20 août 2016
Les comportements restreints et répétitifs (RRB) d’ordre supérieur perturbent la vie des personnes touchées. Ces comportements sont difficiles à modéliser chez les rongeurs, ce qui rend difficile la recherche biomédicale fondamentale sur les traitements ou les interventions potentiels pour les ORR. Ici, nous décrivons l’exploration de nouveaux objets en tant qu’essai potentiel pour les RRB d’ordre supérieur chez la souris.
L’objectif global de cet essai comportemental est d’identifier la présence de comportements répétitifs d’ordre supérieur chez la souris. Ce test peut aider à valider des modèles de souris potentiels et un comportement autistique, comme la souche de souris consanguine C 58 J. Les principaux avantages de cette technique sont qu’elle ne nécessite aucun entraînement de souris et qu’elle n’est pas particulièrement anxiogène.
Commencez par remplir l’arène de test. Une cage rectangulaire en plastique transparent avec un demi-pouce de litière d’épis de maïs. Sélectionnez quatre objets inédits de forme et de couleur différentes.
Par exemple, une brique de jouet rose, un singe rouge, une tuile blanche avec une écriture bleue et un dé blanc standard. Assurez-vous que ces objets sont à peu près de la même taille et fabriqués avec du plastique à haute densité pour faciliter le nettoyage et résister à la mastication. Dans l’arène rectangulaire, placez ces objets à trois centimètres des coins dans un ordre aléatoire et contrebalancé tout au long du test.
Notez l’emplacement de chaque objet sous la forme d’un nombre différent de un à quatre. Enfin, placez une caméra directement au-dessus des arènes d’essai afin que l’ensemble de l’arène soit enregistré pendant les périodes d’acclimatation et de repos. Commencez les tests au début du cycle d’éclairage dans une pièce éclairée par un éclairage fluorescent à environ 100 lux.
Assurez-vous que l’éclairage est uniforme dans toute la zone d’essai afin de normaliser l’apparence pendant l’enregistrement vidéo. Ensuite, placez une carte de notes de dimensions connues au fond de l’arène d’essai pour une utilisation ultérieure comme étalon d’étalonnage. Et appuyez sur le bouton d’enregistrement de la caméra vidéo.
Ensuite, transférez une souris de test dans l’arène de test vide pendant 10 minutes pour servir de période d’acclimatation et poursuivez l’enregistrement. Après la période d’acclimatation, laissez la souris dans l’arène et ajoutez rapidement les quatre nouveaux objets à l’arène. Enregistrez le comportement de la souris pendant 10 minutes supplémentaires pendant cette période de test.
Enfin, une fois la période de test terminée, remettez la souris de test dans sa cage d’origine. Nettoyez et séchez les nouveaux objets ainsi que l’arène d’essai avec du savon à vaisselle non parfumé et de l’eau. Commencez par configurer le schéma de codage du projet dans le logiciel de journalisation comportementale.
Dans la boîte de configuration du projet, définissez l’acquisition de données sur l’observation hors ligne et hors ligne. Dans la boîte de codage du comportement, programmez scrabble, digging, rearning, grooming et sniff object un, deux, three et quatre en tant qu’événements d’état. Programme de saut en tant qu’épreuve de point.
Pour programmer le clavier secondaire, ouvrez le logiciel du clavier, cliquez sur le bouton du clavier secondaire affiché à l’écran, tapez la combinaison de touches appropriée et cliquez sur OK. Une fois le clavier secondaire programmé, fermez le logiciel et laissez le programme s’exécuter en arrière-plan de l’ordinateur. Une fois le projet configuré dans le logiciel, préparez-vous à noter le nombre et la durée de chacun des comportements répétitifs suivants.
Se cabre, creuse, se toilette et saute. Pour composer la musique d’une vidéo, cliquez sur Fichier, ouvrez le projet, observer, observation et nouveau. Choisissez un nom pour le nouveau fichier, puis sélectionnez le fichier multimédia vidéo à marquer.
Commencez à noter les comportements répétitifs en cliquant sur le bouton Commencer l’observation. Utilisez deux touches pour tous les événements d’état. L’un pour signifier l’initiation et l’autre pour la fin du comportement.
Et n’utilisez qu’une seule touche pour les événements de point. Ensuite, utilisez le logiciel pour noter le nombre de fois et la durée pendant laquelle la souris a reniflé chaque objet, ce qui est défini comme chaque fois qu’une souris bouge son nez à moins de 0,5 centimètre d’un objet. Chaque fois qu’une souris renifle un objet, enregistrez le numéro de position correspondant de l’objet et enregistrez manuellement la chaîne de numéros de position jusqu’à la fin de la période de test de 10 minutes.
Comptez deux fois une position si une souris renifle un objet, détourne le regard, puis renifle à nouveau l’objet. Une fois que la vidéo de test de 10 minutes a été notée pour les reniflements, visualisez les données en cliquant sur analyser, analyse comportementale et nouveau. Ensuite, une fois que les données apparaissent à l’écran, exportez-les dans une feuille de calcul distincte.
Ensuite, notez la distance totale parcourue par la souris dans l’arène pendant les tests. Pour ce faire, utilisez la carte de notes pour calibrer chaque vidéo en définissant une ligne de calibrage à chaque extrémité de la carte de notes et en saisissant la longueur appropriée dans l’écran d’étalonnage du logiciel. Une fois les lignes tracées, entrez la longueur et la largeur connues de la carte de note qui correspondent à chaque ligne.
Ensuite, dans les paramètres de l’arène, sélectionnez l’arène entière. Dans les paramètres de contrôle des sentiers, sélectionnez une durée de 10 minutes. Et dans les paramètres de détection, choisissez un objet sombre sur un fond clair.
Une fois ces paramètres programmés, notez les vidéos en cliquant sur acquisition et ouvrez acquisition. Dans la zone de contrôle d’acquisition, cliquez sur Nouvelle version d’évaluation. Et puis commencer les essais.
Une fois que 10 minutes se sont écoulées, arrêtez le programme et observez les données. Enfin, cliquez sur analyser et calculer les statistiques. Une fois que les données apparaissent à l’écran, exportez-les dans une feuille de calcul distincte.
Le pourcentage du nombre de fois où les trois séquences de motifs les plus courantes ont été répétées a été observé chez trois souches différentes de souris consanguines. Les femelles C 58 ont montré une forte adhésion à leurs modèles préférés dans l’arène ronde, mais pas dans l’arène rectangulaire. Alors que les souris mâles ne différaient pas les unes des autres dans l’un ou l’autre domaine.
De plus, les souris C 58 mâles et femelles dans l’arène ronde ont montré une préférence plus forte pour leur objet préféré que les deux autres souches. Bien qu’aucune différence dans la préférence d’objet n’ait été montrée dans l’arène rectangulaire. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en moins d’une heure, avec 15 minutes nécessaires pour l’acquisition de données et 20 minutes nécessaires pour le scoring comportemental.
En tentant cette procédure, il est important de se rappeler que les souris sont très sensibles aux changements dans leur environnement. Veuillez vous assurer que l’environnement de test reste cohérent tout au long de l’expérience. Après cette procédure, d’autres méthodes comme le Barnes Maze ou le Team Maze peuvent être utilisées pour valider davantage la présence de comportements répétitifs d’ordre supérieur.
Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser l’exploration de nouveaux objets pour identifier la présence de comportements répétitifs d’ordre supérieur chez les souris.
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