Name: Fluorescent modèle de souris orthotopique de cancer du pancréas (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-20T08:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: Découvrez comment créer un modèle orthotopique fluorescent de cancer du pancréas chez la souris. Cette méthode permet le suivi non invasif de la croissance tumorale et des métastases en temps réel.

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Nous remercions l’Université Western des sciences de la santé pour la subvention intra-muros.

Le protocole décrit ci-dessous est exécuté sous la direction et l&#39;approbation du Comité des soins et de l&#39;utilisation des animaux de l&#39;Université Western. Toutes les expériences sont réalisées en conformité avec toutes les directives pertinentes, la réglementation et les organismes de réglementation. 1. Culture cellulaire <ol><li> Préparation de Milieu Complet <ol><li> L&#39;utilisation d&#39;une enceinte de sécurité biologique de classe II, préparer un milieu complet en ajoutant aseptiquement sérum fœtal bovin (FBS) et de la pénicilline streptomycine (P / S) à une bouteille de milieu RPMI 500 ml. Mélanger doucement par tourbillonnement. La concentration finale de chaque supplément est de 10% de FBS et 1% P / S (v / v). Par exemple, compléter 500 ml de milieu avec 56 ml de FBS et 6 ml P / S. </li><li> Placez un milieu complet dans un bain d&#39;eau à 37 ° C. </li></ol></li><li> Dégel et cellules de multiplication <ol><li> Récupérer les cellules PANC-1 GFP de l&#39;azote liquide. Décongeler le flacon par agitation douce dans un bain d&#39;eau à 37 ° C. Remarque:Dégel doit être rapide (environ 2 - 3 min). </li><li> Étiquette T-75 flacons à utiliser avec (a) le nom de lignée cellulaire, (b) le numéro de passage, (c) la date et ses initiales (d) chercheur. </li><li> Essuyez le flacon avec 70% d&#39;éthanol et le transfert du flacon à une enceinte de sécurité biologique. </li><li> Pour propager les cellules, ajouter 9,0 ml de milieu complet dans un tube de 15 ml conique. 1,0 ml à l&#39;aide d&#39;une pipette, transférer soigneusement la suspension de cellules et mettre en suspension dans 9 ml de milieu complet. </li><li> Centrifuger à 125 g pendant 8 min à température ambiante. Transférer le flacon conique à une enceinte de sécurité biologique et aspirer le surnageant sans perturber le culot. </li><li> Suspendre le culot dans 10 ml de milieu complet frais par pipetage doucement la suspension de haut en bas. </li><li> Compter les cellules avec un hémocytomètre et la plaque dans les flacons T-75 à une densité de 2,1 x 10 6 cellules / flacon. Placer ballon dans un incubateur à 37 ° C et 5% de CO 2. </li><li> Surveiller les cellules quotidiennement à l&#39;oeil nu et au microscope. Si la grippeid renouvellement est nécessaire, de manière aseptique Aspirer le milieu de croissance complet du flacon et le jeter. Ajouter un volume égal de milieu complet frais. </li></ol></li><li> Propager cellules <ol><li> retirer aseptique moyen du ballon. Ajouter 5 ml de tampon phosphate solution saline de Dulbecco (DPBS) pour rincer les cellules et les jeter. </li><li> Détacher les cellules du flacon en ajoutant 3 ml de trypsine à 0,25%. Incuber flacon contenant de la trypsine à 37 ° C et 5% de CO 2 pendant 5 à 10 min. </li><li> Observer les cellules au microscope (grossissement 10X) et veiller à ce qu&#39;ils sont ronds et délogé. </li><li> Neutraliser la trypsine en ajoutant un volume égal de milieu complet et de briser les mottes en pipetant doucement monter et descendre. </li><li> Compter les cellules en utilisant un hémocytomètre et transférer le volume de la suspension cellulaire appropriée pour les nouveaux flacons à la densité cellulaire mentionnée dans 1.2.7; ajouter suffisamment de milieu frais de sorte que le volume final est de 10 ml par flacon. </li></ol></li><li> Suspens cellulairesPréparation pour injection d&#39;ions Remarque: La matrice de la membrane basale, une forte concentration, se solidifie à température ambiante, garder tous les matériaux sur la glace. Placez tous les conseils et les flacons de pipettes stériles dans le congélateur pendant une nuit, et garder sur la glace tout en travaillant sur la suspension. <ol><li> Gardez une bouteille de RPMI médias sans aucun additif sur la glace. Décongeler la matrice de la membrane basale, une forte concentration, en suivant les instructions du fabricant. De préférence, aliquote en petits flacons pour éviter de multiples cycles de gel-dégel 10. </li><li> Aspirer le milieu de tous les flacons, et rincer avec 5 ml de DPBS. Répétez toutes les étapes de la section précédente jusqu&#39;à l&#39;étape 1.3.4. </li><li> Transférer le contenu dans un tube conique de 15 ml et on centrifuge à 125 g pendant 8 min à température ambiante. Transférer flacon conique enceinte de sécurité biologique et remettre en suspension à granulés en utilisant 10 ml de DPBS. </li><li> pipeter doucement la suspension de haut en bas pour briser le culot. Compter les cellules en utilisant un hémocytomètre. </li><li> Centrifuger à nouveau comme indiqué dans sTep 1.4.3. Aspirer le surnageant et en fonction du nombre de cellules, ajouter un diluant approprié pour donner 3 x 10 6 cellules dans un volume de 50 ul. Le diluant sera un mélange de milieu sans sérum et une forte concentration membranaire de matrice basale en 1 (v / v) rapport 1. </li><li> Vortex la suspension doucement et garder sur la glace en tout temps. La suspension est maintenant prête pour l&#39;injection. </li></ol></li><li> Implantation chirurgicale Remarque: Veiller à ce que tous les matériaux et instruments chirurgicaux sont stériles. Pratiquer des techniques aseptiques en tout temps. <ol><li> Placez un coussin chauffant sur la table et couvrir d&#39;un drap stérile. Mettre en place l&#39;appareil d&#39;anesthésie et de veiller à toutes les fournitures sont à portée de main. </li><li> Placez le museau de l&#39;animal dans le masque d&#39;anesthésie et de mettre en place l&#39;anesthésie à 1 L / min d&#39;oxygène et 2,5% d&#39;isoflurane. </li><li> Frottez doucement le flanc de l&#39;animal avec de l&#39;iode, et rincer à l&#39;éthanol à 70%. Répétez trois fois. </li><li> Confirmer leanimal est complètement anesthésié par pincement de la patte arrière. L&#39;animal est entièrement anesthésié et prêt pour la chirurgie si aucune réponse est observée. Toutefois, si l&#39;animal sursaute, assurer qu&#39;il ya une anesthésie suffisante dans le vaporisateur et laisser l&#39;animal plus de temps pour aller complètement sous anesthésie. </li><li> Charge d&#39;environ 200 pi de la suspension cellulaire dans une seringue de 1,0 ml de TB avec une aiguille 18 G (préalablement refroidi). Remplacer l&#39;aiguille avec une aiguille 27 G et revenir à la glace jusqu&#39;à utilisation. </li><li> Localisez la zone générale de la rate (quadrant supérieur gauche de l&#39;abdomen) et en utilisant une pince pincer la peau au-dessus de cette région. Avec des ciseaux chirurgicaux faire une incision d&#39;environ 1,0 cm pour créer une poche. De même, pincer le muscle lisse sur le dessus de la rate et couper à travers afin d&#39;accéder à la cavité péritonéale. </li><li> saisir délicatement l&#39;extrémité caudale de la rate et le tirer hors du corps. Le pancréas est attaché à la rate. Étaler le pancréas en utilisant un st humideerile Q-tip et de localiser la queue du pancréas. </li><li> Livrer l&#39;injection de 50 pi dans la queue du pancréas, laissez l&#39;aiguille à l&#39;intérieur pendant 10 secondes et tourner lentement l&#39;aiguille du pancréas. Une implantation réussie va ressembler une bulle superficielle sans fuite. </li><li> Retour du pancréas et de la rate à la cavité péritonéale. Tout d&#39;abord joindre le muscle, puis enfermer la peau séparément. Utilisez une suture 6-0 ou une agrafe pour fermer l&#39;incision. Pour éviter la douleur chez l&#39;animal, administrer kétoprofène sous-cutanée (SC) (5 mg / kg) sur 24 heures. Alternativement, administrer buprénorphine sc (0,05 à 0,1 mg / kg) toutes les 12 heures sur une période de 36 h. </li><li> Récupérer l&#39;animal de l&#39;anesthésie et le retourner à sa cage. Surveillez également la douleur. Les animaux doivent être munis de soulagement de la douleur au moment de (ou même avant - préemptive) chirurgie. soulagement de la douleur supplémentaire doit être fournie aux animaux qui éprouvent de la douleur selon IACCUC protocole ou tel que prescrit par le autendant vétérinaire ou la personne désignée. </li></ol></li><li> Dans l&#39; imagerie in vivo Remarque: la capture d&#39;image a été effectuée en utilisant un système d&#39;imagerie commercial équipé d&#39;une chambre noire et les filtres appropriés pour l&#39;imagerie de la GFP. L&#39;acquisition des images a été effectuée en utilisant une caméra CCD et un système optique composé de lentilles interchangeables d&#39;excitation / d&#39;émission (excitation: 455-495 nm; émission: 513-557 nm). images de champ lumineux ont été capturés sans filtre à 1 x 1 binning pour chaque point de temps. Excitation de la GFP utilisé une source au xénon de lumière multispectrale. Les animaux ont été maintenus sous une anesthésie tout au long du processus d&#39;imagerie en connectant l&#39;appareil d&#39;anesthésie à un collecteur de gaz d&#39;anesthésie intégrée dans la chambre sombre du système d&#39;imagerie. <ol><li> Anesthetize l&#39;animal tel que décrit dans 1.5.2. Un masque d&#39;anesthésie est à l&#39;intérieur de la chambre noire du système d&#39;imagerie commerciale afin de maintenir l&#39;animal sous anesthésie au cours de l&#39;imagerieprocessus. </li><li> Mettre en place les filtres d&#39;excitation et d&#39;émission corrects. </li><li> Commencez par l&#39;obtention d&#39;une image initiale à l&#39;aide de la lumière blanche seulement. Gardez la même position de l&#39;animal tout au long de la session d&#39;imagerie et de passer à des filtres de GFP pour prendre une seconde image. </li><li> Pour de meilleurs résultats superposer les deux images. Analyser l&#39;image pour la zone et l&#39;intensité de fluorescence. </li></ol></li></ol>

<ol><li>Siegel, R. Pancreatic Cancer Stats: American Cancer Society: Cancer Facts & Figures. , Available from:
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<li>Smyth, E., Cunningham, D. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSmyth%2C+E+%22Harrison%27s+Principles+of+Internal+Medicine%22">Harrison's Principles of Internal Medicine</a>. Kasper, D., et al. , 19th edn, McGraw-Hill Education. (2015).</li>
<li>Mahipal, A., Frakes, J., Hoffe, S., Kim, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+borderline+resectable+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22World+J+Gastrointest+Oncol%22%5BJournal%5D)">Management of borderline resectable pancreatic cancer.</a> World J Gastrointest Oncol. 7, 241-249 (2015).</li>
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<li>Metildi, C. A., Kaushal, S., Hoffman, R. M., Bouvet, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+serial+selection+of+human+pancreatic+cancer+cells+in+orthotopic+mouse+models+produces+high+metastatic+variants+irrespective+of+Kras+status%5BTitle%5D)+AND+%22J+Surg+Res%22%5BJournal%5D)">In vivo serial selection of human pancreatic cancer cells in orthotopic mouse models produces high metastatic variants irrespective of Kras status.</a> J Surg Res. 184, 290-298 (2013).</li>
<li>Kim, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+orthotopic+and+heterotopic+human+pancreatic+cancer+xenografts+in+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Generation of orthotopic and heterotopic human pancreatic cancer xenografts in immunodeficient mice.</a> Nat Protoc. 4, 1670-1680 (2009).</li>
<li>Katz, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survival+efficacy+of+adjuvant+cytosine-analogue+CS-682+in+a+fluorescent+orthotopic+model+of+human+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Survival efficacy of adjuvant cytosine-analogue CS-682 in a fluorescent orthotopic model of human pancreatic cancer.</a> Cancer Res. 64, 1828-1833 (2004).</li>
<li>Bouvet, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Real-time+optical+imaging+of+primary+tumor+growth+and+multiple+metastatic+events+in+a+pancreatic+cancer+orthotopic+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Real-time optical imaging of primary tumor growth and multiple metastatic events in a pancreatic cancer orthotopic model.</a> Cancer Res. 62, 1534-1540 (2002).</li>
</ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à dévoiler.

Nous décrivons un modèle murin orthotopique de cancer du pancréas qui exprime la GFP, permettant ainsi une surveillance non invasive de la croissance tumorale en utilisant corps in vivo , l&#39; imagerie de fluorescence (figure 1). Cette technique nous permet de suivre l&#39;évolution de la tumeur en temps réel (Figure 3); il peut être un outil important pour les chercheurs d&#39;étudier l&#39;efficacité thérapeutique des nouveaux agents contre le cancer du pancréas. Un autre a...

Le cancer du pancréas est diagnostiqué avec une fréquence accrue par rapport à d&#39; autres cancers et est le 4 e principale cause de décès liés au cancer aux Etats-Unis. A partir du moment du diagnostic, plus de 90% des patients meurent dans les cinq ans 1,2. Actuellement, l&#39; ablation chirurgicale de la tumeur est le seul remède pour le cancer du pancréas, mais moins de 20% des patients sont admissibles à subir une intervention chirurgicale principalement parce que , au moment du diagnostic de la maladie est à un stade avancé et a métastasé 3,4. L&#39;absence de symptômes spécifiques rend le cancer du pancréas une maladie silencieuse; certains des symptômes comprennent des douleurs abdominales, maux de dos, perte d&#39;appétit, la jaunisse et des nausées; qui peut être facilement interprété comme maladies digestives communes 4. Pour cette raison, il est important de développer de nouveaux outils pharmacologiques pour faciliter le diagnostic et le traitement du cancer du pancréas. L&#39;utilisation de modèles animaux nous permet de comprendre la biologie de pancrecancer atique et donne un aperçu de l&#39;application de ces connaissances à l&#39;homme. Des modèles de xénogreffes orthotopiques du cancer du pancréas sont réalistes, parce que les tumeurs se développent dans l&#39;organe 5 d&#39;origine. Contrairement aux modèles hétérotopiques où des lignées cellulaires ou des fragments de tumeur sont implantés par voie sous- cutanée, la modélisation orthotopique permet la reconstitution du microenvironnement tumoral et imite l&#39;interaction des cellules tumorales avec son environnement 6. Le modèle de xénogreffe de tumeurs décrit ici dérive de la lignée cellulaire pancréatique cancéreuses humaines PANC-1 GFP, qui est génétiquement modifiée pour exprimer la protéine fluorescente verte (GFP). La détection de la GFP permet une imagerie et de suivi de la croissance tumorale et les métastases 7 non invasive. Le développement de la tumeur se produit rapidement, spontanément, et ressemble étroitement à celui des tumeurs primaires de patients atteints de cancer du pancréas humains 8. modèles orthotopiques fournissent une prédiction plus précise de l&#39;efficacité des médicaments en réponse à des agents thérapeutiques, tout enmimant le microenvironnement tumoral. Comme il est mentionné ci-dessus, ce modèle animal permet la détection par fluorescence de la croissance tumorale et les métastases en temps réel. détection fluorescente permet une imagerie plus direct / live par rapport à luminescence. Avec la fluorescence de la lumière émise est le résultat d&#39;une excitation par une lumière d&#39;une longueur d&#39;onde plus courte; tandis que la luminescence, la lumière émise est le résultat d&#39;une réaction chimique et peut ne pas avoir une forte émission 9. Par ailleurs, le corps entier dans l&#39; imagerie par fluorescence in vivo ne nuise pas à l&#39;animal et permet aux chercheurs de surveiller la croissance de la tumeur au fil du temps en réponse à des traitements thérapeutiques.

<table><tbody><tr><td>RPMI media 1640</td><td>Caisson Labs</td><td>RPL03-500ML</td><td></td></tr><tr><td>Sérum de veau fœtal&nbsp ;</td><td>Gibco</td><td>10437-077</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline Streptomycine&nbsp ; &nbsp ;</td><td>Thermo Ficher Sci</td><td>15140-122</td><td></td></tr><tr><td>Matrigel HC membrane basale, haute concentration</td><td>Corning</td><td>354248</td><td></td></tr><tr><td>SutureVet PGA 6-0 PGA</td><td>Henry Schein</td><td>39010</td><td></td></tr><tr><td>Alcare ou Foamed Antiseptic</td><td>Handrub Steris</td><td>639680</td><td></td></tr><tr><td>DPBS (solution saline tamponnée au phosphate de Dubelcco)&nbsp ;</td><td>Thermo Ficher Sci</td><td>21300025</td><td></td></tr><tr><td>TB Seringue 27 G 1/2</td><td>Becton Dickinson</td><td>305620</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Blutler Schein</td><td>50562</td><td></td></tr><tr><td>Ketoprofen</td><td>Fort Dodge</td> Ciseaux chirurgicaux pour la santé <td></td><td></td>animale</tr><tr><td>, 5,5" mayo droite&nbsp ;</td><td>Henry Schein</td><td>22-1600</td><td></td></tr><tr><td>PANC-1 Lignée cellulaire GFP&nbsp ;</td><td>Système d’imagerie pour petits animaux Anticancer, Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>: iBox Scientia</td><td>UVP, LLC. Upland, Californie.</td><td></td><td>Système d’imagerie des petits animaux pour observer la tumeur fluorescente chez les animaux vivants</td></tr></tbody></table>

fluorescent modèle de souris orthotopique de cancer du pancréas



Fluorescent Orthotopic Mouse Model of Pancreatic Cancer

Le cancer du pancréas reste l&#39;un des cancers pour lesquels la survie n&#39;a pas sensiblement améliorées au cours des dernières décennies. Seulement 7% des patients diagnostiqués va survivre plus de cinq ans. Afin de comprendre et imiter le microenvironnement des tumeurs pancréatiques, nous avons utilisé un modèle murin orthotopique du cancer du pancréas qui permet l&#39;imagerie non-invasive de la progression tumorale en temps réel. Les cellules cancéreuses pancréatiques exprimant la protéine fluorescente verte (GFP PANC-1) ont été suspendues en sous - sol matrice de la membrane, une concentration élevée, (par exemple, Matrigel HC) avec des milieux sans sérum, puis injectées dans la queue du pancréas par laparotomie. La suspension de cellules dans la matrice de membrane basale à haute concentration devient une substance analogue à un gel une fois qu&#39;il atteint la température ambiante; Par conséquent, il se gélifie quand il entre en contact avec le pancréas, ce qui crée un joint d&#39;étanchéité au niveau du site d&#39;injection et d&#39;empêcher toute fuite de la cellule. La croissance des tumeurs et des métastases dans d&#39;autres organes sont surveillés en temps réelles animaux en utilisant la fluorescence. Il est essentiel d&#39;utiliser les filtres appropriés pour l&#39;excitation et l&#39;émission de la GFP. Les étapes de l&#39;implantation orthotopique sont détaillées dans cet article afin que les chercheurs peuvent facilement répliquer la procédure chez la souris nude. Les principales étapes de ce protocole sont la préparation de la suspension cellulaire, l&#39; implantation chirurgicale, et toute fluorescente du corps dans l&#39; imagerie in vivo. Ce modèle orthotopique est conçu pour évaluer l&#39;efficacité de nouveaux traitements sur les tumeurs primaires et métastatiques.

Cette méthode décrit une implantation chirurgicale orthotopique de cellules fluorescentes cancéreuses pancréatiques humaines, en mettant l&#39; accent sur ​​la préparation de la suspension cellulaire pour l&#39; injection, l&#39; anesthésie appropriée pour les rongeurs, la livraison de la suspension cellulaire par laparotomie, et l&#39;utilisation de fluorescence in vivo l&#39; imagerie du petit animal. La détection d&#39;un signal vert de fluorescence (signal GFP) entre deux et...

Une procédure visant à implanter orthotopiquement des cellules cancéreuses du pancréas exprimant des protéines fluorescentes vertes (PANC-1 GFP) dans le pancréas de souris Balb-c Ola Hsd-Fox1nu afin d’évaluer la progression tumorale et les métastases est présentée ici.

Fluorescent modèle de souris orthotopique de cancer du pancréas

Pancreatic cancer remains one of the cancers for which survival has not improved substantially in the last few decades. Only 7% of diagnosed patients will ...

L'objectif général de cette procédure est de développer un modèle orthotopique de cancer du pancréas fluorescent chez la souris, pouvant être surveillé de manière non invasive chez un animal vivant. Ce modèle permet l'étude non invasive des effets d'un médicament d'intérêt spécifique sur une tumeur primaire et ses métastases chez un animal vivant. Le principal avantage de cette technique est que les effets des traitements peuvent être facilement observés in situ.Commencez par décongeler un aliquot de Matrigel à haute concentration conformément aux instructions du fabricant. Ensuite, lavez chaque flacon de cellules avec cinq millilitres de DPBS, et récoltez les cultures à l’aide de trypsine. Après avoir ajouté le milieu RPMI, transférez les suspensions cellulaires obtenues dans des tubes de 15 millilitres et centrifugez les cellules.À la fin de la centrifugation, transférer les cellules dans une cabine de sécurité biologique et resuspendre délicatement les culots dans 10 millilitres de DPBS frais à l’aide d’un pipettage doux. Après numération, centrifuger à nouveau les cellules et diluer les suspensions cellulaires à une concentration de 3 × 10⁶ cellules par 50 microlitres de milieu

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Recherche sur le cancer

La vidéo explique une méthode chirurgicale par étapes pour l’implantation orthotopique d’un fragment de tumeur d’un donneur cancéreux dans le pancréas d’une souris receveuse non cancéreuse pour le développement d’un cancer du pancréas. Le PDAC implanté orthotopiquement pourrait recapturer le microenvironnement tissulaire des cancers du pancréas humains avec plus de précision que les modèles sous-cutanés conventionnels.

Greffe de tumeur orthotopique par homogreffe : une technique pour générer des modèles murins de tumeurs pancréatiques

Cette vidéo montre le protocole d’implantation orthotopique de cellules cancéreuses du pancréas exprimant des protéines fluorescentes vertes dans le pancréas de la souris. Le modèle murin orthotopique aide à étudier l’efficacité de nouvelles thérapies sur les tumeurs primaires et métastatiques.

Modèle de souris orthotopique fluorescente : implantation de cellules cancéreuses exprimant la GFP dans une souris pour évaluer la progression tumorale in vivo

Cette vidéo présente un modèle orthotopique de cancer du pancréas qui utilise Matrigel pour l’administration de cellules localisées et l’imagerie de bioluminescence in vivo pour le suivi non invasif de la progression tumorale. Le modèle orthotopique est adapté à la fois aux modèles syngéniques et aux modèles de xénogreffes et pourrait être utilisé dans des essais précliniques pour étudier l’impact de nouvelles thérapies anticancéreuses sur la croissance de la tumeur pancréatique primitive et...

Modèle murin de cancer du pancréas orthotopique bioluminescent : une technique non invasive pour surveiller la progression du cancer chez la souris

Une meilleure compréhension de la biologie du cancer du pancréas est critique nécessaire pour permettre le développement de meilleures options thérapeutiques pour traiter le cancer du pancréas. Pour répondre à ce besoin, nous démontrons un modèle orthotopique de cancer du pancréas qui permet une surveillance non invasive de la progression du cancer à...

Modèle Orthotopique bioluminescente la progression du cancer du pancréas

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Contraste dynamique amélioré imagerie par résonance magnétique d&#39;un modèle orthotopique cancer du pancréas de souris

Ce travail préséque un protocole avancé pour évaluer avec précision la charge tumorale par la détection de protéines fluorescentes vertes et de signaux de bioluminescence ainsi que l’intégration de la technique quantitative de détection moléculaire.

Étudier le cancer du sein triple négatif à l’aide d’un modèle orthotopique de cancer du sein

Nous décrivons un protocole pour l'implantation guidée d'ultrason des lignes canalaires canalaires canalaires d'adénocarcinome murine-dérivées de l'adénocarcinome de voie inole directement dans le site indigène de tumeur. Cette approche a eu comme conséquence les tumeurs pancréatiques détectables par balayage d'ultrason dans un délai de 2-4 semaines de l'injection, et a réduit de manière significative l'ensemencement de cellules de tumeur proportion sur la paroi péritonéale par rapport à...

Implantation orthotopique guidée par ultrasons de l'adénocarcinome ductal pancréatique murine

Dans le contexte clinique, les patients atteints d’un cancer pancréatique localisé subiront une pancréatectomie suivie d’un traitement adjuvant. Ce protocole rapporté ici vise à établir une méthode sûre et efficace de modélisation de ce scénario clinique chez les souris nues, par l’implantation orthotopic du cancer pancréatique suivie de pancreatectomy et de splenectomy distaux.

Un modèle murin de résection orthotopique du cancer du pancréas

L’imagerie in vivo à haute résolution du pancréas a été facilitée par la fenêtre d’imagerie intravitale pancréatique.

Visualisation longitudinale stabilisée au niveau cellulaire in vivo du pancréas dans un modèle murin avec une fenêtre d’imagerie intravitale pancréatique

Les allogreffes orthotopiques syngéniques de souris d’adénocarcinome canalaire pancréatique (PDAC) récapitulent la biologie, les phénotypes et les réponses thérapeutiques des sous-types de maladies. En raison de leur progression tumorale rapide et reproductible, ils sont largement utilisés dans les études précliniques. Ici, nous montrons des pratiques courantes pour générer ces modèles, en injectant des cultures PDAC murines syngéniques dans le pancréas.

Allogreffes orthotopiques de souris syngéniques pour modéliser le cancer du pancréas

Nous décrivons une méthode permettant d’utiliser des lymphocytes infiltrant la tumeur (TIL) de souris par cytométrie en flux pour le transfert de cellules adoptives. Ce protocole vise à vérifier la cytotoxicité spécifique des TIL contre les tumeurs dans un modèle murin syngénique de cancer du pancréas, fournissant ainsi des informations sur le développement de thérapies cellulaires adoptives pour le cancer du pancréas.

Isolement par cytométrie en flux et évaluation thérapeutique de lymphocytes infiltrant la tumeur dans un modèle murin de cancer du pancréas

Découvrez comment créer un modèle orthotopique fluorescent de cancer du pancréas chez la souris. Cette méthode permet le suivi non invasif de la croissance tumorale et des métastases en temps réel.

Fluorescent modèle de souris orthotopique de cancer du pancréas

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