Néphrotoxine microinjection dans Zebrafish au Modèle lésion rénale aiguë

L’objectif général de ce protocole est d’utiliser le poisson-zèbre pour observer l’effet des néphrotoxines telles que la gentamicine ou le cisplatine pour modéliser les lésions rénales aiguës. Le principal avantage de cette technique est que le modèle de poisson-zèbre permet d’imager en temps réel les lésions cellulaires et la régénération après une lésion rénale aiguë. Pour commencer cette procédure, préparez un outil de manipulation d’embryons pour positionner les embryons pour la micro-injection en fixant une pointe de chargement de gel à l’extrémité d’une aiguille de dissection droite de cinq pouces et fixez-la avec du ruban adhésif ou de la super colle.

Ensuite, préparez de fines aiguilles de micro-injection effilées en tirant les verres borosilicatés polis au feu avec du filament à l’aide d’un extracteur de pipette. Ensuite, utilisez une lame de rasoir ou une pince fine pour couper les pointes de l’aiguille afin de créer des pointes d’injection angulaires et tranchantes. Par la suite, placez les aiguilles sur une bande de pâte à modeler dans une boîte de Pétri pour protéger les pointes des aiguilles.