Fusion SNARE-médiée de Single protéoliposomes avec bicouches supportées Tethered dans une cellule microfluidique débit contrôlé par Polarized FRBR Microscopie

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10:58 min

24 août 2016

10.3791/54349-v

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Ici, nous présentons un protocole pour détecter un seul, les événements de fusion SNARE médiation entre liposomes et bicouches pris en charge dans des canaux microfluidiques utilisant TIRFM polarisée, avec une sensibilité et une seule molécule ~ 15 résolution temporelle msec. Lipid et la libération de la cargaison soluble peuvent être détectés simultanément. la taille des liposomes, des lipides diffusivité et la fusion des pores propriétés sont mesurées.

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Bicouche supportée

Chapters in this video

0:05

Titre

1:01

Préparation d'un bloc de PDMS pour la formation du canal microfluidique

3:17

Formation de la bicouche lipidique supportée et ancrée

6:18

Vérification de la fluidité de la bicouche

7:06

Introduction des v-SUV dans les canaux microfluidiques

7:59

Observation de la fusion de v-SUV uniques avec la SBL

8:42

Résultats : événements d'amarrage et de fusion décrits par la libération de lipides et de contenu

10:26

Conclusion

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