Name: Corps entier Spectrométrie de masse dimagerie par infrarouge laser assistée par matrice désorption Electrospray Ionisation (IR-MALDESI) (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-03-24T15:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 47 s
Description: Apprenez la spectrométrie de masse par imagerie IR-MALDESI pour l'analyse de tissus entiers de souris néonatales. Cette méthode permet d'étudier la distribution spatiale des analytes dans plusieurs organes simultanément.

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Les auteurs remercient le professeur H. Troy Ghashghaei du Département des sciences biomédicales moléculaires de la NCSU pour avoir fourni l’ensemble du tissu de souris. Les auteurs remercient également les National Institutes of Health (R01GM087964), la fondation W.M. Keck et l’Université d’État de Caroline du Nord pour l’aide financière qu’ils ont reçue.

<ol><li>Mcdonnell, L. A., Heeren, R. M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+Mass+Spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Mass+Spectrom.+Rev%22%5BJournal%5D)">Imaging Mass Spectrometry.</a> Mass Spectrom. Rev. 26, 606-643 (2007).</li>
<li>Chughtai, K., Heeren, R. M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mass+spectrometric+imaging+for+biomedical+tissue+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Chem.+Rev%22%5BJournal%5D)">Mass spectrometric imaging for biomedical tissue analysis.</a> Chem. Rev. 110 (5), 3237-3277 (2010).</li>
<li>Robichaud, G., Barry, J. A., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atmospheric+Pressure+Mass+Spectrometry+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Encycl.+Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Atmospheric Pressure Mass Spectrometry Imaging.</a> Encycl. Anal. Chem. , (2014).</li>
<li>Sampson, J. S., Hawkridge, A. M., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+and+detection+of+multiply-charged+peptides+and+proteins+by+matrix-assisted+laser+desorption+electrospray+ionization+%28MALDESI%29+Fourier+transform+ion+cyclotron+resonance+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Generation and detection of multiply-charged peptides and proteins by matrix-assisted laser desorption electrospray ionization (MALDESI) Fourier transform ion cyclotron resonance mass spectrometry.</a> J. Am. Soc. Mass Spectrom. 17 (12), 1712-1716 (2006).</li>
<li>Robichaud, G., Barry, J. A., Garrard, K. P., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Infrared+matrix-assisted+laser+desorption+electrospray+ionization+%28IR-MALDESI%29+imaging+source+coupled+to+a+FT-ICR+mass+spectrometer%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Infrared matrix-assisted laser desorption electrospray ionization (IR-MALDESI) imaging source coupled to a FT-ICR mass spectrometer.</a> J. Am. Soc. Mass Spectrom. 24 (1), 92-100 (2013).</li>
<li>Robichaud, G., Barry, J. A., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IR-MALDESI+Mass+Spectrometry+Imaging+of+Biological+Tissue+Sections+Using+Ice+as+a+Matrix%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">IR-MALDESI Mass Spectrometry Imaging of Biological Tissue Sections Using Ice as a Matrix.</a> J. Am. Soc. Mass Spectrom. 25 (3), 319-328 (2014).</li>
<li>Barry, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+Antiretroviral+Drugs+in+Tissue+by+IR-MALDESI+MSI+Coupled+to+the+Q+Exactive+and+Comparison+with+LC-MS%2FMS+SRM+Assay%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Mapping Antiretroviral Drugs in Tissue by IR-MALDESI MSI Coupled to the Q Exactive and Comparison with LC-MS/MS SRM Assay.</a> J. Am. Soc. Mass Spectrom. 25 (12), 2038-2047 (2014).</li>
<li>Rosen, E. P., Bokhart, M. T., Ghashghaei, H. T., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+Desorption+Conditions+on+Analyte+Sensitivity+and+Internal+Energy+in+Discrete+Tissue+or+Whole+Body+Imaging+by+IR-MALDESI%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Influence of Desorption Conditions on Analyte Sensitivity and Internal Energy in Discrete Tissue or Whole Body Imaging by IR-MALDESI.</a> J. Am. Soc. Mass Spectrom. 26, 899-910 (2015).</li>
<li>Nelson, K. A., Daniels, G. J., Fournie, J. W., Hemmer, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+whole-body+zebrafish+sectioning+methods+for+mass+spectrometry+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biomol.+Tech%22%5BJournal%5D)">Optimization of whole-body zebrafish sectioning methods for mass spectrometry imaging.</a> J. Biomol. Tech. 24 (3), 119-127 (2013).</li>
<li>Park, J. J., Cunningham, M. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thin+sectioning+of+slice+preparations+for+immunohistochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Thin sectioning of slice preparations for immunohistochemistry.</a> J. Vis. Exp. (3), e194(2007).</li>
<li>Bokhart, M. T., Rosen, E., Thompson, C., Sykes, C., Kashuba, A. D. M., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+mass+spectrometry+imaging+of+emtricitabine+in+cervical+tissue+model+using+infrared+matrix-assisted+laser+desorption+electrospray+ionization%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Bioanal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Quantitative mass spectrometry imaging of emtricitabine in cervical tissue model using infrared matrix-assisted laser desorption electrospray ionization.</a> Anal. Bioanal. Chem. 407 (8), 2073-2084 (2015).</li>
<li>Nazari, M., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polarity+Switching+Mass+Spectrometry+Imaging+of+Healthy+and+Cancerous+Hen+Ovarian+Tissue+Sections+by+Infrared+Matrix-Assisted+Laser+Desorption+Electrospray+Ionization+%28IR-MALDESI%29%5BTitle%5D)+AND+%22Analyst%22%5BJournal%5D)">Polarity Switching Mass Spectrometry Imaging of Healthy and Cancerous Hen Ovarian Tissue Sections by Infrared Matrix-Assisted Laser Desorption Electrospray Ionization (IR-MALDESI).</a> Analyst. 141, 595-605 (2016).</li>
<li>Hsu, C. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Design+and+Application+of+a+Low-Temperature+Peltier-Cooling+Microscope%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Pharm.+Sci%22%5BJournal%5D)">Design and Application of a Low-Temperature Peltier-Cooling Microscope.</a> J. Pharm. Sci. 85 (1), 70-74 (1996).</li>
<li>Jurchen, J. C., Rubakhin, S. S., Sweedler, J. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MALDI-MS+imaging+of+features+smaller+than+the+size+of+the+laser+beam%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">MALDI-MS imaging of features smaller than the size of the laser beam.</a> J. Am. Soc.Mass Spectrom. 16 (10), 1654-1659 (2005).</li>
<li>Nazari, M., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cellular-level+mass+spectrometry+imaging+using+infrared+matrix-assisted+laser+desorption+electrospray+ionization+%28IR-MALDESI%29+by+oversampling%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Bioanal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Cellular-level mass spectrometry imaging using infrared matrix-assisted laser desorption electrospray ionization (IR-MALDESI) by oversampling.</a> Anal. Bioanal. Chem. 407 (8), 2265-2271 (2015).</li>
<li>Rosen, E. P., Bokhart, M. T., Nazari, M., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+C-Trap+Ion+Accumulation+Time+on+the+Detectability+of+Analytes+in+IR-MALDESI+MSI%5BTitle%5D)+AND+%22Anal.+Chem%22%5BJournal%5D)">Influence of C-Trap Ion Accumulation Time on the Detectability of Analytes in IR-MALDESI MSI.</a> Anal. Chem. 87, 10483-10490 (2015).</li>
<li>Kessner, D., Chambers, M., Burke, R., Agus, D., Mallick, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ProteoWizard%3A+open+source+software+for+rapid+proteomics+tools+development%5BTitle%5D)+AND+%22Bioinformatics%22%5BJournal%5D)">ProteoWizard: open source software for rapid proteomics tools development.</a> Bioinformatics. 24 (21), 2534-2536 (2008).</li>
<li>Schramm, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ImzML+-+A+common+data+format+for+the+flexible+exchange+and+processing+of+mass+spectrometry+imaging+data%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Proteomics%22%5BJournal%5D)">ImzML - A common data format for the flexible exchange and processing of mass spectrometry imaging data.</a> J. Proteomics. 75 (16), 5106-5110 (2012).</li>
<li>Race, A. M., Styles, I. B., Bunch, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inclusive+sharing+of+mass+spectrometry+imaging+data+requires+a+converter+for+all%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Proteomics%22%5BJournal%5D)">Inclusive sharing of mass spectrometry imaging data requires a converter for all.</a> J. Proteomics. 75 (16), 5111-5112 (2012).</li>
<li>Robichaud, G., Garrard, K. P., Barry, J. A., Muddiman, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MSiReader%3A+an+open-source+interface+to+view+and+analyze+high+resolving+power+MS+imaging+files+on+Matlab+platform%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Am.+Soc.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">MSiReader: an open-source interface to view and analyze high resolving power MS imaging files on Matlab platform.</a> J. Am. Soc. Mass Spectrom. 24 (5), 718-721 (2013).</li>
<li>Smith, C. A., O'Maille, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((METLIN%3A+a+metabolite+mass+spectral+database%5BTitle%5D)+AND+%22Ther.+Drug.+Monit%22%5BJournal%5D)">METLIN: a metabolite mass spectral database.</a> Ther. Drug. Monit. 27 (6), 747-751 (2005).</li>
<li>Sud, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LMSD%3A+LIPID+MAPS+structure+database%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleic+Acids+Res%22%5BJournal%5D)">LMSD: LIPID MAPS structure database.</a> Nucleic Acids Res. 35, D527-D532 (2007).</li>
<li>Schwartz, S. A., Reyzer, M. L., Caprioli, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+tissue+analysis+using+matrix-assisted+laser+desorption%2Fionization+mass+spectrometry%3A+practical+aspects+of+sample+preparation%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Direct tissue analysis using matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry: practical aspects of sample preparation.</a> J. Mass Spectrom. 38 (7), 699-708 (2003).</li>
<li>Takai, N., Tanaka, Y., Inazawa, K., Saji, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+analysis+of+pharmaceutical+drug+distribution+in+multiple+organs+by+imaging+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Rapid+Commun.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Quantitative analysis of pharmaceutical drug distribution in multiple organs by imaging mass spectrometry.</a> Rapid Commun. Mass Spectrom. 26 (13), 1549-1556 (2012).</li>
<li>Liu, J., Gingras, J., Ganley, K. P., Vismeh, R., Teffera, Y., Zhao, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-body+tissue+distribution+study+of+drugs+in+neonate+mice+using+desorption+electrospray+ionization+mass+spectrometry+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Rapid+Commun.+Mass+Spectrom%22%5BJournal%5D)">Whole-body tissue distribution study of drugs in neonate mice using desorption electrospray ionization mass spectrometry imaging.</a> Rapid Commun. Mass Spectrom. 28 (2), 185-190 (2014).</li>
</ol>

Les auteurs ne déclarent aucun intérêt financier concurrent.

Le protocole ci-dessus décrit les étapes clés pour réaliser une expérience IR-MALDESI MSI. Le processus d&#39;application de la matrice (section 3) prend environ 20 min, ce qui est similaire à un processus d&#39;application typique de la matrice pour des expériences MALDI MSI par sublimation ou de revêtement par pulvérisation à l&#39;aide d&#39;un pulvérisateur robotique. En outre, IR-MALDESI ne repose pas sur le partitionnement des analytes dans les cristaux de la matrice 6, et la matrice de la glace peut êt...

Imagerie par spectrométrie de masse (MSI) en mode microsonde implique la désorption de l&#39;échantillon à partir d&#39;une surface par un faisceau (laser ou d&#39;ions) à des emplacements discrets sur la surface d&#39;un échantillon. A chaque point de trame, un spectre de masse est produit, et les spectres acquis, ainsi que la localisation spatiale à partir duquel ils ont été recueillis, peuvent être utilisés pour cartographier simultanément plusieurs analytes dans l&#39;échantillon. Cette manière sans étiquette d&#39;imagerie couplé à la sensibilité et la spécificité de la spectrométrie de masse ont aidé MSI devenir l&#39; un des domaines en évolution le plus rapidement dans la spectrométrie de masse 1,2. désorption laser assistée par matrice / ionisation (MALDI) est la méthode d&#39;ionisation le plus couramment utilisé pour MSI analyse. Cependant, la nécessité d&#39;une matrice organique et les conditions de vide de MALDI présentent des limitations significatives sur la reproductibilité, le débit d&#39;échantillons et les types d&#39;échantillons qui peuvent être analysés en utilisant la méthode. Un certain nombre de pression atmosphérique (AP) iométhodes d&#39;organi- ont été développés ces dernières années pour contourner ces restrictions 3. Ces méthodes d&#39;ionisation ambiantes permettent d&#39;analyser des échantillons biologiques dans un environnement qui est beaucoup plus proche de leur état naturel et de simplifier la préparation des échantillons étapes préalables à l&#39;analyse. Laser assistée par matrice désorption ionisation par électronébulisation (MALDESI) est un exemple d&#39;un tel procédé d&#39;ionisation de 4,5. Dans les expériences IR MALDESI, une mince couche de glace se dépose sur la surface du tissu comme matrice absorbant l&#39;énergie. Une impulsion laser infrarouge moyen est absorbée par la matrice de la glace, et facilite la désorption des matières neutres de la surface par excitation résonante OH mode d&#39;étirement de l&#39;eau. La neutres partition désorbé dans les gouttelettes chargées d&#39;un électrospray orthogonale et sont post-ionisé dans un mode ESI-like 4-6. L&#39;ajout de la matrice de glace exogène est préférée à compter uniquement sur l&#39;eau endogène dans le tissu, car il aide accompte des variations de teneur en eau dans différents compartiments de tissus, et a été montré pour améliorer la désorption 6 et améliorer l&#39; abondance des ions par ~ 15 fois 7,8 dans des expériences d&#39;imagerie de tissus. Dans ce travail, nous utilisons IR-MALDESI MSI pour susciter la distribution des métabolites dans les différents organes en tout un corps de souris néonatale. Un aperçu des paramètres réglables de la source IR-MALDESI est donnée, et les étapes nécessaires pour l&#39;imagerie réussie des coupes de tissus sont démontrées.

<table><tbody><tr><td>Source IR-MALDESI</td><td>Sur mesure</td><td>N/A</td><td>Veuillez vous référer aux références 4 et 12 pour une discussion approfondie du développement des sources IR-MALDESI.</td></tr><tr><td>Q Exactive Plus&nbsp ;</td><td>Thermo Scientific</td><td></td><td>Q Exactive Plus Hybride Quadrupole-Orbitrap Spectromètre</td></tr><tr><td>de masse à eau, grade HPLC</td><td>Burdick & Jackson&nbsp ;</td><td>AH365-4</td><td></td></tr><tr><td>Méthanol, qualité HPLC</td><td>Burdick & Jackson&nbsp ;</td><td>AH230-4</td><td></td></tr><tr><td>Acide formique</td><td>Sigma Aldrich&nbsp ;</td><td>56302</td><td></td></tr><tr><td>Laser mid-IR accordable</td><td>Opotek Inc.</td><td>IR Opolette</td><td>Tunable 2 700-3 100&nbsp ; nm IR OPO</td></tr><tr><td>laser Azote gazeux</td><td>Arc3 Gases</td><td>AG S-NI300-5.0</td><td>Bouteille d’azote gazeux de haute pureté Grade 5.0 (300)</td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Leica Biosystems</td><td>CM 1950</td><td>Cryomicrotome</td></tr><tr><td>à profil élevé Lames de microtome</td><td>Leica Biosystems</td><td>3802123</td><td>Leica DB80HS</td></tr><tr><td>Medium de montage (OCT)</td><td>Leica Biosystems</td><td>3801480</td><td>Surgipath FSC 22 support de montage</td></tr><tr><td>Disque d’échantillon de cryostat</td><td>Leica Biosystems</td><td>14047740045</td><td>40 mm de diamètre</td></tr><tr><td>Lames de microscope en verre</td><td>VWR</td><td>48312-003</td><td>Givrées, sélectionnées, pré-nettoyées</td></tr></tbody></table>

corps entier spectrométrie de masse d&#39;imagerie par infrarouge laser assistée par matrice désorption electrospray ionisation (ir-maldesi)

Whole-body Mass Spectrometry Imaging by Infrared Matrix-assisted Laser Desorption Electrospray Ionization (IR-MALDESI)

sources d&#39;ionisation ambiantes pour la spectrométrie de masse (MS) ont fait l&#39;objet d&#39;un grand intérêt dans la dernière décennie. Laser assistée par matrice désorption ionisation par électronébulisation (MALDESI) est un exemple de ces méthodes, lorsque les caractéristiques de laser assistée par matrice de désorption / ionisation (MALDI) (par exemple, la nature puisée de désorption) et l&#39; ionisation par électropulvérisation (ESI) (par exemple, soft-ionisation ) sont combinés. L&#39;un des principaux avantages de MALDESI est sa polyvalence inhérente. Dans des expériences MALDESI, un rayonnement ultraviolet (UV) ou infrarouge (IR) laser peut être utilisé pour exciter de façon résonnante d&#39;une matrice endogène ou exogène. Le choix de la matrice ne dépend pas de substance à analyser, et ne dépend que de la longueur d&#39;onde du laser utilisé pour l&#39;excitation. Dans les expériences IR MALDESI, une mince couche de glace se dépose sur la surface de l&#39;échantillon comme matrice absorbant l&#39;énergie. La géométrie de la source IR-MALDESI a été optimisé en utilisant la conception statistique des expériences (DOE) pour l&#39;analyse d&#39;échantillons liquides ainsi que bioldes échantillons de tissus ogique. En outre, une source solide d&#39;imagerie infrarouge MALDESI a été mis au point, où un laser à infrarouge moyen accordable est synchronisé avec un étage XY de translation commandé par ordinateur et une résolution de spectromètre de masse élevée de puissance. Une interface utilisateur graphique personnalisée (GUI) permet la sélection de l&#39;utilisateur du taux du laser de répétition, le nombre de coups par voxel, l&#39;étape de taille de la scène de l&#39;échantillon, et le délai entre la désorption et analyser les événements de la source. IR MALDESI a été utilisé dans diverses applications telles que l&#39;analyse médico-légale des fibres et des colorants et des MSI des coupes de tissus biologiques. Répartition des différents analytes allant de métabolites endogènes aux xénobiotiques exogènes à l&#39;intérieur des sections de tissu peut être mesurée et quantifiée en utilisant cette technique. Le protocole présenté dans ce manuscrit décrit les principales étapes nécessaires pour IR-MALDESI MSI des coupes de tissus du corps entier.

Les images présentées sur la figure 4 montrent la répartition spatiale des métabolites dans les différents organes de la section de tissu du corps entier. M Unique / z des valeurs à des régions spécifiques du corps ont été trouvés en utilisant MSiReader PeakFinder, suivie d&#39; un traitement par lots pour la production d&#39;image. L&#39;outil image de superposition (figure 3-4) a été utilisé pour aligner l&#39;image optique prise avan...

Une source d’imagerie par spectrométrie de masse (MSI) fonctionnant à pression atmosphérique a été développée en couplant la désorption laser dans l’infrarouge moyen et la post-ionisation par électronébulisation. Une matrice de glace exogène a été utilisée comme matrice d’absorption d’énergie pour faciliter la désorption résonnante du matériau lié aux tissus. Ce manuscrit fournit un protocole étape par étape pour la réalisation de l’IR-MALDESI MSI de souris néonatale du corps entier.

Corps entier Spectrométrie de masse d&#39;imagerie par infrarouge laser assistée par matrice désorption Electrospray Ionisation (IR-MALDESI)

Ambient ionization sources for mass spectrometry (MS) have been the subject of much interest in the past decade. Matrix-assisted laser desorption ...

L'objectif général de ce protocole est de décrire les principales étapes nécessaires à l'imagerie par spectrométrie de masse IR-MALDESI de sections tissulaires de corps entier. Cette méthode peut efficacement répondre à des questions clés dans le domaine de l'imagerie par spectrométrie de masse, telles que la distinction de la distribution spatiale d'analytes endogènes et exogènes dans plusieurs organes simultanément. Le principal avantage de cette technique est qu'elle fonctionne à pression atmosphérique et que la matrice de glace exogène permet de tenir compte des variations de teneur en eau dans différents organes.Bien que ce protocole offre un aperçu d'une imagerie ciblée de l'organisme entier, la spectrométrie de masse en imagerie par IR-MALDESI peut également être appliquée à l'analyse ciblée et quantitative de la distribution des médicaments. Le protocole suivant décrit comment réaliser des expériences d'imagerie par spectrométrie de masse avec IR-MALDESI.Des détails approfondis concernant la géométrie optimisée de la source IR-MALDESI et sa synchronisation avec le laser, le plateau et le spectromètre de masse sont disponibles ailleurs. Pour préparer l'échantillon, portez de

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Désorption ionisation électrospray spectrométrie de masse (DESI-MS) est une méthode ambiant par lequel des échantillons, y compris les tissus biologiques, peuvent être imagées avec une préparation minimale de l'échantillon. Par rastering l'échantillon en dessous de la sonde d'ionisation, cette technique spray à base offre une résolution spatiale suffisante pour discerner les caractéristiques moléculaires d'intérêt au sein des coupes de tissus.

Imagerie des tissus biologiques par désorption ionisation électrospray spectrométrie de masse

Mesure précise de la masse représente une étape importante lors de l'enquête de protéines. Laser assistée par matrice de désorption / ionisation (MALDI) la spectrométrie de masse (MS) peut être utilisée pour cette détermination et son principal avantage est la tolérance aux sels, des détergents et des contaminants. Ici, nous illustrons une approche accessible pour l'analyse des protéines de plus de 100 kDa par MALDI-MS.

Soutenue par une matrice désorption / ionisation laser temps de vol (MALDI-TOF) spectrométrie de masse Analyse des protéines intactes de plus de 100 kDa

Dithranol (DT; la 1,8-dihydroxy-9 ,10-dihydroanthracen-9-one) a été précédemment rapporté comme une matrice MALDI pour l'imagerie des tissus de petites molécules, des protocoles pour l'utilisation de DT pour l'imagerie MALDI des lipides endogènes sur l' surface des coupes de tissus par ions positifs MALDI-MS sur un ultra-résolution quadripolaire FTICR instrument sont fournies ici.

Dithranol en tant que matrice pour Matrix Assisted Laser Désorption / Ionisation imagerie sur une transformée de Fourier Ion Cyclotron Resonance Mass Spectrometer

Spectrométrie de masse imagerie (MSI) est un outil puissant qui peut être utilisé pour découvrir et identifier les différentes espèces chimiques dans les tissus intacts, en préservant les composés dans leur environnement naturel, qui peuvent fournir de nouvelles perspectives dans les processus biologiques. Ici un procédé MSI développé pour l'analyse de petites molécules est décrite.

Imagerie MALDI-spectrométrie de masse pour l&#39;investigation des métabolites dans<em&gt; Medicago truncatula</em&gt; nodules racinaires

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Apprenez la spectrométrie de masse par imagerie IR-MALDESI pour l'analyse de tissus entiers de souris néonatales. Cette méthode permet d'étudier la distribution spatiale des analytes dans plusieurs organes simultanément.

Corps entier Spectrométrie de masse dimagerie par infrarouge laser assistée par matrice désorption Electrospray Ionisation (IR-MALDESI) (Vidéo) | JoVE Journal

Corps entier Spectrométrie de masse d'imagerie par infrarouge laser assistée par matrice désorption Electrospray Ionisation (IR-MALDESI)

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