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Identification des conditions critiques pour Immunocoloration dans le puceron du pois embryons: L...
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JoVE Journal Developmental Biology
Identification of Critical Conditions for Immunostaining in the Pea Aphid Embryos: Increasing Tissue Permeability and Decreasing Background Staining

Identification des conditions critiques pour Immunocoloration dans le puceron du pois embryons: L'augmentation de la perméabilité des tissus et la diminution de la coloration de fond

Full Text
10,505 Views
09:44 min
February 2, 2016

DOI: 10.3791/53883-v

Gee-Way Lin1,2, Chun-che Chang1,2,3,4

1Department of Entomology,National Taiwan University, 2Institute of Biotechnology,National Taiwan University, 3Research Center for Developmental Biology and Regenerative Medicine,National Taiwan University, 4Genome and Systems Biology Degree Program,National Taiwan University and Academia Sinica

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Un protocole d’immunomarquage complet sur des embryons de pucerons est présenté, dans lequel les conditions critiques pour diminuer la coloration de fond et augmenter la perméabilité tissulaire sont abordées. Ces conditions sont spécifiquement développées pour la détection efficace de l’expression des protéines dans les tissus embryonnaires des pucerons.

L’objectif global de ce protocole d’immunomarquage est de détecter l’expression des protéines dans les embryons de pucerons. Des conditions critiques sont identifiées qui augmentent la perméabilité des tissus et diminuent la coloration de fond, deux problèmes de longue date lors de la coloration des tissus embryonnaires des pucerons. Le principal avantage de cette technique est qu’elle fournit des conditions spécifiques pour une pénétration efficace des anticorps et une réduction de la coloration de fond, qui ne sont généralement pas décrites dans un protocole d’immunocoloration standard.

Nous avons eu cette idée de cette mesure pour la première fois lorsque nous étudiions comment les cellules germinales sont spécifiées dans un modèle de puceron du pois, une variété de modèles d’insectes, pour des études génomiques et environnementales. La souche de laboratoire du puceron du pois, a. pisum, a été récoltée à l’origine dans le centre de Taïwan et a été élevée sur des plantes hôtes depuis plus de 300 générations.

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