Name: Novel Exploration de lobjet comme un test potentiel pour ordre supérieur Comportements répétitifs chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-08-20T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 28 s
Description: Découvrez un test comportemental pour identifier les comportements répétitifs d'ordre supérieur chez la souris sans entraînement préalable. Cette méthode valide les modèles murins pour l'étude des comportements autistiques.

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Les auteurs tiennent à remercier le Programme d&#39;été de premier cycle de recherche, le groupe d&#39;utilisateurs de la technologie académique, le Centre d&#39;apprentissage numérique, et le Centre des sciences de l&#39;Université de Redlands. Les auteurs souhaitent dédier cet article à la mémoire de Lou Yango.

Le protocole décrit ici a été approuvé par le Comité soin et l&#39;utilisation institutionnelle des animaux à l&#39;Université de Redlands. Les souris C58, C57 et FVB utilisées dans ces études ont été élevés à l&#39;Université de Redlands vivarium du stock initialement obtenu à partir du Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME). Sentinelles de ce vivarium ont été examinés tous les six mois et jugés exempts d&#39;agents pathogènes. 1. Matériel et Room Set Up Note: Nous avons utilisé deux arènes différentes pour les essais de nouvel objet: une cage rectangulaire en plastique transparent (45 cm x 24 cm x 20 cm) ou une cage circulaire opaque avec un diamètre de base de 41 cm; cependant, toute cage peut être utilisée. Pearson et al. , Utilise une cage rectangulaire plus petite (20 cm x 30 cm x 20 cm) dans leur analyse. Détails à partir de cette conception expérimentale spécifique sont inclus ci-dessous, mais étant donné la nouveauté de cet essai, il n&#39;y a pas de normes acceptées dans le domaine de phénotypage comportemental pour l&#39;une des variables décrites. <ol><li&gt; Remplir le terrain d&#39;essai à environ ½ po de la literie de maïs en épi. </li><li> Sélectionnez quatre nouveaux objets différents. Sélectionner quatre objets qui sont à peu près les mêmes dimensions, constitués de matière plastique de haute densité pour faciliter le nettoyage et à résister à la mastication et différentes les unes des autres en forme et en couleur. Surtout, assurez-vous que les souris de test ne sont pas exposés à ces objets avant d&#39;être exécuter dans le dosage. Remarque: Par exemple, une brique rose de jouet, un singe rouge, un carreau blanc avec l&#39;écriture bleue et une matrice blanche standard ont été utilisés ici. </li><li> Dans l&#39;arène rectangulaire, placer ces objets d&#39;environ 3 cm à partir des coins. Dans l&#39;arène ronde, placez les objets tels qu&#39;ils sont à égale distance les uns des autres et d&#39;environ 10 cm sur les côtés. Notez l&#39;emplacement de chaque objet comme un autre numéro, 1-4 (Figure 1). Veiller à ce que les objets sont placés dans un ordre aléatoire ou frontal tout au long des essais. </li><li> Placer une caméra directement au-dessus des essaisarène pour enregistrer toute l&#39;arène pendant les périodes d&#39;acclimatation et d&#39;essai. Note: Avoir les enquêteurs dans la même pièce avec les souris peuvent potentiellement influencer les niveaux et l&#39;exploration activité au cours des essais. </li></ol> 2. Objet Novel Exploration test <ol><li> Test au début du cycle de la lumière dans une pièce éclairée par un éclairage fluorescent à environ 100 lux. Assurez-vous que l&#39;éclairage est uniforme à travers l&#39;arène de test pour standardiser l&#39;apparence pendant l&#39;enregistrement vidéo. </li><li> Placer un notecard de dimensions connues dans le fond de l&#39;arène de test et commencer l&#39;enregistrement vidéo. </li><li> Transférer la souris de test dans un test arène vide pendant 10 min pour servir une période d&#39;acclimatation. Enregistrement vidéo de la période d&#39;acclimatation. </li><li> Après la période d&#39;acclimatation, laissez la souris dans l&#39;arène, ajouter rapidement les quatre nouveaux objets à l&#39;arène de test et d&#39;enregistrer le comportement de la souris pour un 10 minutes supplémentaires. </li><li> Une fois que la totalité des 20 minutes d&#39;acclimatation / pe de testriode écoulée, retournez la souris de test dans sa cage à la maison et bien nettoyer et sécher les objets nouveaux et arène de test avec plat savon non parfumé et de l&#39;eau. </li></ol> 3. Vidéo Scoring <ol><li> Remplissez tous les comportements notation en utilisant la vidéo pour faciliter la fiabilité. Remarque: Le logiciel d&#39;enregistrement du comportement Noldus L&#39;observateur a été utilisé pour effectuer les étapes 22 comme décrit ici, mais un programme spécialisé est pas nécessaire: <ol><li> Avant de marquer la première vidéo, mis en place le projet dans le système logiciel d&#39;enregistrement du comportement de codage en créant un nouveau projet ou en modifiant, un projet similaire existant. <ol><li> Dans la boîte de configuration du projet, définissez l&#39;acquisition de données à «Offline Observation. Dans la boîte de codage du comportement, le programme &quot;Scrabble&quot;, &quot;Creuser&quot;, &quot;Elevage&quot;, &quot;toilettage&quot; et &quot;Object Sniff 1, 2, 3 et 4» comme «Événements d&#39;État». Programme &quot;Jumping&quot; comme un &quot;Point Event &#39;. Note: Définitions pour ces comportements sont décrits en détail ailleurs 11. Note: Etat des événements ont un démarrage et d&#39;arrêt du temps, alors que Point Events recueillent tout simplement des données de comptage. Les touches pour chaque comportement discret sont générés par le logiciel et ces touches correspondantes sont programmées dans un clavier secondaire (étape 3.1.2). </li><li> Pour programmer le clavier secondaire, ouvrez le logiciel du clavier, cliquez sur le bouton approprié secondaire du clavier affiché à l&#39;écran, tapez la combinaison de touches appropriée, puis cliquez sur OK. Une fois que le clavier secondaire a été programmé, fermez le logiciel que le programme fonctionnera en arrière-plan de l&#39;ordinateur. </li></ol></li><li> Une fois le projet et a été mis en place, utilisez le logiciel d&#39;enregistrement de comportement pour marquer le nombre et la durée des arrières (définis comme les deux pattes avant d&#39;être placé sur un mur de l&#39;arène), creuse (définie comme deux pattes avant de la souris enfouissant dans la literie de l&#39;arène), l&#39;auto-palefreniers (défini comme le mOuse léchant une région de leur propre corps et / ou la souris de toucher une partie de la face avec leurs pattes avant), et les sauts (défini comme un élevage de souris, puis en sautant de telle sorte que les quatre pieds sont sur le sol en même temps). <ol><li> Pour marquer une vidéo, allez dans Fichier&gt; Ouvrir un projet puis Observer&gt; Observation&gt; Nouveau. Le programme invite à entrer un nom de fichier. Une fois nommé, sélectionnez le fichier multimédia vidéo approprié. </li><li> Commencez le score en cliquant sur le bouton Début Observation. Remarque: Lors de l&#39;évaluation des comportements répétitifs de la souris, tous les Etats événements nécessitent deux frappes, la première correspondant à l&#39;initiation du comportement et le second correspondant à la fin du comportement. Point Events ne nécessitent une seule touche. </li></ol></li><li> Note le nombre de fois la souris renifla chaque objet. Sniffs sont définis comme chaque fois qu&#39;une souris se déplace de son nez à moins de 0,5 cm d&#39;un objet. Mesurer la durée de sniff en utilisant un logiciel d&#39;enregistrement du comportement de la même manière que Repetdurées de comportement itive ont été mesurées (étape 3.1.2). <ol><li> Chaque fois qu&#39;une souris renifle un objet, enregistrer le numéro de position correspondant, ce qui conduira à une chaîne de nombres à la fin de la période d&#39;essai de 10 min (par exemple 1243421 ...). enregistrer manuellement ces données. Remarque: Pour faciliter l&#39;efficacité et la cohérence des données vidéos de notation, les chiffres correspondent toujours à une position donnée, pas d&#39;objection. </li><li> Si une souris renifle un objet, détourne le regard, puis renifle à nouveau l&#39;objet, compte ce numéro deux fois. </li><li> Une fois les 10 min vidéo complète a été marqué, visualiser les données en cliquant sur Analyse&gt; Behavior Analysis&gt; Nouveau. Une fois que les données apparaissent sur l&#39;écran, l&#39;exportation ou copier et coller dans une feuille de calcul distincte. </li></ol></li><li> Notez la distance totale de la souris a voyagé dans l&#39;arène pendant le test. Note: Le logiciel de suivi vidéo, calibré pour suivre la souris de test et enregistrer la distance totale déplacée en centimètres, a été utilisépour effectuer cette étape. Toutes les vidéos marqués par le logiciel de suivi vidéo avaient une notecard de dimensions connues placés dans l&#39;arène au début de la vidéo. <ol><li> Utiliser la carte pour notes pour calibrer chaque vidéo dans le logiciel en établissant une courbe d&#39;étalonnage le long de chaque extrémité de la notecard et la saisie de la longueur appropriée à l&#39;intérieur de l&#39;écran d&#39;étalonnage du logiciel. Une fois que les lignes sont tracées, entrée la longueur connue et la largeur de la notecard qui correspondent à chaque ligne. </li><li> Dans Réglages Arena, sélectionnez toute l&#39;arène. Note: Des zones séparées de l&#39;arène peuvent être différenciés dans le logiciel si, par exemple, le mouvement de la souris le long des murs par rapport au centre était d&#39;intérêt. </li><li> Dans Paramètres de contrôle de première instance, sélectionnez une durée de dix minutes. Dans Paramètres de détection, choisissez un objet sombre sur un fond clair. Remarque: Ce devrait être changé si des souris albinos ont été utilisés ou si l&#39;arrière-plan était une teinte plus foncée. </li><li> Une fois que les paramètresont été programmés, marquer les vidéos. Cliquez sur Acquisition&gt; Ouvrir Acquisition. Dans la zone de contrôle Acquisition, cliquez sur Nouveau, puis de première instance Démarrer l&#39;essai. Au bout de dix minutes se sont écoulées, le programme arrête et les données peuvent être visualisées. </li><li> Cliquez sur Analyser&gt; Calculer les statistiques. Une fois que les données apparaissent sur l&#39;écran, l&#39;exportation ou copier et coller dans une feuille de calcul distincte. </li></ol></li></ol></li></ol> 4. Analyses statistiques, Sequencing <ol><li> Dans la chaîne de numéros correspondant à des enquêtes générées par chaque souris objet, déterminer le nombre total de toutes les combinaisons possibles à 3 chiffres sans numéros de répétition (par exemple , 121, 123, 124 mais pas 112 ou 122). Note: Un programme écrit en langage de programmation Python a été utilisé pour déterminer le nombre de fois que chaque séquence possible apparaît dans la chaîne de nombres. Il ne faut pas utiliser un programme extérieur, et cette étape pourrait être complété de nombreuses façons différentes (par exemple en utilisantune fonction Rechercher dans Microsoft Word ou Excel). </li><li> Notez le nombre de fois que chaque séquence se produit et d&#39;identifier les trois séquences plus souvent répétées pour chaque souris. Nota: Les séquences individuelles varient en fonction de la souris et la séquence réelle est d&#39; un intérêt moindre que le nombre de fois qu&#39;une séquence a été répétée ( par exemple l&#39; adhérence à un motif est plus important que le motif lui - même). </li><li> Étant donné que le nombre total de séquences d&#39;une répétition de la souris sera corrélée positivement au niveau d&#39;activité, de corriger ces valeurs en divisant la quantité de motifs les plus fréquents par le nombre total de motifs pour chaque souris individuelle. Cela donnera un indice de répétition de séquence qui est indépendante de l&#39;activité globale. </li><li> Comparez le nombre de fois chaque souris répète ses séquences les plus courantes (corrigé pour le niveau d&#39;activité) entre les groupes en utilisant une ANOVA appropriée, la procédure de comparaison multiple (test de Dunnett, par exemple) et les tests post-hoc. </li></ol><ol><li> En utilisant la même chaîne de nombres générés ci-dessus (étape 3.1.3.1), identifier l&#39;objet roman préférence de chaque souris en comptant le nombre total de fois chaque objet a été étudié, ou en d&#39;autres termes, en comptant le nombre total de 1 sec, 2 sec , 3 sec, et 4 sec dans la chaîne de données. Correct pour le niveau d&#39;activité et de comparer via ANOVA comme décrit ci-dessus (étapes 4,3-4,4). Remarque: Ces méthodes publiées par notre laboratoire 22 et décrits ici sont basés en grande partie sur Pearson et al 17. </li></ol>

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Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Ici, nous présentons un test récemment mis au point qui peut être utile pour quantifier les comportements de souris avec une validité pour ordre supérieur des comportements répétitifs chez les humains. Contrairement à des dosages plus établis comme le Barnes ou T-labyrinthe, ce nouveau test d&#39;exploration de l&#39;objet ne nécessite pas de formation de la souris ni particulièrement anxiogène. De plus, le roman d&#39;exploration de l&#39;objet ne nécessite pas de nourriture ou de stimuli sociaux, ce qui permet de se c...

Troubles du spectre autistique (TSA) est un trouble neurodéveloppemental composé de trois principaux symptômes: perte de valeur sociale, la difficulté à communiquer par le langage et les comportements à motifs répétitifs 1. Depuis 2000, le nombre de personnes qui ont été diagnostiqués avec TSA a augmenté , passant de 1 150 à 1 à 68 en l&#39;espace de dix ans 2. Bien que la prévalence de la maladie continue à augmenter, la cause de la maladie est encore inconnue. Il y a eu une augmentation des efforts pour identifier des modèles de souris appropriés pour le noyau et les symptômes des TSA, car ces modèles pourraient conduire à une meilleure compréhension des symptômes et les causes sous-jacentes de TSA. Il existe des souches de souris consanguines multiples qui semblent afficher des comportements avec une validité pour les principaux symptômes de TSA, y compris des comportements répétitifs 3. Restreintes, des comportements répétitifs (ORR) sont un symptôme de base de certains troubles psychiatriques tels que la TSA.ORR peut augmenter avec la sévérité de la maladie 4, et peuvent considérablement perturber le mode de vie des personnes touchées. ORR sont couramment placés dans deux catégories, d&#39;ordre inférieur comportements répétitifs, qui chez l&#39;homme sont constitués d&#39;actions telles que bascule et de la main-battement; et d&#39;ordre supérieur des comportements répétitifs, qui consistent en le strict respect de la routine et la résistance au changement 5-8. Basse-ordre des comportements répétitifs ont été largement étudiés chez les rongeurs où ils se manifestent comme stéréotypies motrices, qui peuvent être facilement observés dans la fixation d&#39; un laboratoire 9. Ces comportements semblent avoir une bonne validité de visage pour ORR chez l&#39; homme, et potentiellement forte validité conceptuelle et 10. Test de la présence des ORR d&#39;ordre inférieur peut être complété par une surveillance vidéo de l&#39; activité de la souris pour étudier les combats et la durée de ces stéréotypies motrices 11. ordre supérieur des comportements répétitifs posent un défi pour re biomédicale fondamentalerecherche utilisant des rongeurs, comme ces ORR ne sont pas aussi faciles à identifier par l&#39;observation simple. En raison de la difficulté à identifier ces comportements, moins dosages établis pour ordre supérieur comportement répétitif existent. Traditionnellement, d&#39;ordre supérieur ORR ont été mesurés chez les rongeurs en utilisant un paradigme de labyrinthe où l&#39;animal d&#39;essai est formé pour atteindre la compétence à échapper. L&#39;emplacement d&#39;échappement est alors commuté et le nombre d&#39;essais requis pour re-connaître l&#39;emplacement d&#39;échappement est enregistré 12. Ces tests ne sont pas idéales car elles nécessitent une longue période de formation, induisent souvent de l&#39;anxiété, et peut entraîner des résultats très variables. Exploration Hole-conseil a également été utilisé pour quantifier d&#39;ordre supérieur ORR 13,14. Cette approche ne nécessite pas de sessions de formation étendues, mais ne repose sur la motivation des aliments et / ou de discrimination olfactive. Des dosages pour ORR d&#39;ordre supérieur qui ne sont pas anxiogènes ou exigent la formation serait un bon complément au répertoire existant du trou bord exploratio<html> n et des analyses basées sur labyrinthe actuellement en usage. La souche de souris consanguine C58 / J (C58) illustre fortement des niveaux élevés de comportement stéréotypique associés aux TSA, à savoir répétitifs, stéréotypies motrices et sans but des niveaux élevés d&#39;auto-toilettage 3,11. En outre, les souris C58 affichent ORR par des niveaux élevés de l&#39; élevage, le dos et le retournement scrabbling 11,14,16. Cette souche commence à montrer ces comportements au début de la période néonatale et continue de les afficher à l&#39;âge adulte. Il serait idéal pour être en mesure de tester la présence d&#39;un ordre supérieur élevé ORR pour compléter les ORR d&#39;ordre inférieur bien documentées présentes dans cette souche, ainsi que d&#39;autres souches de souris. Le nouveau test d&#39;exploration de l&#39;objet décrit ici offre la possibilité aux chercheurs d&#39;observer d&#39;ordre inférieur et d&#39;ordre supérieur ORR simultanément, car il donne la possibilité de mesurer les comportements à motifs ainsi que stéréotypies motrices répétitives. e_content &quot;&gt; Utilisation nouvelle exploration de l&#39; objet comme un essai pour un ordre supérieur des comportements répétitifs a été développé par Pearson et al. 17. Cette nouvelle évaluation est une extension de l&#39;essai en plein champ bien établi 18-21 avec l&#39;ajout de quatre nouveaux objets l&#39;arène. les souris ont été autorisés à enquêter librement sur ces objets inconnus et le nombre et l&#39;ordre des enquêtes de l&#39;objet a été suivi. les enquêtes d&#39;objets ont ensuite été analysés pour la présence de motifs, avec des souris BTBR affichant un nombre élevé d&#39;enquêtes à motifs entre les objets. en utilisant cette test, les souris peut afficher d&#39;ordre supérieur des comportements répétitifs et à motifs, tout en éliminant la nécessité d&#39;apprendre des comportements ainsi que la suppression des stimuli inutiles. exploration de l&#39;objet Novel induit d&#39;ordre supérieur ORR, car elle permet aux souris pour créer des motifs et des séquences de forme par leur exploration naturelle . l&#39;utilisation de ce test permet à l&#39;enquêteur de quantifier la présence de ces ORR ordre supérieur. Pearson et al. développé ce test et l&#39;a utilisé pour tester la présence d&#39;ordre supérieur des comportements répétitifs potentiels dans la souche de souris consanguine BTBR, avec des résultats intrigants 17. Nous avons récemment publié une étude de suivi en regardant les comportements de la C58, C57BL / 6J (C57) et FVB / NJ (FVB) souches, ainsi que d&#39;une enquête plus approfondie sur les variables de confusion potentiels présents dans cet essai, et possible approches statistiques pour analyser les données générées 22.

<table><tbody><tr><td>Cage à rongeurs standard en polycarbonate (45 cm x 24 cm x 20 cm)</td><td></td><td></td><td>Plusieurs cages sont souhaitables pour faciliter l’analyse de plusieurs souris.</td></tr><tr><td>Arène d’essai circulaire opaque en plastique (diamètre de base de 41 cm)</td><td>United States Plastic Corp.</td><td>13931</td><td>Plusieurs arènes sont souhaitables pour faciliter les tests sur plusieurs souris.</td></tr><tr><td>Standard Corn-Cob Rongeur Bedding</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Novel Object - singe rouge</td><td>Hasbro, Pawtucket RI</td><td></td><td>de Barrel of Monkeys</td></tr><tr><td>Novel Object - rectangulaire 2 x 4 LEGO</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Novel Object - tuile</td><td>Thinkfun Inc., Alexandria VA</td><td></td><td>de Toot and Otto</td></tr><tr><td>Novel Object - standard blanc die</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Caméra vidéo</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Logiciel d’enregistrement comportemental - The Observer</td><td>Noldus, Wageningen, Pays-Bas</td><td>D’autres programmes peuvent être utilisés</td><td></td></tr><tr><td>Logiciel de suivi vidéo - EthoVision</td><td>Noldus, Wageningen, Pays-Bas</td><td>D’autres programmes peuvent être utilisés</td><td></td></tr><tr><td>X-Keys Clavier d’entrée</td><td>P.I. Engineering, Williamstown MI</td><td>829484</td><td></td></tr><tr><td>MacroWorks II</td><td>P.I. Engineering, Williamstown, MI</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

novel exploration de l&#39;objet comme un test potentiel pour ordre supérieur comportements répétitifs chez la souris

Novel Object Exploration as a Potential Assay for Higher Order Repetitive Behaviors in Mice

Les comportements restreints et répétitifs (RRB) sont une caractéristique essentielle des troubles du spectre autistique (TSA) et perturbent la vie des personnes touchées. Les RRB sont généralement divisés en composants d’ordre inférieur et d’ordre supérieur, les RRB d’ordre inférieur étant constitués de stéréotypies motrices et les RRB d’ordre supérieur constituant de comportements persévérants et de séquençage. Les RRB d’ordre supérieur sont difficiles à modéliser chez la souris. Les tests actuels pour les ORR chez la souris se concentrent principalement sur les composants d’ordre inférieur, ce qui rend difficile la recherche biomédicale fondamentale sur des traitements ou des interventions potentiels pour les ORR d’ordre supérieur. Nous décrivons ici un nouveau test, une nouvelle exploration d’objets. Ce test utilise une arène de base en plein champ avec quatre nouveaux objets placés autour du périmètre. La souris d’essai est autorisée à explorer librement l’arène et l’ordre dans lequel la souris étudie les nouveaux objets est enregistré. À partir de ces données, des séquences d’exploration basées sur des motifs peuvent être identifiées, ainsi que l’objet le plus préféré pour chaque souris. Les données représentatives partagées ici et les résultats antérieurs utilisant le nouveau test d’exploration d’objets illustrent que les souches de souris consanguines présentent un comportement différent dans cet essai et que les souches avec des RRB d’ordre inférieur élevés présentent également un comportement à motifs élevé. En tant que tel, le nouveau test d’exploration d’objets semble posséder une bonne validité apparente pour les RRB d’ordre supérieur chez l’homme et pourrait être un test précieux pour de futures études portant sur de nouvelles thérapies pour les TSA.

Les données représentatives 22 montrent que C58 femelle / souris J affichent un nombre plus élevé de motifs séquencés que les autres souches dans l&#39;arène ronde (figure 2, partie A), mais pas dans l&#39;arène rectangulaire (Figure 2, partie C). Aucun des trois souches mâles diffèrent les unes des autres (figure 2, panneaux B et D). Les données représentatives montrent que les souris mâles et femelles C58 / J affichent une f...

Les comportements restreints et répétitifs (RRB) d’ordre supérieur perturbent la vie des personnes touchées. Ces comportements sont difficiles à modéliser chez les rongeurs, ce qui rend difficile la recherche biomédicale fondamentale sur les traitements ou les interventions potentiels pour les ORR. Ici, nous décrivons l’exploration de nouveaux objets en tant qu’essai potentiel pour les RRB d’ordre supérieur chez la souris.

Novel Exploration de l&#39;objet comme un test potentiel pour ordre supérieur Comportements répétitifs chez la souris

Restricted, repetitive behaviors (RRBs) are a core feature of autism spectrum disorder (ASD) and disrupt the lives of affected individuals.  RRBs are ...

L'objectif général de ce test comportemental est d'identifier la présence de comportements répétitifs de haut niveau chez les souris. Ce test peut aider à valider des modèles murins potentiels de comportements semblables à l'autisme, tels que la souche consanguine de souris C 58 J. Les principaux avantages de cette technique sont qu'elle ne nécessite aucun entraînement des souris et qu'elle n'induit pas particulièrement d'anxiété.Commencez par remplir l'arène de test. Une cage rectangulaire en plastique transparent avec une couche de copeaux de maïs d'un demi-pouce d'épaisseur. Sélectionnez quatre objets nouveaux qui diffèrent par leur forme et leur couleur.Par exemple, une brique-jouet rose, un singe rouge, un carreau blanc avec une inscription bleue et un dé standard blanc. Veillez à ce que ces objets aient approximativement la même taille et soient fabriqués en plastique de haute densité afin de faciliter le nettoyage et de résister à la mastication. Dans l'arène rectangulaire, placez ces objets à trois centimètres des coins, selon un ordre aléatoire et contrebalancé, tout au long des tests.Enregistrez la position de chaque objet comme un nombre différent allant de un à quatre. Enfin, placez une caméra directement au-dessus des arènes de test de manière à ce que l'ensemble de l'arène soit enregistré pendant les périodes d'acclimatation et de repos. Commencez les tests au début du cycle lumineux dans une pièce éclairée par une lumière fluorescente d'environ 100 lux.Veillez à ce que l'éclairage soit uniforme dans l'arène de test afin de standardiser l'apparence pendant l'enregistrement vidéo. Ensuite, placez une carte de référence de dimensions connues au fond de l'arène de test pour une utilisation ultérieure comme étalon de calibration. Puis, appuyez sur le bouton d'enregistrement de la caméra vidéo.Ensuite, transférez une souris témoin dans l'arène de test vide pendant 10 minutes afin de servir de période d'acclimatation, et poursuivez l'enregistrement. Après la période d'acclimatation, laissez la souris dans l'arène et ajoutez rapidement les quatre objets nouveaux dans l'arène. Enregistrez le comportement de la souris pendant une période supplémentaire de 10 minutes durant cette phase de test.Enfin, une fois la période de test terminée, remettez la souris testée dans sa cage d’origine. Nettoyez et séchez les objets nouveaux ainsi que l’arène de test à l’aide d’un savon à vaisselle inodore et de l’eau. Commencez par configurer le schéma de codage du projet dans le logiciel d’enregistrement du comportement.Dans la boîte de configuration du projet, définissez l'acquisition des données sur hors ligne, observation hors ligne. Dans la boîte de codage du comportement, programmez le scrabble, le creusage, la station debout, le toilettage et l'exploration olfactive des objets un, deux, trois et quatre comme des événements d'état. Programmez le saut comme un événement ponctuel.Pour programmer le clavier secondaire, ouvrez le logiciel du clavier, cliquez sur le bouton du clavier secondaire affiché à l'écran, saisissez la combinaison de touches appropriée, puis cliquez sur OK. Une fois le clavier secondaire programmé, fermez le logiciel et laissez le programme s'exécuter en arrière-plan sur l'ordinateur. Après avoir configuré le projet dans le logiciel, préparez-vous à noter le nombre et la durée de chacun des comportements répétitifs suivants.Élève, creuse, se toilette et saute. Pour annoter une vidéo, cliquez sur Fichier, Ouvrir un projet, Observer, Observation, puis Nouveau. Choisissez un nom pour le nouveau fichier, puis sélectionnez le fichier vidéo à annoter.Commencez l'évaluation des comportements répétitifs en cliquant sur le bouton de début d'observation. Utilisez deux frappes au clavier pour tous les événements d'état : une pour indiquer le début et une autre pour la fin du comportement.Et utilisez une seule frappe de touche pour les événements ponctuels. Ensuite, utilisez le logiciel pour comptabiliser le nombre de fois et la durée pendant laquelle la souris a reniflé chaque objet, défini comme tout moment où une souris approche son nez à moins de 0,5 centimètre d’un objet. À chaque fois qu’une souris renifle un objet, enregistrez le numéro de position correspondant de l’objet et notez manuellement la suite des numéros de position jusqu’à la fin de la période de test de 10 minutes.Comptez une position deux fois si une souris renifle un objet, regarde ailleurs, puis renifle à nouveau l'objet. Une fois que la vidéo de test de 10 minutes a été notée pour les reniflements, visualisez les données en cliquant sur analyser, analyse du comportement, puis nouveau. Ensuite, dès que les données apparaissent à l'écran, exportez-les vers un tableau distinct.Ensuite, enregistrez la distance totale parcourue par la souris dans l'arène pendant le test. Pour ce faire, utilisez la carte de référence afin de calibrer chaque vidéo en traçant une ligne de calibration le long de chaque extrémité de la carte, puis saisissez la longueur appropriée dans l'écran de calibration du logiciel. Une fois les lignes tracées, saisissez la longueur et la largeur connues de la carte correspondant à chaque ligne.Ensuite, dans les paramètres de l'arène, sélectionnez toute l'arène. Dans les paramètres de contrôle des trajectoires, choisissez une durée de 10 minutes. Et dans les paramètres de détection, sélectionnez un objet sombre sur un fond clair.Une fois ces paramètres programmés, évaluez les vidéos en cliquant sur acquisition et en ouvrant acquisition. Dans la boîte de contrôle d'acquisition, cliquez sur nouveau test, puis démarrez les essais.Une fois que 10 minutes se sont écoulées, arrêtez le programme et observez les données. Enfin, cliquez sur analyser et calculez les statistiques. Une fois les données affichées à l’écran, exportez-les vers un tableau distinct.Le pourcentage du nombre de fois où les trois séquences de motifs les plus fréquents ont été répétées a été observé chez trois souches de souris consanguines différentes. Les femelles C58 ont montré une forte adhésion à leurs motifs préférés dans l'arène circulaire, mais pas dans l'arène rectangulaire. Les souris mâles, quant à elles, ne différaient pas entre elles dans l'une ou l'autre arène.De plus, les souris mâles et femelles C58 dans l'arène circulaire ont montré une préférence plus marquée pour leur objet le plus préféré que les deux autres souches. Aucune différence de préférence pour les objets n'a toutefois été observée dans l'arène rectangulaire. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en moins d'une heure, avec 15 minutes nécessaires pour l'acquisition des données et 20 minutes pour l'évaluation du comportement.Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de se rappeler que les souris sont très sensibles aux changements de leur environnement. Veuillez vous assurer que l'environnement de test reste constant tout au long de l'expérience. Après cette procédure, d'autres méthodes comme le labyrinthe de Barnes ou le labyrinthe d'équipe peuvent être utilisées pour valider davantage la présence de comportements répétitifs de haut niveau.Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment utiliser l'exploration d'objets nouveaux pour identifier la présence de comportements répétitifs de haut niveau chez les souris.

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Comportement

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Marbre enterrant et Nestlet déchiquetage comme tests de répétitives, comportements compulsifs comme-chez les souris

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