Name: Approche chirurgicale pour Occlusion de lartère cérébrale moyenne et reperfusion induite par des maladies chez les souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-10-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 30 s
Description: Apprenez la méthode de Longa pour l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne chez la souris, un modèle d'AVC fiable avec taux de survie élevé. Cette technique permet d'étudier l'ischémie et d'identifier des cibles thérapeutiques.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ce travail a été financé par le National Institute of Health, le National Heart Lung and Blood Institute (NIH et NHLBI ; HL125572-01A1) et le fonds de démarrage LSUHSC-S à F.N.E. Gavins.

Ce protocole et les expériences rapportées dans la vidéo ont été approuvés par le Comité LSUHSC-S institutionnel soin et l&#39;utilisation des animaux et sont en conformité avec les directives du NIH. NOTE: Homme C57BL / 6 souris pesant 25-29 g ont été utilisés dans cette étude. Les souris ont été maintenues sur un régime standard chow à granulés avec un accès libre à l&#39;eau, sous 12 h cycle lumière / obscurité dans des cages individuellement ventilées. La procédure sera effectuée dans des conditions stériles en utilisant des techniques stériles (par exemple, des gants stériles, des instruments stériles). Préparation 1. Pré-chirurgicales <ol><li> Induire une anesthésie en utilisant une combinaison de kétamine (150 mg / kg) et de xylazine (10 mg / kg) injecté par voie intraperitoneale (ip). Surveiller la profondeur de l&#39;anesthésie à pied pincée d&#39;abord tous les 3 - 5 min et toutes les 10 minutes lorsque l&#39;anesthésie est atteint. Alors que l&#39;animal est sous anesthésie, administrer une pommade stérile oculaire pour prévenir la sécheresse. La dose initiale de kétamine / xylazine dure habituellement abà 30-40 minutes. Une dose supplémentaire peut être administrée, si nécessaire, qui est contrôlée par la réponse de l&#39;animal à un pincement des pieds. </li><li> Placez la souris dans une position couchée sur un tapis de chaleur à température régulée et maintenir la température du corps à 36,5 ± 0,1 ° C, qui est vérifiée à l&#39;aide d&#39;une sonde rectale. </li><li> Raser le cou et désinfecter la peau avec de l&#39;alcool éthylique à 70%. </li></ol> 2. L&#39;occlusion de la MCA (Figure 1) <ol><li> Faire une incision au cou de la ligne médiane en utilisant Iris Ciseaux droits et se rétracter (en utilisant écarteurs) les tissus mous pour exposer les vaisseaux. </li><li> Disséquer le CCA et la CEA à partir des tissus environnants en utilisant une pince Dumont sans endommager le nerf vague. </li><li> Faire une suture temporaire en faisant un nœud lâche autour de la CCA en utilisant soie 6-0. </li><li> Faire une suture permanente autour de la CEA et les petits vaisseaux s&#39;étendant de lui en ligaturant étroitement les vaisseaux (distales à la bifurcation de la CCA). </li><li> Faire un aro de sutureund proximal ECA à la bifurcation CCA. </li><li> Placez un clip microvaisseaux autour de l&#39;artère carotide interne (ICA) et l&#39;artère ptérygopalatin (PPA). </li><li> Faire une petite incision dans la CEA à l&#39;aide de micro dissection ciseaux à ressort et insérez un monofilament de silicium à pointe 180 um. Faire la coupe aussi près de la suture permanente que possible pour faciliter la manipulation du filament. </li><li> Serrer la suture temporaire autour de la CEA avec le filament inséré et retirer le clip de microvaisseaux. </li><li> Couper la CEA entre la suture distale permanente et le point du filament utilisant des micro dissection ciseaux à ressort d&#39;entrée. </li><li> Guide du filament à travers l&#39;ICA jusqu&#39;à sentir une résistance (env. 9 - 10 pm au-delà de la bifurcation de la CCA) dans le MCA. NOTE: Dans le cas où une trop grande résistance se fait sentir alors que la majorité du filament est encore visible, le filament peut avoir pénétré dans le PPA. Si cela se produit, retirez le filament retour à la bifurcation, doucement push vers l&#39;avant dans les pinces à l&#39;aide de Dumont ICA, et de faire avancer le filament jusqu&#39;à ce qu&#39;il puisse être visualisé dans l&#39;ICA. </li></ol> 3. reperfusion <ol><li> Après une période d&#39;occlusion de 30 min, retirez le filament en le tirant doucement en arrière en utilisant une pince Dumont et fixer la suture autour de l&#39;extrémité ouverte de la CEA. </li><li> Retirer la suture temporaire autour de la CCA en desserrant soigneusement la ligature en utilisant Dumont pince et le débit sanguin est repris par le CCA. </li><li> Fermer l&#39;incision avec une suture chirurgicale continue. Fermeture de la peau peut être réalisée soit par des sutures continues ou interrompues. agrafes de la peau sont également une méthode acceptable. </li><li> Injecter souris avec 1 ml de solution saline sous-cutanée que le volume de réapprovisionnement et avec les carprofène analgésiques (5 mg / kg, sc) pour le soulagement de la douleur et de l&#39;inconfort de la procédure chirurgicale, des signes qui indiquent le soulagement de la douleur supplémentaire est nécessaire comprennent dos voûté, manteau non damées, diminution de l&#39;activité, anormaleposture, et une diminution de l&#39;appétit. </li><li> Observer les souris à travers la récupération de l&#39;anesthésie dans une chauffée C cage 30 ° à l&#39;aide d&#39;une lampe de chaleur régulée en utilisant un régulateur de température et placez-chow purée dans une boîte de Pétri sur le plancher de la cage pour l&#39;encourager à manger. Les souris seront logés par une cage pendant la période de reperfusion. </li></ol> 4. Chirurgie Sham <ol><li> souris soumises à la même procédure sans l&#39;insertion de monofilament. </li></ol> Scores neurologiques 5. post-opératoires (tableau 1; Figure 2) <ol><li> évaluer Neurologiquement souris après la période de reperfusion appropriée à l&#39;aide d&#39;un système de notation de 18 points l&#39;évaluation du général; Moteur; Sensoriel; Proprioception. Un score neurologique plus élevé correspond à une diminution de la fonction neurologique. NOTE: Les souris qui sont jugées insensibles et incapables de marcher seront euthanasiés. D&#39;autres critères d&#39;euthanasie comprendront une perte de poids supérieure à 20%, di respiratoirele stress et l&#39;infection autour de la zone chirurgicale. Une chambre de CO 2 sera utilisé pour l&#39; euthanasie et la méthode physique pour confirmer la mort sera dislocation cervicale ou thoracotomie. </li></ol> 6. Mesure de l&#39;infarctus cérébral Volume (Figure 3) <ol><li> Provoquer l&#39;anesthésie en utilisant une combinaison de kétamine (150 mg / kg) et de xylazine (10 mg / kg) injecté ip moniteur profondeur de l&#39;anesthésie à pied pincée d&#39;abord tous les 3 - 5 min et toutes les 10 minutes lorsque l&#39;anesthésie est atteint. </li><li> Placez la souris dans une position couchée et couper la peau de l&#39;abdomen au cou suivie par le péritoine en utilisant l&#39;iris ciseaux droits. </li><li> Soulevez le sternum en utilisant une pince Dumont et couper les côtes pour exposer le cœur. </li><li> Ouvrez la gauche et le côté droit de la poitrine à l&#39;aide de deux paires de pinces hémostatiques, exposer le cœur. </li><li> Insérez une aiguille 26 G attachée à une seringue de 5 ml dans le ventricule gauche et couper l&#39;oreillette droite. Perfuser à température ambiante une solution saline normale ou phosphate saline tamponnée (PBS) jusqu&#39;à ce que le liquide devient clair (habituellement de 3 - 5 min). </li><li> Retirez le crâne soigneusement loin du cerveau en utilisant l&#39;iris ciseaux droits et pince Dumont. </li><li> Couper les bulbes olfactifs et le cervelet en utilisant une lame de rasoir de sorte que le cerveau va tenir dans la matrice. Utilisez cette matrice pour découper le cerveau en même segments. Réfrigérer la matrice avant de l&#39;utiliser pour garder le tissu frais. Placez le cerveau dans la matrice et le mettre sur la glace. </li><li> Trancher le cerveau en 2 mm segments coronales en utilisant deux lames de rasoir. Faire la première coupe à l&#39;aide d&#39;une lame de rasoir à partir de 2 mm de haut et de laisser cette lame de rasoir en place. Faire encore 2 mm coupé derrière la première. Retirer la première lame de rasoir avec le tissu attaché. Répétez ce processus jusqu&#39;à ce que tous les tissus a été tranché. NOTE: Il devrait y avoir 4 - 5 segments lorsque vous avez terminé. </li><li> Placez les segments en plaque de 24 puits contenant du chlorure de 2% 2,3,5-triphenyltetrazalium (TTC), qui est ensuite placé dans un bain d&#39;eau peu profonde at 37 ° C pendant 20 min. Placer chaque segment dans un puits individuel contribue à les maintenir dans l&#39;ordre dans lequel ils ont été coupés. Assurez-vous que la solution TTC recouvre complètement les segments de tissu. Au bout de 10 min tourner toutes les tranches sur. </li><li> Placer une petite quantité de formol à 10% dans les puits d&#39;une nouvelle plaque de 24 puits et transférer les segments de cette plaque, dans l&#39;ordre dans lequel elles ont été coupées. </li><li> Numériser les segments dans l&#39;ordinateur et analyser la taille de l&#39; infarctus en pourcentage de toute la tranche de cerveau 6 en utilisant un logiciel d&#39;analyse ImageJ (NIH Image 1.57 Software) 6. <ol><li> Décrire la zone infarcie pour générer une mesure de surface. mesurer ensuite l&#39;ensemble de l&#39;hémisphère controlatéral pour déterminer la zone. Diviser la zone de l&#39;infarctus par la surface de l&#39;hémisphère controlatéral et multiplier par 100 pour déterminer le volume de l&#39;infarctus. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Go, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+disease+and+stroke+statistics-2014+update%3A+a+report+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart disease and stroke statistics-2014 update: a report from the American Heart Association.</a> Circulation. 129 (3), e28-e292 (2014).</li>
<li>Marks, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patients+with+acute+stroke+trated+with+intravenous+tPS+3-6+hours+after+stroke+onset%3A+correlations+between+MR+angiography+findings+and+perfusion-+and+diffusion-weighted+imaging+in+the+DEFUSE+study%5BTitle%5D)+AND+%22Radiology%22%5BJournal%5D)">Patients with acute stroke trated with intravenous tPS 3-6 hours after stroke onset: correlations between MR angiography findings and perfusion- and diffusion-weighted imaging in the DEFUSE study.</a> Radiology. 249 (2), 614-623 (2008).</li>
<li>Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversible+middle+cerebral+artery+occlusion+without+craniectomy+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats.</a> Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).</li>
<li>Koizumi, J., Yoshida, Y., Nakazawa, T., Ooneda, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+studies+of+ischemic+brain+edema%2C+I%3A+a+new+experimnetal+model+of+cerebral+embolism+in+rats+in+which+recirculation+can+be+introduced+in+the+ischemic+area%5BTitle%5D)+AND+%22Jpn+J+Stroke%22%5BJournal%5D)">Experimental studies of ischemic brain edema, I: a new experimnetal model of cerebral embolism in rats in which recirculation can be introduced in the ischemic area.</a> Jpn J Stroke. (8), 1-8 (1986).</li>
<li>Smith, H. K., Russell, J. M., Granger, D. N., Gavins, F. N. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Critical+differences+between+two+classical+surgical+approaches+for+middle+cerebral+artery+occlusion-induced+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Meth%22%5BJournal%5D)">Critical differences between two classical surgical approaches for middle cerebral artery occlusion-induced stroke in mice.</a> J Neurosci Meth. 249, 99-105 (2015).</li>
<li>Gavins, F. N., Dalli, J., Flower, R. J., Granger, D. N., Perretti, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activation+of+the+annexin+1+counter-regulatory+circuit+affords+protection+in+the+mouse+brain+microcirculation%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+J%22%5BJournal%5D)">Activation of the annexin 1 counter-regulatory circuit affords protection in the mouse brain microcirculation.</a> FASEB J. 21 (8), 1751-1758 (2007).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atorvastain+induction+of+VEGF+and+BDNF+promotes+brain+plasticity+after+stroke+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Atorvastain induction of VEGF and BDNF promotes brain plasticity after stroke in mice.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 25 (2), 281-290 (2005).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intrastriatal+transplantation+of+bone+marrow+nonhematopoietic+cells+improves+functional+recovery+after+stroke+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Intrastriatal transplantation of bone marrow nonhematopoietic cells improves functional recovery after stroke in adult mice.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 20 (9), 1311-1319 (2000).</li>
<li>Liesz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+spectrum+of+systemic+immune+alterations+after+murine+focal+ischemia%3B+the+immunodepression+versus+immunomodulation%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">The spectrum of systemic immune alterations after murine focal ischemia; the immunodepression versus immunomodulation.</a> Stroke. 40 (8), 2849-2858 (2009).</li>
<li>Beckmann, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+resolution+magnetic+resonance+angiography+non-invasively+reveals+mouse+strain+differences+in+the+cerebrovascular+anatomy+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med%22%5BJournal%5D)">High resolution magnetic resonance angiography non-invasively reveals mouse strain differences in the cerebrovascular anatomy in vivo.</a> Magn Reson Med. 44 (2), 252-258 (2000).</li>
<li>Barone, F. C., Knudsen, D. J., Nelson, A. H., Feuerstein, G. Z., Willette, R. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+strain+differences+in+susceptibility+to+cerebral+ischemia+are+related+to+cerebral+vascular+anatomy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Mouse strain differences in susceptibility to cerebral ischemia are related to cerebral vascular anatomy.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 13 (4), 683-692 (1993).</li>
<li>Burk, J., Burggraf, D., Vosko, M., Dichgans, M., Hamann, G. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protection+of+cerebral+microvasculature+after+moderate+hypothermia+following+experimental+focal+cerebral+ischemia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Protection of cerebral microvasculature after moderate hypothermia following experimental focal cerebral ischemia in mice.</a> Brain Res. (1226), 248-255 (2008).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthemia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthemia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neurosci Lett. 349 (2), 130-132 (2003).</li>
<li>Shin, H. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mild+induced+hypertension+improves+blood+flow+and+oxygen+metabolism+in+transient+focal+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Mild induced hypertension improves blood flow and oxygen metabolism in transient focal cerebral ischemia.</a> Stroke. 39 (5), 1548-1555 (2008).</li>
<li>Richter, S. H., Garner, J. P., Würbel, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Environmental+standardization%3A+cure+or+cause+of+poor+reproducibility+in+animal+experiments%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Methods%22%5BJournal%5D)">Environmental standardization: cure or cause of poor reproducibility in animal experiments?</a> Nat Methods. 6 (4), 257-261 (2009).</li>
<li>Holloway, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Both+MC1+and+MC3+receptors+provide+protection+from+cerebral+ischemia-reperfusion-induced+neutrophil+recruitment%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Both MC1 and MC3 receptors provide protection from cerebral ischemia-reperfusion-induced neutrophil recruitment.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 35, (2015).</li>
<li>Vandeputte, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+inflammatory+response+in+a+photothrombotic+stroke+model+by+MRI%3A+implications+for+stem+cell+transplantation%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Imaging+Biol%22%5BJournal%5D)">Characterization of the inflammatory response in a photothrombotic stroke model by MRI: implications for stem cell transplantation.</a> Mol Imaging Biol. 13 (4), 663-671 (2010).</li>
<li>Iwae, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glial+cell-mediated+deterioration+and+repair+of+the+nervous+system+after+traumatic+brain+injury+in+a+rat+model+as+assessed+by+positron+emission+tomography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Glial cell-mediated deterioration and repair of the nervous system after traumatic brain injury in a rat model as assessed by positron emission tomography.</a> J Neurotrauma. 27 (8), 1463-1475 (2010).</li>
<li>Morris, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developments+of+a+water-maze+procedure+for+studying+spatial+learning+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Developments of a water-maze procedure for studying spatial learning in the rat.</a> J Neurosci Methods. 11 (1), 47-60 (1984).</li>
<li>Mouzon, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repetitive+mild+traumatic+brain+injury+in+a+mouse+model+produces+learning+and+memory+deficits+accompanied+by+histological+changes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Repetitive mild traumatic brain injury in a mouse model produces learning and memory deficits accompanied by histological changes.</a> J Neurotrauma. 29 (18), 2761-2773 (2012).</li>
<li>Fleming, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+and+progressive+sensorimotor+anomalies+in+mice+overexpressing+wild-type+human+%CE%B1-synuclein%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Early and progressive sensorimotor anomalies in mice overexpressing wild-type human α-synuclein.</a> J Neurosci. 24 (42), 9434-9440 (2004).</li>
<li>Sedelis, M., Schwarting, R. K. W., Huston, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+phenotyping+of+the+MPTP+mouse+model+of+Parkinson%27s+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Behavioral phenotyping of the MPTP mouse model of Parkinson's disease.</a> Behav Brain Res. 125 (1-2), 109-125 (2001).</li>
<li>Toon, L., Silva, M., D'Hooge, R., Aerts, J. M., Berckmans, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+gait+analysis+in+the+open-field+test+for+laboratory+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Res+Methods%22%5BJournal%5D)">Automated gait analysis in the open-field test for laboratory mice.</a> Behav Res Methods. 41 (1), 148-153 (2009).</li>
<li>Lubjuhn, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+testing+in+a+mouse+stroke+model+induced+by+occlusion+of+the+distal+middle+cerebral+artery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Functional testing in a mouse stroke model induced by occlusion of the distal middle cerebral artery.</a> J Neurosci Methods. 184 (1), 95-103 (2009).</li>
<li>Bouët, V., Freret, T., Toutain, J., Divoux, D., Boulouard, M., Schumann-Bard, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensorimotor+and+cognitive+deficits+after+transient+middle+cerebral+artery+occlusion+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Neurol%22%5BJournal%5D)">Sensorimotor and cognitive deficits after transient middle cerebral artery occlusion in the mouse.</a> Exp Neurol. 203 (2), 555-567 (2007).</li>
<li>Freret, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+deficits+after+distal+focal+cerebral+ischemia+in+mice%3A+usefulness+of+adhesive+removal+test%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Behavioral deficits after distal focal cerebral ischemia in mice: usefulness of adhesive removal test.</a> Behav Neurosci. 123 (1), 224-230 (2009).</li>
<li>Zhan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficient+neuron-microglia+signaling+results+in+impaired+functional+brain+connectivity+and+social+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Deficient neuron-microglia signaling results in impaired functional brain connectivity and social behavior.</a> Nature Neurosci. 17, 400-406 (2013).</li>
<li>Balkaya, M., Kröber, J. M., Rex, A., Endres, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessing+post-stroke+behavior+in+mouse+models+of+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow%22%5BJournal%5D)">Assessing post-stroke behavior in mouse models of focal ischemia.</a> J Cereb Blood Flow. 33, 330-338 (2012).</li>
<li>Wiessner, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-nogo-a+antibody+infusion+24+hours+after+experimental+stroke+imporved+behavioral+outcome+and+corticospinal+plasticity+in+normotensive+and+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Anti-nogo-a antibody infusion 24 hours after experimental stroke imporved behavioral outcome and corticospinal plasticity in normotensive and spontaneously hypertensive rats.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 23, 154-165 (2003).</li>
<li>Schaar, K. L., Brenneman, M. M., Savitz, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+assessments+in+the+rodent+stroke+model%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Transl+Stroke+Med%22%5BJournal%5D)">Functional assessments in the rodent stroke model.</a> Exp Transl Stroke Med. 2 (13), (2010).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Depuis sa conception il y a 20 ans, le modèle MCAo pour la course humaine impliquant l&#39;insertion d&#39;un filament a été utilisé dans un grand nombre d&#39;études. Ceci est principalement dû au fait qu&#39;il imite ce qui se passe sur le plan clinique dans la forme la plus courante d&#39;AVC (ie, accident vasculaire cérébral ischémique). Le striatum est plus sensible à l&#39;ischémie que le cortex cérébral, et en tant que telle, la durée de la période d&#39;ischémie se traduira à la fois si le striatum et l...

L&#39;AVC est la cinquième cause de décès dans le monde, avec une personne mourir de la maladie toutes les 4 minutes. Plus de 800.000 Américains souffrent d&#39;un AVC chaque année, ce qui est non seulement dévastateur pour le patient, mais aussi pour leurs familles. L&#39; AVC est la principale cause de handicap chez les adultes et les dépenses annuelles est estimée à l&#39;ordre de 36,5 milliards de $ 1 en dépit de très peu d&#39; options de traitement soient disponibles. activateur tissulaire du plasminogène (tPA) est le seul Food and Drug Administration (FDA) autorisé médicament pour accident vasculaire cérébral ischémique. Cependant, il est seulement efficace si administré à des patients dans les 3-6 heures à partir du début de la course, et dans ces cas , il ne profite qu&#39;à 4% des patients 2. Par conséquent, il est impératif que les modèles animaux reproductibles, cliniquement pertinentes de course sont utilisés pour aider à l&#39;élaboration de stratégies et de traitements thérapeutiques potentiels pour cette maladie. Il est important de noter que , in vitro , </em&gt; modèles, si elle est utile dans la modélisation de certains aspects du dysfonctionnement cérébral, ne sont pas capables de récapituler les interactions physiologiques complexes qui se produisent dans le cerveau et la périphérie après un AVC. Par conséquent, les modèles in vivo sont essentiels. Le type le plus commun de l&#39;AVC est d&#39;origine ischémique, qui représente 87% des accidents vasculaires cérébraux totaux. D&#39;autres traits sont une hémorragie intracérébrale (9%) et d&#39;hémorragie sous-arachnoïdienne (4%) et sont dues le plus souvent par un emboles à l&#39;artère cérébrale moyenne (MCA). Cela est dû à la courbe saillant à la racine du MCA, ce qui provoque le flux sanguin laminaire pénétrer dans le cerveau pour devenir perturbé. Le MCA naît de l&#39;artère carotide interne (ICA) et les routes le long du sillon latéral, où elle se ramifie et des projets à des noyaux gris centraux et les surfaces latérales du frontal, pariétal et le lobe temporal, y compris le moteur primaire et le cortex sensoriel. Le Cercle de Willis est créé par les artères cérébrales postérieures étantrelié aux artères cérébrales et les postérieures artères communicantes. Le filament ou suture modèle intraluminal de MCAo est l&#39;un des plus largement utilisé dans la recherche sur l&#39;AVC. Cependant, il y a un couple de différentes variantes de ce modèle, et ceux - ci sont basés sur si le microfilaments est inséré dans l&#39;artère carotide externe (ECA, appelée la méthode Longa) 3, ou si elle est insérée dans l&#39;ICA (dite Koizumi méthode) 4. Dans la méthode de Koizumi, l&#39;artère carotide commune (CCA) du côté de la chirurgie doit être liée de façon permanente si le filament est retiré pour prévenir les saignements de l&#39;incision dans le CCA, alors que dans la méthode de Longa est la CEA qui doit être attaché de façon permanente 5 . Voici la méthode Longa sera utilisée comme nous estimons que c&#39;est un bien supérieur et un modèle plus cliniquement pertinente chirurgicale d&#39;accident vasculaire cérébral ischémique. En outre, l&#39;utilisation d&#39;un mono-filament de silicium à bout, en particulier avec le procédé Longa, produit trèsMCAo reproductible , contrairement aux monofilaments de flamme émoussé, qui produisent souvent une occlusion incomplète et / ou une hémorragie méningée 6. Le procédé de filament intraluminal peut être utilisé comme modèle de 4,6 occlusion permanente ou transitoire. Pour effectuer le modèle transitoire, le filament est retiré après une période d&#39;ischémie (par exemple, 30 min, 60 min, 2 h), et la reperfusion est autorisé à se produire. Ce modèle, dans une certaine mesure, simule le rétablissement du débit sanguin après une intervention spontanée ou thérapeutique (par exemple, l&#39; administration tPA) pour lyser un caillot de thromboemboliques chez l&#39; homme. Pour le modèle permanent, le filament est tout simplement laissé en place pendant une période de temps (par exemple, 24 heures), donc pas de reperfusion se produit. Un autre avantage du procédé de filament intraluminale est le fait qu&#39;un craniotomie n&#39;a pas besoin d&#39;être effectuée, ce qui permet le crâne d&#39;être laissé intact et d&#39;éviter toute modification de la pression et de la température intra-crânienne. <p class = &quot;jove_content&quot;&gt; Dans cette vidéo, nous démontrons comment effectuer la méthode de filament intraluminal Longa pour induire MCAo et reperfusion. Nous montrons aussi comment effectuer le score neurologique de 18 points et de déterminer le volume de l&#39;infarctus en utilisant du chlorure de 2,3,5-triphenyltetrazalium (TTC) coloration.

<table><tbody><tr><td>Souris mâles C57BL/6</td><td>Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME</td><td>#000664</td><td></td></tr><tr><td>Chlorhydrate de kétamine</td><td>Morris & Dickson, Shreveport, LA</td><td>67457-108-10</td><td></td></tr><tr><td>Xylazine</td><td>Akorn, Inc, Lake Forest, IL</td><td>NADA# 139-236</td><td></td></tr><tr><td>Système de contrôle de la température DC</td><td>FHC, Bowdoin, ME</td><td>40-90-8D</td><td></td></tr><tr><td>Mini sonde à thermistance rectale</td><td>FHC, Bowdoin, ME</td><td>40-80-5D-02</td><td></td></tr><tr><td>Coussin chauffant</td><td>FHC, Bowdoin, ME</td><td>40-90-2-06</td><td></td></tr><tr><td>Clippers</td><td>Amazon, Bellevue, WA</td><td>#64800</td><td></td></tr><tr><td>70 % d’éthanol</td><td>Worldwide Medical Products, Bristol, PA</td><td>#51011023</td><td></td></tr><tr><td>Microscope de dissection</td><td>Olympus, Center Valley, PA</td><td>SZ40</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à iris (droits)</td><td>Fine Science Tools, Foster City, CA</td><td>11251-20</td><td></td></tr><tr><td>Pinces Dumont (pointe pliée de 45&deg)</td><td>Fine Science Tools, Foster City, CA</td><td>11297-00</td><td></td></tr><tr><td>Clip pour micro-récipient</td><td>Fine Science Tools, Foster City, CA</td><td>18055-05</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux à ressort de micro-dissection (droits)</td><td>Fine Science Tools, Foster City, CA</td><td>14088-10</td><td></td></tr><tr><td>Écarteurs (émoussés)</td><td>Fine Science Tools, Foster City, CA</td><td>18200-11 (Helen used 17022-13)</td><td></td></tr><tr><td>Applicateurs à pointe de coton</td><td>Fisher Scientific, Waltham, MA</td><td>23-400-100</td><td></td></tr><tr><td>Éponges de gaze</td><td>Covidien, Mansfield, MA</td><td>#9023</td><td></td></tr><tr><td>7-0 suture chirurgicale tressée en soie</td><td>Braintree Scientific, Braintree, MA</td><td>SUT-S103</td><td></td></tr><tr><td>0,9 % chlorure de sodium</td><td>Morris & Dickson, Lake Forest, IL</td><td>0409-4888-20</td><td></td></tr><tr><td>Suture MCAO moyenne 6-0 (monofilament enduit de caoutchouc de silicium)</td><td>Doccol Corporation, Sharon, MA</td><td>6023PKRe</td><td></td></tr><tr><td>Sofsilk 6-0 soie tressée enduite de silicone</td><td>Covidien, Mansfield, MA</td><td>SUT-14-1</td><td></td></tr><tr><td>Carprofen</td><td>Pfizer, New York, NY</td><td>NADA# 141-199</td><td></td></tr><tr><td>Puralube</td><td>Dechra, Norwich, Royaume-Uni</td><td>NDC 17033-211-38</td><td></td></tr><tr><td>Régulateur de température Physitemp</td><td>Appareil Harvard, Holliston, MA</td><td>TCAT-2AC</td><td></td></tr><tr><td>Lampe chauffante</td><td>Appareil Harvard, Holliston, MA</td><td>HL-1</td><td></td></tr><tr><td>Sonde laser Doppler</td><td>AD Instruments, Colorado Springs, CO</td><td>MSP100XP</td><td></td></tr><tr><td>Plaques à 24 puits</td><td>Fisher Scientific, Waltham, MA</td><td>#353226</td><td></td></tr><tr><td>Tamponné au phosphate saline (PBS)</td><td>Life Technologies, Carlsbad, CA</td><td>20012-050</td><td></td></tr><tr><td>Lames de rasoir à simple tranchant</td><td>Fisher Scientific, Waltham, MA</td><td>12-640</td><td></td></tr><tr><td>Chlorure de 2,3,5-triphényltétrazalium (TTC)</td><td>Sigma Aldrich, St. Louis, MO</td><td>T8877-50G</td><td></td></tr><tr><td>Trancheuse de matrice cérébrale de souris</td><td>Braintree Scientific, Braintree, MA</td><td>BS-A 5000C</td><td></td></tr><tr><td>Bain d’eau</td><td>VWR, Radnor, PA</td><td>#182</td><td></td></tr><tr><td>10 % formol</td><td>Sigma Aldrich, St. Louis, MO</td><td>HT501128-4L</td><td></td></tr><tr><td>Logiciel d’analyse ImageJ</td><td>NIH, Bethesda, MD</td><td>téléchargement</td><td></td>gratuit</tr><tr><td>Retractor</td><td>Medical Device Purchase, Newcastle, CA</td><td>MP-740</td><td></td></tr></tbody></table>

approche chirurgicale pour occlusion de l&#39;artère cérébrale moyenne et reperfusion induite par des maladies chez les souris

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

L&#39;AVC est une cause majeure de décès dans le monde et continue d&#39;être l&#39;une des principales causes des handicaps adultes à long terme. Environ 87% des AVC sont d&#39;origine ischémique et se produisent sur le territoire de l&#39;artère cérébrale moyenne (MCA). Actuellement, le seul médicament Food and Drug Administration (FDA) a approuvé pour le traitement de cette maladie dévastatrice est l&#39;activateur tissulaire du plasminogène (tPA). Cependant, le tPA a une petite fenêtre thérapeutique pour l&#39;administration (3-6 h), et est seulement efficace dans 4% des patients qui ont effectivement le reçoivent. La recherche actuelle se concentre sur la compréhension de la physiopathologie de la course afin de trouver des cibles thérapeutiques potentielles. Ainsi, des modèles fiables sont cruciaux, et le modèle (MCAo) MCA d&#39;occlusion (également appelés le filament ou suture modèle intraluminal) est réputé être le modèle le plus cliniquement pertinente chirurgicale d&#39;accident vasculaire cérébral ischémique, et est assez non invasive et facilement reproductible. En général, le modèle MCAo est utilisé avec des rongeurs, en particulier avec des souris duesà toutes les variations génétiques disponibles pour cette espèce. Nous décrivons ici (et présent dans la vidéo) comment effectuer avec succès le modèle MCAo (avec reperfusion) chez la souris pour générer des données fiables et reproductibles.

Souris ont été soumises à 30 minutes d&#39; ischémie cérébrale induite par MCAo (figure 1) , suivie d&#39;une période de reperfusion (24 h et 1 semaine sont présentées ici, mais la durée de la reperfusion peut être modifié). La mortalité a été minimale au cours de MCAo (environ 2%). ischémie Post, le taux de mortalité (moins les 24 premières heures) était d&#39;environ 26%. Laser Doppler a été utilisé pour con...

Afin de comprendre la physiopathologie de la course, il est important d&#39;utiliser des modèles fiables. Ce document décrira l&#39;un des modèles de course les plus fréquemment utilisés chez la souris, appelé le modèle milieu occlusion de l&#39;artère cérébrale (MCAo) (également appelé le filament intraluminal ou d&#39;un modèle de suture) avec reperfusion.

Approche chirurgicale pour Occlusion de l&#39;artère cérébrale moyenne et reperfusion induite par des maladies chez les souris

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

L'objectif général de la méthode de Longa est de reproduire une ischémie au niveau de l'artère cérébrale moyenne, ou ACM, car les accidents vasculaires cérébraux ischémiques chez l'humain surviennent le plus souvent en raison de l'occlusion de l'ACM. Cette méthode peut nous aider à répondre à des questions clés dans le domaine des accidents vasculaires cérébraux, telles que la manière de trouver une cible thérapeutique appropriée pour le traitement de cette maladie. Le principal avantage de la méthode de Longa par rapport à d'autres techniques réside dans le taux de survie.On observe également une augmentation des interactions entre les leucocytes et les cellules endothéliales ainsi qu'un accroissement du volume d'infarctus avec cette technique. Cette procédure sera démontrée par Shantel Vital, la responsable de mon laboratoire. Après avoir induit l'anesthésie chez une souris mâle C57 black six conformément au protocole décrit, surveillez la profondeur de l'anesthésie à l'aide d'une pincée plantaire et appliquez un onguent ophtalmique stérile pour prévenir le dessèchement.Ensuite, raser le cou de l'animal. Placer la souris en position supine sur un tapis régulé en température et insérer une sonde rectale pour surveiller et maintenir une température corporelle de 36,5 plus ou moins 0,1 degré Celsius. Puis, utiliser de l'alcool à 70 % pour désinfecter la peau.Ensuite, à l’aide de ciseaux droits Iris, réalisez une incision médiane et rétractez les tissus mous afin d’exposer les vaisseaux. À l’aide de pinces de Dumont, disséquez l’artère carotide commune, ou CCA, et l’artère carotide externe, ou ECA, en les séparant du tissu environnant sans endommager le nerf vague. À l’aide de soie 7-0, faites une suture temporaire en nouant un point lâche autour de la CCA.Ensuite, placez une suture permanente autour de l'artère carotide externe (ECA) et des vaisseaux plus petits qui en partent, en ligaturant étroitement les vaisseaux. Maintenant, faites une suture autour de l'ECA au niveau proximal de la bifurcation de l'artère carotide commune (CCA). Puis, placez une pince microchirurgicale autour de l'artère carotide interne (ICA) et de l'artère ptérygopalatine (PPA).À l’aide de ciseaux à ressort de microdissection, pratiquer une petite incision dans l’artère carotide externe aussi près que possible du point de suture permanent et insérer un monofilament de 180 micromètres muni d’une extrémité en silicone. Une fois le fil inséré, serrer la suture temporaire autour de l’artère carotide externe puis retirer la pince pour microvaisseaux. Utiliser les ciseaux à ressort de microdissection pour couper l’artère carotide externe entre la suture distale permanente et le point d’entrée du fil.Introduire le filament à travers l'artère carotide interne jusqu'à ce qu'une résistance soit ressentie au niveau de l'artère cérébrale moyenne. Se référer aux détails supplémentaires dans le protocole écrit. Après une période d'occlusion de 30 minutes, retirer le filament en utilisant une pince de Dumont pour le tirer doucement vers l'arrière, puis fixer le fil autour de l'extrémité ouverte de l'artère carotide externe.Retirer le point de suture temporaire autour de l'artère carotide commune en desserrant délicatement le ligature afin de permettre la reprise du flux sanguin à travers l'artère carotide commune. Retirer les rétracteurs, puis utiliser un point de suture chirurgical continu pour fermer l'incision. Injecter à la souris un millilitre de sérum physiologique par voie sous-cutanée pour le remplacement du volume liquidien, ainsi que le carprofène comme analgésique pour soulager la douleur et les inconforts liés à l'intervention chirurgicale.Observer la souris pendant toute la période de récupération de l'anesthésie dans une cage dédiée chauffée à 30 degrés Celsius et placer de la nourriture broyée dans une boîte de Pétri sur le sol de la cage afin d'encourager l'alimentation. Évaluer neurologiquement les souris après la période de réperfusion appropriée à l'aide d'un système de notation sur 18 points, en évaluant les scores généraux, moteurs, sensoriels et de proprioception. Un score neurologique plus élevé correspond à une fonction neurologique diminuée.Pour mesurer le volume d'infarctus cérébral, après avoir induit l'anesthésie et surveillé la profondeur selon le protocole décrit dans le texte, placez la souris en position supine et utilisez des ciseaux droits Iris pour inciser la peau de l'abdomen jusqu'au cou, puis sectionnez le péritoine. À l'aide de pinces de Dumont, soulevez le sternum et coupez les côtes. Ensuite, utilisez deux paires de pinces hémostatiques pour ouvrir les côtés gauche et droit de la poitrine, exposant ainsi le cœur.Insérez une aiguille de calibre 26 fixée à une seringue de cinq millimètres dans le ventricule gauche et coupez l'oreillette droite. Ensuite, perfusez le cœur avec une solution saline normale à température ambiante ou du PBS jusqu'à ce que le liquide devienne clair. À l'aide de ciseaux droits Iris et de pinces, retirez la tête de l'animal et extrayez soigneusement le cerveau du crâne.Ensuite, utilisez une lame de rasoir pour découper le bulbe olfactif et le cervelet afin que le cerveau puisse entrer dans la matrice. Après avoir refroidi la matrice, placez-y le cerveau et mettez-le sur de la glace. Puis, à l’aide d’une lame de rasoir, effectuez une première coupe dans le cerveau à deux millimètres du sommet et laissez la lame en place.Avec une deuxième lame de rasoir, effectuez une autre incision de deux millimètres derrière la première. Ensuite, retirez la première lame de rasoir avec le tissu attaché. Répétez ce processus jusqu'à ce que tout le tissu soit tranché.Placer chaque segment dans l'ordre où ils ont été coupés dans un puits d'une plaque 24 puits contenant du chlorure de 2,3,5-triphényl-tétrazolium (TTC) à 2 %, puis placer la plaque dans un bain-marie peu profond à 37 degrés Celsius pendant 20 minutes. Après une incubation de 10 minutes, retourner les tranches. Ensuite, ajouter une petite quantité de formol à 10 % dans les puits d'une nouvelle plaque 24 puits et transférer les segments dans les puits contenant le formol, en respectant l'ordre dans lequel ils ont été coupés.Après avoir numérisé les segments dans l'ordinateur, utilisez le logiciel d'analyse ImageJ pour analyser la taille de l'infarctus en pourcentage de la coupe cérébrale entière en délimitant la zone infarctusée afin d'obtenir une mesure de surface. Ensuite, mesurez l'hémisphère controlatéral dans son intégralité pour déterminer la surface. Enfin, divisez la surface de l'infarctus par celle de l'hémisphère controlatéral et multipliez par 100 pour déterminer le volume de l'infarctus.Comme illustré ici, la flumétrie laser Doppler a été utilisée pour confirmer la perfusion du flux sanguin dans le territoire de l'artère cérébrale moyenne (ACM) avant et après la reperfusion de l'ACM. Lorsque le ligature temporaire de l'artère carotide commune est relâchée après 30 minutes d'ischémie, permettant le retrait du filament et la reperfusion, il se produit une augmentation soudaine de la perfusion, atteignant légèrement moins de 100 % de la perfusion de base cinq minutes après le début de la reperfusion. Les scores neurologiques énumérés dans ce tableau concernent l'évaluation des déficits généraux, sensoriels, moteurs et proprioceptifs.Ce graphique illustre que le score pour 27 souris à 24 heures était de 12,56 ± 0,7 et est resté élevé une semaine plus tard à 11,50 ± 1,5. Un score neurologique plus élevé représente une fonction neurologique diminuée. Les volumes d'infarctus présentaient des profils similaires à ceux du score neurologique à 24 heures.Comme indiqué ici, 24 heures après l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne (MCAo), les souris présentaient de grands volumes d'infarctus qui étaient amplifiés une semaine après l'accident vasculaire cérébral. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en moins de 15 minutes si elle est effectuée correctement. Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de maintenir la température à 36,5 degrés Celsius.Après cette procédure, d'autres méthodes peuvent également être réalisées, comme la ligature et la perforation du caecum. Cela nous permet de répondre à des questions supplémentaires, telles que les effets de la septicémie avant et après un accident vasculaire cérébral. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment induire une ischémie en insérant un monofilament dans l'artère cérébrale moyenne, puis en le retirant pour permettre la reperfusion.N'oubliez pas que le travail avec des instruments tels que les ciseaux Iris et les pinces peut être dangereux et que des précautions doivent toujours être prises.

surgical-approach-for-middle-cerebral-artery-occlusion-reperfusion

Research

Recherche

JoVE Journal

Medicine

Médecine

L'occlusion filamenteux de l'artère cérébrale moyenne est un modèle commun pour l'étude de l'AVC ischémique chez la souris.

Course de modélisation chez la souris - Moyen-occlusion artérielle cérébrale avec le modèle filamentaire

Nous démontrons dans la vidéo un procédé pour produire une occlusion de l'artère cérébrale moyenne chez des souris adultes en utilisant un monofilament intraluminale. Nous montrons aussi comment évaluer l'étendue de l'infarctus cérébral par le chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium (TTC) coloration.

Modèle murin d&#39;occlusion artère cérébrale moyenne

Nous décrivons un modèle murin d’AVC induit par l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne à l’aide d’une suture recouverte de silicone. Le protocole peut être appliqué pour induire une occlusion permanente ou une ischémie temporaire, suivie d’une reperfusion.

Induction de l&#39;AVC ischémique et ischémie-reperfusion chez la souris Utilisation de l&#39;artère moyenne Occlusion Technique et visualisation des Infarctus Zone

Intraluminale filament une occlusion de l’artère cérébrale moyenne est le modèle le plus souvent utilisé en vivo d’accidents cérébrovasculaires chez les rongeurs. Une autre approche chirurgicale pour permettre la réparation de l’artère carotide commune est effectuée ici, qui permet à la reperfusion de l’artère carotide commune et une reperfusion intégrale sur le territoire de l’artère cérébrale moyenne.

Occlusion de l’artère cérébrale moyenne permettant une Reperfusion par l’intermédiaire de réparation de l’artère carotide commune chez les souris

Un modèle murin d’ischémie-reperfusion cérébrale est mis en place pour étudier la physiopathologie des accidents vasculaires cérébraux. Nous distalement ligaturer l’artère cérébrale moyenne droite et artère carotide commune droite et restaurer le flux sanguin après 10 ou 40 min d’ischémie.

Modèle de souris de deux vaisseaux Occlusion d’ischémie-reperfusion cérébrale

Le protocole vise à fournir des méthodes pour l’encéphalomyosynangiose - greffe d’un lambeau musculaire temporalis vasculaire sur la surface piale du tissu cérébral ischémique - pour le traitement de l’AVC ischémique aigu non-moyamoya. L’efficacité de l’approche dans l’augmentation de l’angiogenèse est évaluée à l’aide d’un modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne chez la souris.

Un modèle pour le traitement de l’encéphalomyosynangiose après un accident vasculaire cérébral induit par l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne chez la souris

Ce protocole démontre un modèle unique d’AVC chez la souris avec un infarctus de taille moyenne et un excellent taux de survie. Ce modèle permet aux chercheurs en AVC préclinique de prolonger la durée de l’ischémie, d’utiliser des souris âgées et d’évaluer les résultats fonctionnels à long terme.

Un modèle modifié d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne transcrânienne pour étudier les résultats de l’AVC chez des souris âgées

Ce protocole décrit le modèle d’ischémie cérébrale focale transitoire chez la souris par occlusion intraluminale de l’artère cérébrale moyenne. De plus, des exemples d’évaluation des résultats sont présentés à l’aide de l’imagerie par résonance magnétique et de tests comportementaux.

Modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne de l’AVC

Ici, nous présentons un protocole pour établir un modèle distal d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (dMCAO) par électrocoagulation transcrânienne chez les souris C57BL/6J et évaluons le comportement neurologique et les caractéristiques histopathologiques ultérieurs.

Induction de l’AVC ischémique aigu chez la souris à l’aide de la technique d’occlusion de l’artère moyenne distale

Ce protocole décrit le processus de préparation à la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide commune.

Préparation d’un modèle modifié pour la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne

Apprenez la méthode de Longa pour l'occlusion de l'artère cérébrale moyenne chez la souris, un modèle d'AVC fiable avec taux de survie élevé. Cette technique permet d'étudier l'ischémie et d'identifier des cibles thérapeutiques.

Approche chirurgicale pour Occlusion de l'artère cérébrale moyenne et reperfusion induite par des maladies chez les souris

Explorer plus de vidéos