Évaluation transcutanée de la fonction rénale dans Rongeurs Conscious

L’objectif global de cette procédure est de mesurer la fonction rénale par voie transcutanée sans avoir besoin d’échantillons de sang ou d’analyses expérimentales supplémentaires. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la néphrologie, telles que l’impact de l’administration de lésions rénales ou d’interventions thérapeutiques spécifiques sur la fonction rénale. Les principaux avantages de cette technique sont qu’elle est peu invasive et que les résultats sont prêts à être analysés immédiatement après la mesure sans manipulations expérimentales ultérieures.

Cette technique peut être utilisée pour étudier pratiquement n’importe quelle affection rénale chez plusieurs espèces différentes. En outre, il est utile pour effectuer des mesures séquentielles au sein d’un animal. Avant de commencer la procédure, confirmez le bon niveau d’anesthésie par pincement des orteils.

Et utilisez un rasoir électrique pour enlever une zone de fourrure de trois centimètres sur six à l’arrière du bas-ventre de l’animal. Retirez le reste de la fourrure avec de la crème dépilatoire. Après deux à trois minutes, lavez soigneusement la peau dénudée car la crème peut émettre une certaine fluorescence de fond.

Ensuite, placez l’appareil optique de mesure de la fonction rénale sur un côté d’un patch adhésif double face. Positionnez la partie optique au-dessus de la fenêtre transparente et laissez le côté opposé recouvert d’un film de protection. Ensuite, fixez un morceau de patch adhésif double face de taille adaptée à la batterie.

Avant de fixer l’appareil, pesez l’animal. Ensuite, coupez un morceau de bandage de gaze élastique tubulaire d’environ un centimètre de plus que la largeur du patch adhésif double face. Et tirez le bandage sur la tête de l’animal.

Ensuite, placez l’animal en position couchée, en laissant la zone rasée à découvert. Et branchez le connecteur de la batterie dans le port correspondant de l’appareil. Si la batterie a été correctement connectée, l’appareil commencera à clignoter.

Retirez la feuille de protection de l’autre côté du patch fixé à la batterie. Et montez la batterie sur la surface supérieure de l’appareil. Retirez maintenant le couvercle de protection du patch de l’appareil de commande et, en tenant les bords jusqu’à ce qu’il soit correctement fixé, placez le patch sur la zone rasée sur le dos de l’animal.

Couvrez l’appareil avec le bandage de gaze élastique tubulaire, en prenant soin d’étirer complètement le bandage sur l’abdomen tout en vous assurant que les membres peuvent bouger librement. Une bonne fixation est cruciale pour éviter les artefacts de mouvement pendant la mesure, veuillez donc veiller à ce que l’appareil soit correctement fixé avant le début de la mesure. Lorsque le bandage est en place, appliquez une bande de ruban adhésif de taille identique sur l’appareil afin qu’elle recouvre les fils de la batterie.

Et mesurez la lecture de fond pendant une à trois minutes sans exercer de pression sur l’appareil. Pour administrer la FITC-sinistrine, après avoir réchauffé la queue de l’animal pour dilater les veines de la queue, injectez par voie intraveineuse le volume approprié de solution mère de FITC-sinistrine. Ensuite, placez soigneusement l’animal seul dans sa cage domestique sans eau ni couvercle métallique.

En prenant soin de ne pas introduire d’artefacts de mouvement. Enregistrez ensuite la fluorescence émise par la FITC-sinistrin avec le dispositif optique pendant la période expérimentale appropriée. À la fin de la période d’enregistrement, retirez soigneusement le ruban adhésif suivi du bandage tubulaire.

Détachez ensuite délicatement le patch adhésif double face de la peau. Et retournez l’animal dans sa cage d’origine normale. Pour lire les données, débranchez la batterie de l’appareil et retirez le patch adhésif.

Ensuite, utilisez un câble micro USB pour connecter l’enregistreur optique à un ordinateur et téléchargez les données avec le logiciel approprié. Enfin, utilisez le logiciel approprié pour générer la courbe cinétique d’élimination selon les protocoles logiciels. Et ouvrez le fichier CSV contenant les données.

Lorsque la fonction rénale est affectée, la demi-vie FITC-sinistrine augmente. En raison de l’excrétion réduite de la substance et de l’apparence de la courbe, les changements. En règle générale, la courbe mesurée ne revient pas au niveau de fond et une augmentation de la surface sous la courbe est observée.

Chez le même animal, les mesures avant et après la blessure montrent une augmentation de l’intensité maximale de fluorescence due à une accumulation du marqueur causée par sa réduction de l’excrétion. Par exemple, en présence d’une insuffisance rénale, la courbe FITC-sinistrin mesurée par voie transcutanée présente un état d’équilibre en raison de la fonction gravement altérée du tissu rénal. De plus, l’appareil miniaturisé a été utilisé pour mesurer avec succès la fonction rénale chez plusieurs souches de rongeurs présentant une variété d’états de santé différents.

Souligner l’adéquation et la sensibilité de l’appareil pour détecter les changements dus aux maladies rénales et au vieillissement. Une fois maîtrisée, l’expérience peut être complètement mise en place en 50 minutes avec au moins quatre animaux par heure pouvant être évalués par un seul expérimentateur. Lors de cette procédure, il est important de ne pas oublier de protéger l’appareil électronique en retirant l’alimentation en eau et toute structure saillante pendant la période de mesure.