Name: Utilisant une bande Dissoudre Oralement pour les études pharmacologiques et toxicologiques: une alternative simple et Humane à Oral Gavage pour les animaux (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 28 s
Description: Découvrez une méthode alternative à l'intubation orale utilisant des bandes orodispersibles pour l'administration de médicaments chez les souris. Cette technique réduit le stress et améliore le bien-être animal en recherche préclinique.

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Les auteurs tiennent à remercier Jamie Thuy pour le travail technique. Ce travail a été soutenu en partie par des subventions de recherche SC CTSI NIH / NCRR / NCATS - UL1TR000130 (DLD), AA022448 (DLD), et l&#39;USC School of Pharmacy. En outre, à dissolution rapide films oraux contenant IVM ont été aimablement fournies par Cure Pharmaceutical (Oxnard, CA).

Toutes procédure décrite ont été approuvés par le Comité institutionnel des animaux soin et l&#39;utilisation (IACUC) de l&#39;Université de Californie du Sud. 1. Manipulation des animaux et habituation <ol><li> introduction <ol><li> Permettre aux souris à acclimater aux conditions d&#39;élevage et de la technique de l&#39;expérience de manipulation pour réduire le stress au cours des procédures d&#39;administration de médicaments qui en découlent. Pendant ce temps, enregistrer le poids corporel et la consommation alimentaire de chaque souris; si on le désire, ils peuvent ensuite être utilisés comme point de comparaison pour évaluer la toxicité des médicaments (en option) non invasive. L&#39;ancien peut également être utilisé pour déterminer en fonction du poids dosage des médicaments. Remarque: Soit dit en passant, la durée de la période d&#39;habituation doit être déterminée en fonction du nombre d&#39;expérimentateurs qui interagissent avec l&#39;animal. Dans notre expérience, les souris de la souche C57BL / 6J ont été observés à avoir des problèmes habituant à la manipulation par plus de ~ 5 personnes au sein de notre période typique d&#39;une semaine habituation. Si possible,expérimentateur (s) sont également encouragés à ne pas utiliser des lotions parfumées, savons et parfums avant de manipuler les animaux comme les rapports précédents indiquent de nouveaux stimuli, tels que les odeurs, peut entraver la période d&#39;habituation 11. </li></ol></li><li> Des pas <ol><li> À compter au moins 5 jours avant le début de l&#39;étude, le transfert des animaux à la pièce dans laquelle les expériences ultérieures auront lieu. </li><li> Noter le poids de la souris en tenant fermement le milieu de la queue et soulevant doucement l&#39;animal hors de la cage et dans le bateau de poids. <ol><li> Placez la souris sur l&#39;échelle dès qu&#39;il est sorti de l&#39;cagekeeping à l&#39; esprit de bien saisir l&#39;aspect médial / proximal de la queue, pour éviter les blessures dégantage qui peuvent se produire en saisissant la partie distale de la queue 12. </li><li> Notez la valeur de poids une fois la souris a été placé en toute sécurité dans le bateau peser. </li></ol></li><li> Noter le poids de la nourriture pour une recommandé 2 jours consécutifs, afin d&#39;établir des niveaux de consommation alimentaire de base qui vous aideront à capturer les toxicités potentielles lors de l&#39;expérience 13. </li></ol></li></ol> 2. Préparation de l&#39;alimentation Aiguille, Solution Sucrée et individuelle ODS <ol><li> Utiliser un autoclave pour stériliser les aiguilles en acier inoxydable de gavage en acier en vue de l&#39;expérience. Préparer 2 aiguilles / groupe et 1 aiguille supplémentaire pour être utilisé comme un back-up en cas de besoin. Remarque: Cette étude a utilisé une colonne de 1,5 pouces, courbes, G 18, en acier inoxydable aiguille d&#39;alimentation d&#39;une bille de 2,25 mm à l&#39;extrémité de l&#39;aiguille. </li><li> Ajouter 20 ml d&#39;eau et 0,85 g de saccharose pour créer un 4,25% (p / v) d&#39;une solution de saccharose. Remarque: En fonction des paramètres en cours d&#39; évaluation d&#39; autres faibles doses de saccharose pourraient également être utilisés 14. </li><li> Préparer la bande de dissolution orale (ODS) pour chaque animal en coupant la bande de test standard rectangulaire dans une pièce qui est de 0,5 cm pouces de diamètre noustion d&#39;un quart de pouce unique trou-perforateur disponible dans le commerce. La bande de test rectangulaire utilisé dans cette démonstration a été formulée pour contenir 6 mg d&#39;ivermectine (IVM), et quand on les coupe à cette taille, alloue un 0,21 mg dose à chaque pièce circulaire individuelle se rapprochant d&#39;une dose de 10 mg / kg pour chaque animal (notre désiré dose / animal). Cette dose peut être ajustée par la concentration / dilution de la formulation globale de la bande rectangulaire et / ou en coupant la bande en taille différente. </li></ol> 3. Drug - Livraison <ol><li> Enregistrer les valeurs de poids comme décrit précédemment dans les étapes 1,1-1,2. </li><li> Après avoir enregistré le poids, déplacez la souris vers le haut métal grille de cage. Une fois là - bas, en utilisant le pouce dominant, l&#39; index, et 3 ème doigt, tirez doucement sur ​​la queue. Cela entraînera la souris pour saisir, par inadvertance, le fil cage haut et étirer son dos, étirant son corps loin de l&#39;expérimentateur. </li><li> Attrapez la peau du cou avec le non-dopouce minant, index et 3 ème doigt pour retenir confortablement l&#39;animal avec une poignée qui est sécurisé. Remarque: Un expérimentateur avec une main plus faible peut également utiliser le 4 e doigt, de la même main, de se retirer la peau du dos et d&#39; obtenir une prise plus sûre de la souris. En outre, selon la préférence individuelle, l&#39; annulaire, et / ou petit doigt peut également être utilisé pour fixer la queue mais ce n&#39;est pas nécessaire 12. </li><li> Maintenir la souris dans une position verticale. </li><li> Attention: Observer la couleur des muqueuses de la souris. Un aspect violet / bleu est une indication que l&#39;expérimentateur est cinching le scruff trop serré et la souris ne peut pas respirer. <ol><li> Si cela se produit, mettez immédiatement la souris vers le bas sur le dessus de la cage métallique et laisser reposer pendant environ 2-3 minutes avant de retenter d&#39;empêcher l&#39;animal. </li></ol></li><li> Immerger la pointe de l&#39;ampoule de l&#39;aiguille de gavage dans une solution de saccharose 4,25% pour servir exhausteur de goûtadhésif à l&#39;ODS. </li><li> Appuyez sur un ODS prédécoupés avec la pointe de l&#39;ampoule de l&#39;aiguille de gavage pour attacher la bande de dissolution par voie orale. </li><li> Présenter les ODS à la souris en le plaçant près des narines et / ou de la bouche, et permettre à l&#39;animal de consommer le film. En variante, les ODS peuvent être livrés par voie topique dans la cavité buccale en plaçant la mince bande directement sur la langue pour les souris à avaler. </li><li> Remplacer l&#39;aiguille mi-groupe au cours de la session de la drogue-dosage pour prévenir la propagation de l&#39;infection. </li></ol>

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</ol>

DD a demandé un brevet en tant que co-inventeur de cette méthode et est intéressé à partager cette méthode avec le comité scientifique pour rendre cette technique bien connue et facilement disponible pour l&#39; expérimentation animale chronique (administration orale de médicaments Actives dans les animaux de laboratoire utilisant Fast- Dissoudre Films oraux (Davies, co-inventeur, la demande de brevet déposée 23/06/2014). Aucun d&#39; autres intérêts financiers concurrents sont notés.

Gavage oral est associée à de nombreuses complications qui résultent de la collecte des données potentiellement compromis et des taux élevés d&#39;attrition des animaux 1. Voici une méthode simple de délivrance de médicaments par voie orale est introduit à travers laquelle des souris (et potentiellement d&#39;autres animaux) peuvent facilement et de manière fiable consommer le médicament de choix par le biais d&#39;une bande de dissolution par voie orale (ODS). Notamment, l&#39;utilisation de cette méthode re...

Pour la traduction réussie d&#39;un médicament à partir de (expérimentation animale) préclinique au développement clinique, une série de bien définie, les études pharmacologiques et toxicologiques aiguës et chroniques doivent être effectuées dans des modèles animaux en utilisant la voie d&#39;administration clinique d&#39;administration envisagée (qui est normalement la voie orale). Pour atteindre cet objectif, la plupart des études pré-cliniques utilisent actuellement une procédure de gavage oral étant donné que les résultats de cette méthode dans une prestation uniforme et précise du composé d&#39;essai à l&#39;animal. Cependant, dans de nombreux cas, par gavage oral est pas bien tolérée par l&#39;animal et accumulation de preuves suggère que la méthode est associée à une quantité importante de stress induction 1. Cela est particulièrement vrai dans le développement de traitements pour les conditions de vie à long chroniques qui nécessitent des études précliniques à plus long terme, comme est le cas, mais sans s&#39;y limiter, presque tous les troubles neuropsychiatriques. Pour instance, dans un modèle de souris transgénique de la maladie d&#39;Alzheimer, il a été récemment suggéré que la méthode de gavage lui - même pourrait brouiller les résultats expérimentaux en raison de le dosage du stress 2 induite. De même, dans un modèle de souris de la consommation d&#39;alcool, les résultats non publiés de notre propre laboratoire ont montré que l&#39;insertion répétitive du tube de gavage - en soi - peut réduire de manière significative le niveau de consommation d&#39;alcool au point de mettre en péril l&#39;intégrité de l&#39;expérimentation paradigme (voir Figure 1). Compte tenu des limitations mentionnées ci-dessus associés à la procédure de gavage oral, un effort considérable a été mis vers le développement de nouvelles méthodes de prestation préclinique de médicaments par voie orale. Approches actuelles comprennent l&#39; incorporation du composé d&#39;essai dans des mélanges de beurre d&#39;arachide 3, moules gélatineux 4-5, pastilles de chocolat 6, l&#39; eau 7, et des craquelins de plaquettes 8 potable, qui sont tous associATED avec des degrés de questions , y compris l&#39;incapacité variant à utiliser de manière fiable dans le modèle animal, le manque d&#39;adoption de l&#39; absorption du composé d&#39;essai par le sujet de test ou de préférence individuelle pour la saveur qui rend le médicament moins facilement consommé 9. La procédure introduite ici décrit un procédé dans lequel le médicament souhaité est incorporé dans une aromatisée, bande de dissolution par voie orale (ODS) qui peut être facilement et rapidement être utilisé pour administrer oralement le composé d&#39;essai à l&#39;animal d&#39;essai. Ce document met l&#39;accent sur la démonstration de l&#39;efficacité de la méthode ODS en utilisant des souris. Cependant, il n&#39;y a aucune raison de penser que la même méthode ne serait pas aussi utile dans d&#39;autres rongeurs, ainsi que des sujets mammifères plus grands. Cliniquement, l&#39;utilisation des SAO commence à être adoptée chez les patients pédiatriques et gériatriques, comme un moyen de surmonter les difficultés de déglutition 10. Nous proposons que les SAO peut également être utilisé avec succès dans les programmes de découverte de médicaments précliniques comme un coffre-fort, pratiqueEt alternative humaine au gavage oral.

<table><tbody><tr><td>Bande dissolvante par voie orale&nbsp ;</td><td>Cure Pharmaceutique</td><td></td><td>Disponible sur demande spéciale. Alternativement, les SACO peuvent également être préparées en interne.</td></tr><tr><td>Aiguille d’alimentation par gavage</td><td>VWR</td><td>7912</td><td>Nos études sur les rongeurs ont utilisé une aiguille d’alimentation de calibre 18. Il peut être nécessaire d’ajuster cette taille pour l’utiliser chez d’autres espèces de mammifères.</td></tr><tr><td>Saccharose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S0389-500G</td><td></td></tr></tbody></table>

utilisant une bande dissoudre oralement pour les études pharmacologiques et toxicologiques: une alternative simple et humane à oral gavage pour les animaux

Utilizing an Orally Dissolving Strip for Pharmacological and Toxicological Studies: A Simple and Humane Alternative to Oral Gavage for Animals

Avant de tester de nouveaux produits thérapeutiques chez l&#39; homme, à court et à long terme préclinique (c. -à- animal), pharmacologique répétitif et les tests toxicologiques sont nécessaires. Dans la plupart des cas, la voie d&#39;administration préférée est par administration orale. A l&#39;heure actuelle, l&#39;administration orale est le plus souvent réalisée en utilisant une procédure de gavage oral, en partie, parce qu&#39;elle peut obtenir un dosage constant et précis dans le modèle animal. Bien que cette méthode est bien établi qu&#39;il n&#39;ont des complications qui peuvent entraîner un taux élevé d&#39;attrition des animaux. A cette fin, la procédure instituée ici décrit une alternative à la méthode de gavage oral, dans lequel le médicament souhaité est incorporé dans un exhausteur de goût, la dissolution par voie orale bande (ODS) qui peut être simplement présentée à l&#39;animal d&#39;essai où il est ensuite repris rapidement avec manipulation minimale du sujet d&#39;essai. Ici, nous démontrons que la délivrance de médicaments précliniques, par voie orale selon la méthode ODS représente un alte sûr, pratique et humainrnative à un gavage oral.

Dans les enquêtes représentatives suivantes, boire social a été modélisée à l&#39; aide d&#39; un 24 h deux bouteilles choix ( à confirmer) paradigme comme décrit précédemment 15. En bref, les souris ont eu accès à deux bouteilles de solution, dont l&#39;une contient de l&#39;eau, et l&#39;autre à 10% (v / v) d&#39;éthanol. Les sujets ont ensuite été affectés à des groupes de traitement de la toxicomanie de sorte que le 10E (10% d&#39;éthanol / 90% d&#39;eau v / v) la consomma...

Le protocole suivant décrit une nouvelle méthode pour l&#39;administration de médicaments par voie orale chronique à l&#39;aide d&#39;une bande de dissolution par voie orale (ODS) au lieu de la méthode de gavage plus communément utilisée par voie orale. Nous démontrons que la délivrance de médicaments précliniques, par voie orale selon la méthode ODS représente une alternative sûre, pratique et humain de gavage oral.

Utilisant une bande Dissoudre Oralement pour les études pharmacologiques et toxicologiques: une alternative simple et Humane à Oral Gavage pour les animaux

Prior to testing novel therapeutics in humans, short and long term preclinical (i.e., animal), repetitive pharmacological and toxicological testing is ...

L'objectif général de cette procédure est d'utiliser un polymère bioadhésif se dissolvant par voie orale comme méthode sûre et compatible avec l'humain pour la délivrance préclinique de médicaments par voie orale. Grâce à cette procédure, un médicament d'intérêt peut être incorporé dans un ruban aromatisé se dissolvant dans la bouche, permettant l'administration orale d'un composé test à un animal expérimental. Le principal avantage de cette technique est qu'elle peut être utilisée dans les cas où la gavage oral n'est pas bien toléré.Pour réduire le stress pendant les procédures ultérieures d'administration de médicament, laissez les souris s'acclimater aux conditions d'élevage et à la technique de manipulation de l'expérience. Pour chaque souris, déterminez le poids préexpérimental en saisissant d'abord la souris par le milieu de la queue, puis en soulevant doucement l'animal hors de la cage. Placez immédiatement l'animal dans un récipient de pesée posé sur une balance pour animaux, en maintenant une prise ferme sur l'aspect médial de la queue afin d'éviter une lésion par déchaussement, et enregistrez le poids de l'animal.Enregistrer le poids de la nourriture pendant deux jours co

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Utilisant une bande Dissoudre Oralement pour les études pharmacologiques et toxicologiques: une alternative simple et Humane à Oral Gavage pour les animaux

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