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DOI: 10.3791/54345-v
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This protocol provides step-by-step guidelines for setting up competitive mouse bone marrow transplant experiments to study hematopoietic stem/progenitor cell function without prior purification of stem cells by cell sorting. The method aims to determine the fitness of bone marrow hematopoietic stem cells in vivo using a competitive transplant assay.
Ce protocole fournit des directives étape par étape pour la mise en place d’expériences compétitives de greffe de moelle osseuse de souris afin d’étudier la fonction des cellules souches/progénitrices hématopoïétiques sans purification préalable des cellules souches par tri cellulaire.
L’objectif global de cette expérience est de déterminer la valeur adaptative des cellules souches hématopoïétiques de la moelle osseuse in vivo à l’aide d’un test de transplantation compétitif. Cette méthode peut donc aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la biologie des cellules souches et de la transplantation de cellules hématopoïétiques sur l’impact de diverses manipulations sur l’auto-renouvellement des cellules souches après la greffe. Les principaux avantages de cette technique sont qu’elle nécessite un nombre limité d’animaux et qu’elle n’implique pas de tri cellulaire.
Bien que cette méthode puisse donner un aperçu de la fonction des cellules souches, elle peut également être utile dans d’autres domaines tels que l’immunologie, grâce à l’utilisation de chimères mixtes de moelle osseuse. Le développement initial de cette technique dans les années 1960 a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la biologie des cellules souches pour explorer l’identité et la fonction des cellules souches hématopoïétiques chez l’homme et la souris. Roxanne Hetu-Arbour, étudiante à la maîtrise dans le laboratoire, et Edward Owusu Kwarteng, étudiant au doctorat, feront la démonstration de la procédure.
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