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Cytoplasmique microinjection dans zygotes Bétail assistée par laser
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JoVE Journal Genetics
Laser-assisted Cytoplasmic Microinjection in Livestock Zygotes

Cytoplasmique microinjection dans zygotes Bétail assistée par laser

Full Text
9,603 Views
08:59 min
October 5, 2016

DOI: 10.3791/54465-v

Yanina S. Bogliotti1, Marcela Vilarino1, Pablo J. Ross1

1Department of Animal Science,University of California, Davis

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Ce protocole montre comment effectuer une microinjection cytoplasmique dans des zygotes d’animaux d’élevage. Cette technique peut être utilisée pour apporter n’importe quelle solution dans l’embryon unicellulaire, comme des outils d’édition du génome pour générer des animaux knock-out.

L’objectif global de cette procédure est d’administrer efficacement des solutions dans le cytoplasme des zygotes du bétail à l’aide d’une aiguille à bout émoussé à l’aide d’un laser. Cette méthode est utilisée dans la recherche et dans le domaine de la trans-genèse animale, puisque l’on est associé à un outil d’édition du génome, tel qu’un système CRISPR Cas9, il peut créer de nouvelles vaches pour étudier la fonction des gènes et les animaux transgéniques de manière très simple et fiable. Le principal avantage de cette technique est qu’elle peut être utilisée pour administrer n’importe quelle solution dans un cytoplasme de zygotes de grands animaux.

Avec l’efficacité d’injection d’une personne bricoleuse, les taux de lomotil du foie d’animal sont minimisés. Tout d’abord, préparez la micropipette d’injection en plaçant un capillaire en verre borosilicaté dans un extracteur de micropipette et en le verrouillant en place. Utilisez un programme approprié pour tirer le capillaire de manière à ce qu’il en résulte une pointe fine avec un long cône.

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