase acido-basique et les taux d’électrolytes étaient également stables sans intervention.
L’examen histologique a montré une préservation du tubulo-interstitium dans le rein auto-transplanté, tandis que le rein allotransplanté présentait une inflammation interstitielle diffuse, des tubulités et une glomérulite. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’effectuer l’autotransport rénal hétérotopique dans un modèle porcin. Pour assurer une bonne fonction rénale après une transplantation rénale, les principales différences entre les techniques chirurgicales par rapport au milieu humain ont été démontrées.
Cet article présente une procédure chirurgicale détaillée pour l'autotransplantation rénale hétérotopique dans un modèle porcin, visant à améliorer la fonction du greffon rénal. La méthodologie décrite sert de ressource précieuse pour les chercheurs étudiant les techniques de préservation d'organes.