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DOI: 10.3791/54107-v
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Anastasis est techniquement difficile à détecter en vivo , parce que les cellules qui ont inversé le processus de mort cellulaire peuvent être morphologiquement impossibles à distinguer des cellules saines normales. Nous décrivons ici les protocoles pour détecter et suivre des cellules subissant anastasis animaux vivants à l’aide de notre système de biocapteur nouvellement mis au point en vivo CaspaseTracker.
L’objectif global de cette procédure est de détecter et de suivre l’inversion du processus de mort cellulaire après l’activation de la caspase chez des animaux vivants en utilisant Drosophila melanogaster comme modèle. En réponse à un stimulus de mort, les cellules subissent une mort cellulaire programmée telle que l’apoptose, qui a traditionnellement été considérée comme une cascade irréversible conduisant à la mort cellulaire. Il est intéressant de noter qu’après l’élimination du stimulus de mort, certaines cellules mourantes peuvent inverser le processus de mort cellulaire, même à un stade avancé.
Grâce à un phénomène de récupération cellulaire nouvellement découvert appelé anastase. La microscopie à cellules vivantes montre que les cellules apoptotiques mourantes présentent des caractéristiques morphologiques uniques, telles que le gonflement de la membrane plasmidique, la condensation nucléaire et le rétrécissement cellulaire. En général, on s’attend à ce que ces cellules meurent.
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