Name: Enregistrement simultané de Électrorétinographie et potentiels évoqués visuels chez des rats anesthésiés (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-01T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: Apprenez à enregistrer simultanément l'électrorétinographie et les potentiels évoqués visuels chez des rats anesthésiés. Cette méthode permet d'évaluer les effets du vieillissement et des maladies sur la voie visuelle.

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Le financement de ce projet a été fourni par le Conseil national de la santé et de la recherche médicale (NHMRC) 1046203 (BVB, AJV) et le Melbourne Neuroscience Institute Fellowship (CTN).

<ol><li>Nguyen, C. T. O., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Weymouth, A. E., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+electroretinography%3A+methods+for+extraction+and+interpretation+of+rod+and+cone+responses%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Rodent electroretinography: methods for extraction and interpretation of rod and cone responses.</a> Prog Retin Eye Res. 27, 1-44 (2008).</li>
<li>Tsai, T. I., Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+acute+intraocular+pressure+challenge+on+rat+retinal+and+cortical+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Effect of acute intraocular pressure challenge on rat retinal and cortical function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55, 1067-1077 (2014).</li>
<li>Cowey, A., Franzini, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+retinal+origin+of+uncrossed+optic+nerve+fibres+in+rats+and+their+role+in+visual+discrimination%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">The retinal origin of uncrossed optic nerve fibres in rats and their role in visual discrimination.</a> Exp Brain Res. 35, 443-455 (1979).</li>
<li>Weinstein, G. W., Odom, J. V., Cavender, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visually+evoked+potentials+and+electroretinography+in+neurologic+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Clin%22%5BJournal%5D)">Visually evoked potentials and electroretinography in neurologic evaluation.</a> Neurol Clin. 9, 225-242 (1991).</li>
<li>Odom, J. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visual+evoked+potentials+standard+%282004%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Visual evoked potentials standard (2004).</a> Doc Ophthalmol. 108, 115-123 (2004).</li>
<li>Ridder, W. H., Nusinowitz, S., Heckenlively, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Causes+of+cataract+development+in+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Causes of cataract development in anesthetized mice.</a> Exp Eye Res. 75, 365-370 (2002).</li>
<li>Nixon, P. J., Bui, B. V., Armitage, J. A., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+contribution+of+cone+responses+to+rat+electroretinograms%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Experiment+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The contribution of cone responses to rat electroretinograms.</a> Clin Experiment Ophthalmol. 29, 193-196 (2001).</li>
<li>Bui, B. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Using+the+electroretinogram+to+understand+how+intraocular+pressure+elevation+affects+the+rat+retina%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Using the electroretinogram to understand how intraocular pressure elevation affects the rat retina.</a> J Ophthalmol. 2013, 262467(2013).</li>
<li>Nguyen, C. T., Vingrys, A. J., Bui, B. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+omega-3+fatty+acids+and+ganglion+cell+function%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Dietary omega-3 fatty acids and ganglion cell function.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 49, 3586-3594 (2008).</li>
<li>Hood, D. C., Birch, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+measure+of+the+electrical+activity+of+human+rod+photoreceptors+using+electroretinography%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">A quantitative measure of the electrical activity of human rod photoreceptors using electroretinography.</a> Vis Neurosci. 5, 379-387 (1990).</li>
<li>Birch, D. G., Hood, D. C., Locke, K. G., Hoffman, D. R., Tzekov, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+electroretinogram+measures+of+phototransduction+in+cone+and+rod+photoreceptors+-+Normal+aging%2C+progression+with+disease%2C+and+test-retest+variability%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Quantitative electroretinogram measures of phototransduction in cone and rod photoreceptors - Normal aging, progression with disease, and test-retest variability.</a> Arch Ophthalmol. 120, 1045-1051 (2002).</li>
<li>Bui, B. V., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+receptoral+responses+in+pigmented+and+albino+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Development of receptoral responses in pigmented and albino guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Doc Ophthalmol. 99, 151-170 (1999).</li>
<li>Robson, J. G., Saszik, S. M., Ahmed, J., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rod+and+cone+contributions+to+the+a-wave+of+the+electroretinogram+of+the+macaque%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rod and cone contributions to the a-wave of the electroretinogram of the macaque.</a> J Physiol. 547, 509-530 (2003).</li>
<li>Severns, M. L., Johnson, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+care+and+fitting+of+Naka-Rushton+functions+to+electroretinographic+intensity-response+data%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">The care and fitting of Naka-Rushton functions to electroretinographic intensity-response data.</a> Doc Ophthalmol. 85, 135-150 (1993).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Origin+of+electroretinogram+amplitude+growth+during+light+adaptation+in+pigmented+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Vis+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Origin of electroretinogram amplitude growth during light adaptation in pigmented rats.</a> Vis Neurosci. 23, 155-167 (2006).</li>
<li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> J Physiol. 555, 153-173 (2004).</li>
<li>Tremblay, F., Laroche, R. G., Debecker, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Electroretinographic+Diagnosis+of+the+Incomplete+Form+of+Congenital+Stationary+Night+Blindness%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">The Electroretinographic Diagnosis of the Incomplete Form of Congenital Stationary Night Blindness.</a> Vision Res. 35, 2383-2393 (1995).</li>
<li>Bayer, A. U., Keller, O. N., Ferrari, F., Maag, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+glaucoma+with+neurodegenerative+diseases+with+apoptotic+cell+death%3A+Alzheimer%27s+disease+and+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Association of glaucoma with neurodegenerative diseases with apoptotic cell death: Alzheimer's disease and Parkinson's disease.</a> Am J Ophthalmol. 133, 135-137 (2002).</li>
<li>Wostyn, P., Audenaert, K., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+abnormal+high+trans-lamina+cribrosa+pressure+difference%3A+A+missing+link+between+Alzheimer%27s+disease+and+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Neurology+and+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">An abnormal high trans-lamina cribrosa pressure difference: A missing link between Alzheimer's disease and glaucoma.</a> Clinical Neurology and Neurosurgery. 110, 753-754 (2008).</li>
<li>Yucel, Y. H., Zhang, Q. A., Weinreb, R. N., Kaufman, P. L., Gupta, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+retinal+ganglion+cell+loss+on+magno-%2C+parvo-%2C+koniocellular+pathways+in+the+lateral+geniculate+nucleus+and+visual+cortex+in+glaucoma%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Effects of retinal ganglion cell loss on magno-, parvo-, koniocellular pathways in the lateral geniculate nucleus and visual cortex in glaucoma.</a> Prog Retin Eye Res. 22, 465-481 (2003).</li>
<li>Gupta, N., Yucel, Y. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((What+changes+can+we+expect+in+the+brain+of+glaucoma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Survey+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">What changes can we expect in the brain of glaucoma patients.</a> Survey of Ophthalmology. 52, 122-126 (2007).</li>
<li>Kong, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+aging+and+diet+restriction+on+retinal+function+during+and+after+acute+intraocular+pressure+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Aging%22%5BJournal%5D)">Impact of aging and diet restriction on retinal function during and after acute intraocular pressure injury.</a> Neurobiol Aging. 33, 1115-1125 (2012).</li>
<li>Bui, B. V., Sinclair, A. J., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electroretinograms+of+albino+and+pigmented+guinea-pigs+%28Cavia+porcellus%29%5BTitle%5D)+AND+%22Aust+N+Z+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Electroretinograms of albino and pigmented guinea-pigs (Cavia porcellus).</a> Aust N Z J Ophthalmol. 26, Suppl 1 98-100 (1998).</li>
<li>Jobling, A. I., Wan, R., Gentle, A., Bui, B. V., McBrien, N. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+and+choroidal+TGF-beta+in+the+tree+shrew+model+of+myopia%3A+isoform+expression%2C+activation+and+effects+on+function%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Retinal and choroidal TGF-beta in the tree shrew model of myopia: isoform expression, activation and effects on function.</a> Exp Eye Res. 88, 458-466 (2009).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissecting+the+dark-adapted+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Doc+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Dissecting the dark-adapted electroretinogram.</a> Doc Ophthalmol. 95, 187-215 (1998).</li>
<li>Robson, J. G., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+rod-driven+a-wave+of+the+dark-adapted+mammalian+electroretinogram%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The rod-driven a-wave of the dark-adapted mammalian electroretinogram.</a> Prog Retin Eye Res. 39, 1-22 (2014).</li>
<li>Hudnell, H. K., Boyes, W. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+comparability+of+rat+and+human+visual-evoked+potentials%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">The comparability of rat and human visual-evoked potentials.</a> Neurosci Biobehav Rev. 15, 159-164 (1991).</li>
<li>Charng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Conscious+wireless+electroretinogram+and+visual+evoked+potentials+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Conscious wireless electroretinogram and visual evoked potentials in rats.</a> PLoS One. 8, e74172(2013).</li>
<li>Hetzler, B. E., Berger, L. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ketamine-Induced+Modification+of+Photic+Evoked-Potentials+in+the+Superior+Colliculus+of+Hooded+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Ketamine-Induced Modification of Photic Evoked-Potentials in the Superior Colliculus of Hooded Rats.</a> Neuropharmacology. 23, 473-476 (1984).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont aucune divulgation pertinente pour ce travail.

L&#39;ERG et VEP sont des mesures objectives de la fonction visuelle de la rétine et du cortex, respectivement. L&#39;avantage de l&#39;enregistrement simultané est qu&#39;une vision plus globale de l&#39;ensemble de la voie visuelle est assurée. Plus précisément, les informations complémentaires de leur évaluation simultanée pourrait fournir une délimitation plus claire du site de la lésion dans la voie visuelle (par exemple, pour les troubles qui se chevauchent encore ERG distincte VEP manifestations 18,...

Mesure de l&#39;électrorétinogramme (ERG) et potentiel évoqué visuel (VEP) fournir des évaluations quantitatives utiles de l&#39;intégrité de la voie visuelle. L&#39;ERG mesure les réponses électriques de la rétine à une stimulation lumineuse, tandis que la VEP mesure l&#39;intégrité fonctionnelle correspondante des voies visuelles de la rétine au cortex visuel primaire suivant le même événement lumière. Ce manuscrit décrit un protocole pour l&#39;enregistrement et l&#39;analyse des réponses ERG et VEP dans un modèle de laboratoire couramment utilisé, le rat. L&#39;ERG fournit un indice de l&#39;intégrité fonctionnelle d&#39;un certain nombre de classes clés de cellules rétiniennes en quantifiant réponse électrique brute de la rétine à un flash de lumière. Une série coordonnée des flux ioniques initiée par l&#39;apparition de lumière et de décalage, produire des changements détectables dans la tension qui peut être mesurée en utilisant des électrodes de surface placées à l&#39;extérieur de l&#39;œil. La forme d&#39;onde résultante représente la combinaison d&#39;un soiries de composants bien définis, différents en amplitude, le calendrier et la fréquence. Un important corpus de recherche a montré que ces composants sont relativement bien conservés dans de nombreux rétines vertébrés et que les composants peuvent être séparés les uns des autres. En choisissant judicieusement le stimulus (flash stimulus, fond, intervalle interstimulus) conditions et en choisissant des caractéristiques spécifiques de la forme d&#39; onde composite à analyser , on peut être sûr de retourner une mesure d&#39;un groupe spécifique de cellules rétiniennes 1,2. Ces caractéristiques sous-tendent l&#39;utilité et donc les applications répandues de l&#39;ERG en tant que mesure non-invasive de la fonction de la rétine. Ce manuscrit se concentre sur la méthodologie de mesure de l&#39;ERG et l&#39;analyse de ses caractéristiques pour renvoyer des informations sur certaines des principales classes de cellules de la rétine, à savoir photorécepteurs (la composante PIII), les cellules bipolaires (la composante PII) et les cellules ganglionnaires de la rétine (le positif seuil de réponse scotopique ou pstr). <p class= &quot;Jove_content&quot;&gt; Le VEP fournit une analyse de la réponse corticale à la lumière; la première provenant de la rétine et par la suite transmis en série par l&#39; intermédiaire du nerf optique, l&#39; appareil optique, le thalamus (noyau genouillé latéral, LGN) et le rayonnement optique à la zone V1 du cortex 3. Chez les rongeurs, la majorité (90 - 95%) des fibres du nerf optique de chaque decussate oculaire 4 et innervent le mésencéphale controlatéral. Contrairement à l&#39;ERG, il est encore impossible d&#39;attribuer les différentes composantes de la VEP à des classes de cellules spécifiques, 5 change donc partout le long de la voie visuelle pourrait affecter la forme d&#39; onde VEP. Néanmoins, le VEP est une mesure non-invasive utile de la performance visuelle et de l&#39;intégrité de la voie visuelle. Le VEP, lorsqu&#39;il est utilisé en conjonction avec l&#39;ERG, peut fournir une évaluation plus complète du système visuel (ie, la rétine / voie visuelle). ERG et VEP enregistrements peuvent être effectuées de manière isolée ou en combinaison, en fonction de l&#39;application. La méthodologie décrite dans ce document permet une évaluation simultanée de la rétine et du cortex électrophysiologie visuelle évoqué des deux yeux et les deux hémisphères chez les rats anesthésiés. Ceci est un moyen utile d&#39;évaluer de façon plus complète la fonction rétinienne et les effets en amont que les changements dans la fonction rétinienne peuvent avoir sur la fonction corticale évoquée visuelle.

<table><tbody><tr><td>Pince crocodile</td><td>marque générique</td><td>HM3022</td><td>Clip en acier inoxydable 26 mm pour connecter des électrodes à vis VEP à des câbles</td></tr><tr><td>Bioamplificateur</td><td>ADInstruments</td><td>ML 135</td><td>Pour amplifier les signaux ERG et VEP</td></tr><tr><td>Carboxyméthylcellulose sodique 1,0</td> %<td>Allergan</td><td>CAS 0009000-11-7</td><td>Fluide visqueux pour améliorer la qualité du signal de l’électrode active ERG</td></tr><tr><td>Carprofène 0,5 %</td><td>Groupe Santé animale de Pfizer</td><td>CAS 53716-49-7</td><td>Nom exclusif : Rimadyl injectable (50 mg/ml). Pour l’analgésie post-opératoire, diluée à 0,5 % (5 mg/ml) dans une solution saline normale</td></tr><tr><td>Chlorhexadine 0,5 %</td><td>Orion Laboratories</td><td>27411, 80085</td><td>Pour désinfecter les instruments chirurgicaux</td></tr><tr><td>Bain-marie circulant</td><td>Lauda-K&ouml ; nigshoffen</td><td>MGW Lauda</td><td>Pour le maintien de la température corporelle de l’animal anesthésié pendant l’opération et les enregistrements électrophysiologiques</td></tr><tr><td>Amalgame dentaire</td><td>DeguDent GmbH</td><td>64020024</td><td>Pour envelopper l’ensemble électrode-crâne afin de le rendre plus robuste</td></tr><tr><td>Fraise dentaire</td><td>Storz Instruments, Bausch and Lomb</td><td>#E0824A</td><td>Une tête de forage miniature de ~ 0,7 mm de diamètre pour faire un petit trou dans le crâne sur chaque hémisphère afin d’implanter des vis VEP</td></tr><tr><td>Perceuse Bosch</td><td></td><td>Dremel série 300</td><td>Une perceuse automatique pour trépaner</td></tr><tr><td>Électrode en plomb</td><td>Gazon Téléfacteur&nbsp ;</td><td>F-E2-30</td><td>Câbles en platine pour connecter les électrodes en fil d’argent à l’amplificateur</td></tr><tr><td>Cage de Faraday</td><td>sur</td><td></td> mesure <td>Assure l’étanchéité à la lumière pour maintenir l’adaptation à l’obscurité. Intègre la configuration Ganzfeld pour améliorer le rapport signal/bruit</td></tr><tr><td>Écouvillons de gaze</td><td>Multigate Medical Products Pty Ltd</td><td>57-100B</td><td>Pour le séchage de l’incision chirurgicale et de la surface exposée du crâne pendant l’intervention chirurgicale</td></tr><tr><td>Sphère d’intégration Ganzfeld</td><td>Photometric Solutions International</td><td></td><td>Stimulateur de lumière conçu sur mesure : 36 mm de diamètre, 13 cm d’ouverture</td></tr><tr><td>Taille Velcro</td><td>VELCRO Australia Pty Ltd</td><td>VELCRO Marque Réutilisable Enveloppe</td><td>Fermeture auto-agrippante pour fixer les électrodes et l’animal sur la plate-forme d’enregistrement</td></tr><tr><td>Isoflurane 99,9 %</td><td>Abbott Australasia Pty Ltd</td><td>CAS 26675-46-7</td><td>Nom exclusif : Isoflo(TM) Anathésique par inhalation. Anesthésique par inhalation de qualité pharmaceutique mélangé à de l’oxygène gazeux pour la chirurgie d’implant d’électrodes VEP</td></tr><tr><td>Kétamine&nbsp ;</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Ketamil</td><td>Nom exclusif : Ketamil Injection, Marque : Ilium. Anesthésique de qualité pharmaceutique pour l’enregistrement électrophysiologique</td></tr><tr><td>Luxeon LEDs</td><td>Phillips Lighting Co.</td><td></td><td>Pour la stimulation lumineuse, vingt LED de 5 W et une LED de 1 W.</td></tr><tr><td>Micromanipulateur</td><td>Harvard Apparatus</td><td>BS4 50-2625</td><td>Maintient l’électrode active ERG pendant les enregistrements</td></tr><tr><td>Électrode à aiguille</td><td>Téléfacteur d’herbe&nbsp ;</td><td>F-E2-30</td> Inséré par voie <td>sous-cutanée dans la queue pour servir d’électrode de masse pour l’ERG et le VEP</td></tr><tr><td>Phényléphrine 2,5 % minimums&nbsp ;</td><td>Bausch and Lomb</td><td>CAS 61-76-7</td><td>Instillé avec Tropicamide pour obtenir une dilatation maximale pour l’enregistrement ERG</td></tr><tr><td>Povidone iode 10 %</td> <td>Sanofi-Aventis</td><td>CAS 25655-41-8</td><td>Nom propriétaire : Bétadine, Antiseptique pour préparer la peau rasée à la chirurgie 10 %, 500 ml</td></tr><tr><td>Système d’acquisition de données Powerlab</td><td>ADInstruments</td><td>ML 785</td><td>Contrôle les LED</td></tr><tr><td>Proxymetacaine 0,5</td> % <td>Alcon Laboratories& nbsp ;</td><td>CAS 5875-06-9</td><td>Pour l’anesthésie cornéenne lors d’enregistrements ERG</td></tr><tr><td>Solution saline</td><td>Gelflex</td><td></td><td>Non injectable, pour la galvanoplastie des électrodes en fil d’argent</td></tr><tr><td>Scope Software</td><td>ADInstruments</td><td>version 3.7.6</td><td>Déclenche simultanément le stimulus via le système Powerlab et collecte les données</td></tr><tr><td>Silver (fil rond fin)</td><td>A& E métal</td><td>0,3 mm</td><td>Utilisé pour fabriquer des électrodes ERG actives et inactives, et l’électrode VEP inactive</td></tr><tr><td>Vis en acier inoxydable&nbsp ;</td><td>MicroFasterners Diamètre de</td><td></td><td>la tige de 0,7 mm, 3 mm de longueur à implanter sur le cortex visuel primaire et servir d’électrodes VEP actives</td></tr><tr><td>Cadre stéréotaxique</td><td>David Kopf</td><td>Modèle 900</td><td>Un instrument stéréotaxique pour petits animaux permettant de localiser les cortex visuels primaires selon Paxinos & L’atlas du cerveau de rat de Watson de 2007 coordonne</td></tr><tr><td>la lame chirurgicale</td><td>Swann-Morton Ltd.</td><td>0206</td><td>Pour l’incision de la zone de la peau recouvrant le cortex visuel primaire pour implanter les électrodes VEP</td></tr><tr><td>Suture</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd</td><td></td><td>3-0 suture tressée en soie non résorbable, pour la rétraction cutanée pendant la chirurgie d’implantation d’électrodes VEP</td></tr><tr><td>Tobramycine pommade oculaire 0,3</td> % <td>Laboratoires Alcon&nbsp ;</td><td>CAS 32986-56-4</td><td>Nom de marque : Tobrex. Pommade antibiotique prophylactique appliquée autour de la plaie cutanée après l’intervention</td></tr><tr><td>Tropicamide 0,5</td> %<td>Laboratoires Alcon&nbsp ;</td><td>CAS 1508-75-4</td><td>Nom de marque : 0,5 % de collyre mydriacyle, instillé pour obtenir une mydriase pour l’enregistrement ERG</td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Troy Laboratories</td><td>Ilium Xylazil-100</td><td>Anesthésique de qualité pharmaceutique pour l’enregistrement électrophysiologique</td></tr><tr><td>Pointe de pipette Eppendorf</td><td>Pty Ltd</td><td>0030 073.169</td><td>Eppendorf epTIPS 100 - 5 000 ml, pour électrodes sur mesure</td></tr><tr><td>Microsoft Office Excel</td><td>Microsoft</td><td>version 2010</td><td>tableur logiciel pour l’analyse des données</td></tr><tr><td>Lethabarb Euthanazia Injection</td><td>Virbac (Australia) Pty Ltd</td><td>LETHA450</td><td>325 mg/ml de pentobarbital sodique pour l’euthanasie rapide</td></tr></tbody></table>

enregistrement simultané de Électrorétinographie et potentiels évoqués visuels chez des rats anesthésiés

Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats

L’électrorétinogramme (ERG) et le potentiel évoqué visuel (VEP) sont couramment utilisés pour évaluer l’intégrité de la voie visuelle. L’ERG mesure les réponses électriques de la rétine à la stimulation lumineuse, tandis que le VEP mesure l’intégrité fonctionnelle correspondante des voies visuelles de la rétine au cortex visuel primaire après le même événement lumineux. La forme d’onde ERG peut être décomposée en composants qui reflètent les réponses de différentes classes de cellules neuronales et gliales rétiniennes. Les premiers composants de la forme d’onde VEP représentent l’intégrité du nerf optique et des centres corticaux supérieurs. Ces enregistrements peuvent être réalisés de manière isolée ou collective, selon l’application. La méthodologie décrite dans cet article permet l’évaluation simultanée de l’électrophysiologie visuelle évoquée rétinienne et corticale des deux yeux et des deux hémisphères. Il s’agit d’un moyen utile d’évaluer de manière plus complète la fonction rétinienne et les effets en amont que les modifications de la fonction rétinienne peuvent avoir sur la fonction corticale visuelle évoquée.

L&#39;ERG a-wave (&gt; -1.38 log cd.sm -2), b-ondes (&gt; - 4,99 log cd.sm -2) DOD (&lt;- 4,99 log cd.sm -2) et les VEPs (&gt; - 0,52 log cd.sm -2) ont été enregistrés simultanément (Figure 1 et 3). A clignote très faibles, un STR positif (pstr) est observée à environ 110 ms après le flash, et ​​un STR négatif (NSTR) , à environ 220 msec (figures 1 et 2). Un ERG avec un grand b-ondes, des pics entre 50 à 100 ms...

Ce protocole décrit la mesure simultanée de l’électrorétinogramme et des potentiels évoqués visuels chez des rats anesthésiés.

Enregistrement simultané de Électrorétinographie et potentiels évoqués visuels chez des rats anesthésiés

The electroretinogram (ERG) and visual evoked potential (VEP) are commonly used to assess the integrity of the visual pathway. The ERG measures the ...

L'objectif général de cette procédure est de mesurer simultanément l'électrorétinogramme et le potentiel évoqué visuel chez le rat. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des neurosciences de la fente, par exemple si l'effet du vieillissement ou des maladies affecte certaines composantes du chemin visuel.L'avantage principal de cette technique est qu'elle permet une évaluation complète de la fonction rétinienne et de son effet en amont sur la fonction corticale évoquée visuelle. Pour commencer cette procédure, préparez les électrodes inactives ERG sur mesure en coupant un morceau de fil d'argent de 70 millimètres de longueur et en formant une boucle de huit millimètres de diamètre destinée à entourer l'œil du rat. Préparez un cercle uniforme et ajustez la taille de la boucle en la façonnant sur l'embout d'un tuyau de un millimètre.Ceci est important car un anneau trop petit pourrait involontairement augmenter la pression intra-articulaire, tandis qu’un anneau surdimensionné peut accroître la variabilité des signaux. Ensuite, préparez l’électrode inactif VEP sur mesure en découpant un morceau d’argent de 70 millimètres de longueur et en formant une ellipse de huit millimètres de diamètre afin de le fixer aux incisives du rat.Ensuite, préparer les électrodes actives personnalisées pour l'ERG en découpant un morceau de fil d'argent de 30 millimètres de longueur et en formant une petite boucle d'environ un à deux millimètres de diamètre, qui servira à toucher délicatement la cornée du rat avec un minimum d'abrasions cornéennes. Par la suite, fixer solidement les électrodes aux câbles d'électrode en torsadant le fil d'argent avec le fil interne exposé. Isoler tout métal exposé excédentaire à l’aide de ruban adhésif afin de réduire les artefacts photo-voltaïques.Pour les électrodes actives du REG, on peut appliquer davantage de couches de ruban adhésif isolant afin d'obtenir un enroulement plus épais et plus rigide, ce qui facilite la tenue avec un micromanipulateur. Sur chaque électrode inactive du REG, fixer un petit morceau de velcro sur le ruban adhésif afin de permettre une fixation stable à la courroie cervicale du rongeur. Ensuite, pour chaque électrode active du PEO, attacher une pince crocodile au fil intérieur de la connexion de l'électrode.Juste avant les enregistrements, électrolyser les surfaces exposées des fils d'argent avec du chlorure afin d'améliorer la conduction du signal. Pour ce faire, relier la cathode à la borne négative de la batterie et plonger l'autre extrémité dans la solution saline. Ensuite, plonger l'extrémité en argent du fil d'anode dans une solution saline normale et relier l'autre extrémité de ce fil d'électrode à la borne positive d'une batterie de neuf volts.Les déconnecter après 20 secondes et l'extrémité argentée du fil de l'électrode doit être uniformément recouverte de blanc. Répéter la procédure de chloruration pour toutes les électrodes ERG et VEP en argent. Dans cette procédure, désinfecter trois fois la zone rasée d'un animal anesthésié avec de la povidone iodée à 10 %.Réalisez une incision sagittale le long de la ligne médiane de la tête à l’aide d’un scalpel et excisez un cercle de tissu dermique d’un diamètre de 20 millimètres afin d’exposer l’os crânien. Ensuite, retirez le périoste sous-jacent en grattant et en séchant avec de la gaze, afin d’exposer les sutures crâniennes coronale et sagittale. Percez deux trous à travers le crâne dans chacun des hémisphères.Vissez des vis en acier inoxydable dans les deux trous préfabriqués jusqu'à une profondeur d'un millimètre afin d'assurer un ancrage ferme. Ensuite, préparez la zone chirurgicale pour l'amalgame dentaire en séchant l'os crânien avec du gaz et en rétractant la peau à l'aide de deux fils de suture. Par la suite, étalez l'amalgame dentaire sur le crâne exposé pour fixer les électrodes à vis en place et veiller à ce qu'environ 1,5 millimètre des vis soit exposé pour l'enregistrement.Ensuite, retirez les sutures de rétraction. Pour les enregistrements scotopiques, toutes les procédures sont effectuées dans une pièce sombre. À des fins illustratives, le positionnement de l'électrode est réalisé ici sous un éclairage ambiant normal.L'animal a été adapté à l'obscurité pendant 12 heures et anesthésié avec de la kétamine et de la xylazine. Après la dilatation de la pupille et une anesthésie topique, accrochez l'électrode VEP inactive autour des incisives inférieures. Ensuite, placez l'animal sur la plateforme d'ERG devant le bol de Ganzfeld situé dans la cage de Faraday.Immobilisez l'animal sur la plateforme à l'aide d'une bande de velcro placée fermement mais sans trop serrer au niveau de la nuque. Ensuite, positionnez les électrodes inactives d'ERG en entourant de manière non invasive la couronne sclérale autour de l'équateur des yeux, à environ trois mètres en arrière du limbe.Stabilisez cela en fixant l'électrode à la bande de fermeture à crochet et à boucle située au niveau de la nuque. Répétez la procédure pour l'œil controlatéral. Fixez maintenant les électrodes actives pour les PVE en raccordant des pinces crocodile aux vis en acier inoxydable pré-implantées sur le crâne.Avant la pose de l'électrode active d'ERG, déposer une petite goutte de chlorure de sodium à 1 % sur l'électrode afin d'améliorer la qualité du signal. Positionner les électrodes actives d'ERG de manière à ce qu'elles touchent légèrement la surface centrale de la cornée, à l'aide d'un micromanipulateur fixé au bras stéréotaxique sur mesure. Veiller à ce que le chlorure de sodium ne touche que la cornée et non la sclérotique, en essuyant l'excès de liquide.Insérez ensuite deux à cinq millimètres de l'électrode aiguille en acier inoxydable mise à la terre sous la peau de la queue. Rapprochez le plateau de la coupole Ganzfeld et assurez-vous que les yeux de l'animal soient alignés avec l'ouverture de la coupole afin d'assurer une illumination uniforme des deux rétines. Fermez ensuite la cage de Faraday afin de réduire les bruits parasites.À l’aide du protocole ci-dessus, une série de formes d’onde du REC peut être enregistrée en réponse à une gamme de stimuli, l’éclat le plus faible étant représenté en bas et le plus intense en haut. À des niveaux de lumière très faibles, des réponses seuil scotopiques peuvent être enregistrées. Lorsque l’intensité du stimulus augmente, les formes d’onde sont d’abord dominées par l’onde B, puis l’onde A négative apparaît aux stimuli les plus intenses.La fonction des photorécepteurs en bâtonnet peut être évaluée en utilisant un P3 pour modéliser l'onde A. Ce graphique montre que l'amplitude du P2 augmente avec l'énergie croissante du stimulus. La fonction des cellules bipolaires en bâtonnet peut être évaluée en modélisant les théories de réponse à l'intensité du P2 du bâtonnet à l'aide d'une fonction de Naka-Rushton.La fonction des cellules ganglionnaires rétiniennes est évaluée à de faibles énergies lumineuses et quantifiée par l'amplitude maximale et le délai du pSTR. La fonction des cellules bipolaires des cônes est provoquée par un paradigme de flash apparié et quantifiée par l'amplitude maximale et le délai du pic P2 des cônes. L'analyse d'amplitude du PVE repose sur les amplitudes de crête à creux et de creux à crête, ce qui fournit le délai de ces réponses.L'amplitude des formes d'onde des PVE augmente avec l'énergie du stimulus croissante. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en environ 30 à 45 minutes, hors le temps nécessaire à la préparation et au positionnement de l'électrode ainsi qu'à l'adakadaptation. Lors de la réalisation de cette procédure, il est particulièrement important de prêter attention à la précision du positionnement des électrodes et de prévoir suffisamment de temps pour l'adakadaptation.Après cette procédure, d'autres procédures telles que la modification de la maladie ou les thérapies peuvent être réalisées afin de répondre à des questions spécifiques. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière de préparer et de placer les électrodes, ainsi que d'enregistrer et d'analyser les formes d'onde du REC et du PEO.

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Cette vidéo montre la préparation d’un modèle de rat pour étudier la santé de la rétine et l’intégrité des voies visuelles. Le potentiel évoqué visuel, la référence d’électrorétinographie et les électrodes actives sont connectées au rat, puis alignées sur la plate-forme avec le rat devant le bol de Ganzfeld pour un éclairage rétinien uniforme et fermées la cage de Faraday pour éviter les interférences externes.

Préparation d’un modèle de rat pour évaluer l’intégrité de la voie visuelle à l’aide d’une configuration électrophysiologique

Cette vidéo montre le processus de mesure des potentiels évoqués visuels ou VEP chez un rat anesthésié adapté à l'obscurité avec des électrodes crâniennes préimplantées, qui enregistrent les signaux électriques du cortex visuel du cerveau en réponse à des stimuli lumineux.

Enregistrement de potentiels évoqués visuels via les électrodes du crâne dans un modèle de rat

Cette vidéo montre la procédure d’enregistrement simultané d’électroencéphalographie (EEG) co-localisée et de potentiels de champ local (LFP) chez un rat anesthésié. Le processus consiste à préparer le rat et à fixer des électrodes stimulantes à ses coussinets de moustaches. Une électrode EEG araignée est placée sur le crâne du rat pour les mesures EEG de surface. Dans le même temps, une microélectrode multicanal est insérée dans une région spécifique du cerveau à travers un trou de bavure dans...

Enregistrements simultanés d’électroencéphalographie et de potentiel de champ local chez un rat anesthésié

Cette vidéo montre comment enregistrer l’électrorétinogramme (ERG) et le potentiel évoqué visuel (VEP) chez un rat conscient. Le rat, avec des électrodes implantées chirurgicalement, est d’abord adapté à l’obscurité. Après avoir appliqué des gouttes dilatantes, l’animal est placé dans une contention et positionné dans un bol Ganzfeld. Les signaux ERG et VEP sont ensuite enregistrés.

Enregistrement d’un électrorétinogramme et d’un potentiel évoqué visuel chez un rat

Cette vidéo montre l’enregistrement d’un électrorétinogramme à couplage direct (DC-ERG) sur un épithélium pigmentaire rétinien (EPR) de souris anesthésié et adapté à l’obscurité. Après avoir appliqué des gouttes dilatatrices, l’animal est placé dans une configuration d’enregistrement et l’électrode capillaire remplie d’un tampon de sel est placée sur la cornée. Après avoir établi la base de référence, le DC-ERG est enregistré.

Enregistrement par électrorétinogramme à couplage direct de l’épithélium pigmentaire rétinien chez une souris

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Utilisation de la Électrorétinogramme pour évaluer la fonction dans le Retina rongeurs et les effets protecteurs de la distance préconditionnement ischémique Limb

La démyélinisation focale est induite dans le nerf optique par micro-injection de lysolécithine. Les potentiels évoqués visuels sont enregistrés via des électrodes crâniennes implantées sur le cortex visuel pour examiner la conduction du signal le long de la voie visuelle in vivo. Ce protocole détaille les procédures chirurgicales sous-jacentes à l’implantation d’électrodes et à la micro-injection de nerf optique.

Enregistrement Potentiel évoqué visuel dans un modèle de rat of Experimental Optic Nerve démyélinisation

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Implantation et enregistrement de Wireless Électrorétinogramme et potentiel évoqué visuel chez des rats conscients

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Enregistrement simultané d’électroencéphalographie co localisée et le potentiel de champ Local dans rongeurs

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Enregistrement électrorétogramme pour nourrissons et enfants sous anesthésie pour atteindre une adaptation optimale des ténèbres et des normes internationales

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Apprenez à enregistrer simultanément l'électrorétinographie et les potentiels évoqués visuels chez des rats anesthésiés. Cette méthode permet d'évaluer les effets du vieillissement et des maladies sur la voie visuelle.

Enregistrement simultané de Électrorétinographie et potentiels évoqués visuels chez des rats anesthésiés

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