Name: Ferriques murin Thrombose modèles induits par Chlorure (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-09-05T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 37 s
Description: Découvrez un modèle de thrombose induite par chlorure ferrique chez la souris pour étudier la biologie vasculaire. Cette méthode par microscopie intravitale permet d'évaluer les effets des anticoagulants et antiplaquettaires.

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Ce travail a été soutenu par le National Heart Lung and Blood Institute (NHLBI) des National Institutes of Health sous les numéros de prix R01 HL121212 (PI : Sen Gupta), R01 HL129179 (PI : Sen Gupta, Co-I : Li) et R01 HL098217 (PI : Nieman). Le contenu de cette publication relève de la seule responsabilité des auteurs et ne représente pas nécessairement les opinions officielles des National Institutes of Health.

<ol><li>Sachs, U. J., Nieswandt, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+thrombus+formation+in+murine+models%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">In vivo thrombus formation in murine models.</a> Circ Res. 100, 979-991 (2007).</li>
<li>Libby, P., Lichtman, A. H., Hansson, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immune+effector+mechanisms+implicated+in+atherosclerosis%3A+from+mice+to+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Immunity%22%5BJournal%5D)">Immune effector mechanisms implicated in atherosclerosis: from mice to humans.</a> Immunity. 38, 1092-1104 (2013).</li>
<li>Ruggeri, Z. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+adhesion+under+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Microcirculation%22%5BJournal%5D)">Platelet adhesion under flow.</a> Microcirculation. 16, 58-83 (2009).</li>
<li>Watson, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+activation+by+extracellular+matrix+proteins+in+haemostasis+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Pharm+Des%22%5BJournal%5D)">Platelet activation by extracellular matrix proteins in haemostasis and thrombosis.</a> Curr Pharm Des. 15, 1358-1372 (2009).</li>
<li>Furie, B., Furie, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thrombus+formation+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Thrombus formation in vivo.</a> J Clin Invest. 115, 3355-3362 (2005).</li>
<li>Li, W., McIntyre, T. M., Silverstein, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ferric+chloride-induced+murine+carotid+arterial+injury%3A+A+model+of+redox+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Ferric chloride-induced murine carotid arterial injury: A model of redox pathology.</a> Redox Biol. 1, 50-55 (2013).</li>
<li>Ghosh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet+CD36+mediates+interactions+with+endothelial+cell-derived+microparticles+and+contributes+to+thrombosis+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Platelet CD36 mediates interactions with endothelial cell-derived microparticles and contributes to thrombosis in mice.</a> J Clin Invest. 118, 1934-1943 (2008).</li>
<li>Chen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vav+guanine+nucleotide+exchange+factors+link+hyperlipidemia+and+a+prothrombotic+state%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Vav guanine nucleotide exchange factors link hyperlipidemia and a prothrombotic state.</a> Blood. , (2011).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD36+participates+in+a+signaling+pathway+that+regulates+ROS+formation+in+murine+VSMCs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">CD36 participates in a signaling pathway that regulates ROS formation in murine VSMCs.</a> J Clin Invest. 120, 3996-4006 (2010).</li>
<li>Chen, K., Febbraio, M., Li, W., Silverstein, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+specific+CD36-dependent+signaling+pathway+is+required+for+platelet+activation+by+oxidized+low-density+lipoprotein%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">A specific CD36-dependent signaling pathway is required for platelet activation by oxidized low-density lipoprotein.</a> Circ Res. 102, 1512-1519 (2008).</li>
<li>Kurz, K. D., Main, B. W., Sandusky, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+model+of+arterial+thrombosis+induced+by+ferric+chloride%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride.</a> Thromb Res. 60, 269-280 (1990).</li>
<li>Konstantinides, S., Schafer, K., Thinnes, T., Loskutoff, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Plasminogen+activator+inhibitor-1+and+its+cofactor+vitronectin+stabilize+arterial+thrombi+after+vascular+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Plasminogen activator inhibitor-1 and its cofactor vitronectin stabilize arterial thrombi after vascular injury in mice.</a> Circulation. 103, 576-583 (2001).</li>
<li>Leadley, R. J. Jr, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacodynamic+activity+and+antithrombotic+efficacy+of+RPR120844%2C+a+novel+inhibitor+of+coagulation+factor+Xa%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cardiovasc+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Pharmacodynamic activity and antithrombotic efficacy of RPR120844, a novel inhibitor of coagulation factor Xa.</a> J Cardiovasc Pharmacol. 34, 791-799 (1999).</li>
<li>Marsh Lyle, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+thrombin+inhibitor+efficacy+in+a+novel+rabbit+model+of+simultaneous+arterial+and+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Assessment of thrombin inhibitor efficacy in a novel rabbit model of simultaneous arterial and venous thrombosis.</a> Thromb Haemost. 79, 656-662 (1998).</li>
<li>Farrehi, P. M., Ozaki, C. K., Carmeliet, P., Fay, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+arterial+thrombolysis+by+plasminogen+activator+inhibitor-1+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Regulation of arterial thrombolysis by plasminogen activator inhibitor-1 in mice.</a> Circulation. 97, 1002-1008 (1998).</li>
<li>Robertson, J. O., Li, W., Silverstein, R. L., Topol, E. J., Smith, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deficiency+of+LRP8+in+mice+is+associated+with+altered+platelet+function+and+prolonged+time+for+in+vivo+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Deficiency of LRP8 in mice is associated with altered platelet function and prolonged time for in vivo thrombosis.</a> Thromb Res. 123, 644-652 (2009).</li>
<li>Gupta, N., Li, W., Willard, B., Silverstein, R. L., McIntyre, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteasome+proteolysis+supports+stimulated+platelet+function+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Proteasome proteolysis supports stimulated platelet function and thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 34, 160-168 (2014).</li>
<li>Srikanthan, S., Li, W., Silverstein, R. L., McIntyre, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exosome+poly-ubiquitin+inhibits+platelet+activation%2C+downregulates+CD36+and+inhibits+pro-atherothombotic+cellular+functions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Exosome poly-ubiquitin inhibits platelet activation, downregulates CD36 and inhibits pro-atherothombotic cellular functions.</a> J Thromb Haemost. 12, 1906-1917 (2014).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thymidine+phosphorylase+participates+in+platelet+signaling+and+promotes+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Res%22%5BJournal%5D)">Thymidine phosphorylase participates in platelet signaling and promotes thrombosis.</a> Circ Res. 115, 997-1006 (2014).</li>
<li>Le Menn, R., Bara, L., Samama, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructure+of+a+model+of+thrombogenesis+induced+by+mechanical+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Submicrosc+Cytol%22%5BJournal%5D)">Ultrastructure of a model of thrombogenesis induced by mechanical injury.</a> J Submicrosc Cytol. 13, 537-549 (1981).</li>
<li>Li, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD36+participates+in+a+signaling+pathway+that+regulates+ROS+formation+in+murine+VSMCs%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">CD36 participates in a signaling pathway that regulates ROS formation in murine VSMCs.</a> J Clin Invest. 120, 3996-4006 (2010).</li>
<li>Re-examining Acute Eligibility for Thrombolysis Task Force. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review%2C+historical+context%2C+and+clarifications+of+the+NINDS+rt-PA+stroke+trials+exclusion+criteria%3A+Part+1%3A+rapidly+improving+stroke+symptoms%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Review, historical context, and clarifications of the NINDS rt-PA stroke trials exclusion criteria: Part 1: rapidly improving stroke symptoms.</a> Stroke. 44, 2500-2505 (2013).</li>
<li>Mumaw, M. M., de la Fuente, M., Arachiche, A., Wahl, J. K. 3rd, Nieman, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+and+characterization+of+monoclonal+antibodies+against+Protease+Activated+Receptor+4+%28PAR4%29%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Development and characterization of monoclonal antibodies against Protease Activated Receptor 4 (PAR4).</a> Thromb Res. 135, 1165-1171 (2015).</li>
<li>Mumaw, M. M., de la Fuente, M., Noble, D. N., Nieman, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+the+anionic+region+of+human+protease-activated+receptor+4+inhibits+platelet+aggregation+and+thrombosis+without+interfering+with+hemostasis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Targeting the anionic region of human protease-activated receptor 4 inhibits platelet aggregation and thrombosis without interfering with hemostasis.</a> J Thromb Haemost. 12, 1331-1341 (2014).</li>
<li>Modery-Pawlowski, C. L., Kuo, H. H., Baldwin, W. M., Sen Gupta, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+platelet-inspired+paradigm+for+nanomedicine+targeted+to+multiple+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nanomedicine+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">A platelet-inspired paradigm for nanomedicine targeted to multiple diseases.</a> Nanomedicine (Lond). 8, 1709-1727 (2013).</li>
<li>Anselmo, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-like+nanoparticles%3A+mimicking+shape%2C+flexibility%2C+and+surface+biology+of+platelets+to+target+vascular+injuries%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Nano%22%5BJournal%5D)">Platelet-like nanoparticles: mimicking shape, flexibility, and surface biology of platelets to target vascular injuries.</a> ACS Nano. 8, 11243-11253 (2014).</li>
<li>Modery, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heteromultivalent+liposomal+nanoconstructs+for+enhanced+targeting+and+shear-stable+binding+to+active+platelets+for+site-selective+vascular+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Heteromultivalent liposomal nanoconstructs for enhanced targeting and shear-stable binding to active platelets for site-selective vascular drug delivery.</a> Biomaterials. 32, 9504-9514 (2011).</li>
<li>Woollard, K. J., Sturgeon, S., Chin-Dusting, J. P., Salem, H. H., Jackson, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Erythrocyte+hemolysis+and+hemoglobin+oxidation+promote+ferric+chloride-induced+vascular+injury%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Erythrocyte hemolysis and hemoglobin oxidation promote ferric chloride-induced vascular injury.</a> J Biol Chem. 284, 13110-13118 (2009).</li>
<li>Ciciliano, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resolving+the+multifaceted+mechanisms+of+the+ferric+chloride+thrombosis+model+using+an+interdisciplinary+microfluidic+approach%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Resolving the multifaceted mechanisms of the ferric chloride thrombosis model using an interdisciplinary microfluidic approach.</a> Blood. 126, 817-824 (2015).</li>
<li>Barr, J. D., Chauhan, A. K., Schaeffer, G. V., Hansen, J. K., Motto, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Red+blood+cells+mediate+the+onset+of+thrombosis+in+the+ferric+chloride+murine+model%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Red blood cells mediate the onset of thrombosis in the ferric chloride murine model.</a> Blood. 121, 3733-3741 (2013).</li>
<li>Dunne, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cadherin+6+has+a+functional+role+in+platelet+aggregation+and+thrombus+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Cadherin 6 has a functional role in platelet aggregation and thrombus formation.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 32, 1724-1731 (2012).</li>
<li>Lockyer, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((GPVI-deficient+mice+lack+collagen+responses+and+are+protected+against+experimentally+induced+pulmonary+thromboembolism%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">GPVI-deficient mice lack collagen responses and are protected against experimentally induced pulmonary thromboembolism.</a> Thromb Res. 118, 371-380 (2006).</li>
<li>Zhou, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+C-terminal+CGHC+motif+of+protein+disulfide+isomerase+supports+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">The C-terminal CGHC motif of protein disulfide isomerase supports thrombosis.</a> J Clin Invest. , (2015).</li>
<li>Eckly, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+underlying+FeCl3-induced+arterial+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Mechanisms underlying FeCl3-induced arterial thrombosis.</a> J Thromb Haemost. 9, 779-789 (2011).</li>
<li>Day, S. M., Reeve, J. L., Myers, D. D., Fay, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+thrombosis+models%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Murine thrombosis models.</a> Thromb Haemost. 92, 486-494 (2004).</li>
<li>Cooley, B. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+models+of+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Thromb+Res%22%5BJournal%5D)">Murine models of thrombosis.</a> Thromb Res. 129 Suppl 2, S62-S64 (2012).</li>
<li>Gupta, N., Li, W., McIntyre, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Deubiquitinases+Modulate+Platelet+Proteome+Ubiquitination%2C+Aggregation%2C+and+Thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Deubiquitinases Modulate Platelet Proteome Ubiquitination, Aggregation, and Thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 35, 2657-2666 (2015).</li>
<li>Konstantinides, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+antithrombotic+consequences+of+platelet+glycoprotein+Ibalpha+and+VI+deficiency+in+a+mouse+model+of+arterial+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Thromb+Haemost%22%5BJournal%5D)">Distinct antithrombotic consequences of platelet glycoprotein Ibalpha and VI deficiency in a mouse model of arterial thrombosis.</a> J Thromb Haemost. 4, 2014-2021 (2006).</li>
<li>Versteeg, H. H., Heemskerk, J. W., Levi, M., Reitsma, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+fundamentals+in+hemostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">New fundamentals in hemostasis.</a> Physiol Rev. 93, 327-358 (2013).</li>
<li>Yan, S. F., Mackman, N., Kisiel, W., Stern, D. M., Pinsky, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia%2FHypoxemia-Induced+activation+of+the+procoagulant+pathways+and+the+pathogenesis+of+ischemia-associated+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Hypoxia/Hypoxemia-Induced activation of the procoagulant pathways and the pathogenesis of ischemia-associated thrombosis.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 19, 2029-2035 (1999).</li>
<li>Rahaman, S. O., Li, W., Silverstein, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vav+Guanine+nucleotide+exchange+factors+regulate+atherosclerotic+lesion+development+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Vav Guanine nucleotide exchange factors regulate atherosclerotic lesion development in mice.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33, 2053-2057 (2013).</li>
<li>Silverstein, R. L., Li, W., Park, Y. M., Rahaman, S. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+cell+signaling+by+the+scavenger+receptor+CD36%3A+implications+in+atherosclerosis+and+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Trans+Am+Clin+Climatol+Assoc%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of cell signaling by the scavenger receptor CD36: implications in atherosclerosis and thrombosis.</a> Trans Am Clin Climatol Assoc. 121, 206-220 (2010).</li>
<li>Liu, J., Li, W., Chen, R., McIntyre, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circulating+biologically+active+oxidized+phospholipids+show+on-going+and+increased+oxidative+stress+in+older+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biol%22%5BJournal%5D)">Circulating biologically active oxidized phospholipids show on-going and increased oxidative stress in older male mice.</a> Redox Biol. 1, 110-114 (2013).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Le FeCl 3 induite par le modèle est l&#39; un des modèles de thrombose les plus largement utilisés, qui peut non seulement fournir des informations précieuses sur les modifications génétiques sur la fonction plaquettaire et la thrombose 7,8,16,19,31-33, mais peut aussi être un outil précieux pour l&#39; évaluation des composés thérapeutiques et des stratégies pour le traitement et la prévention des maladies athérothrombotiques 11,17,34-37. Ici, nous avons montré nos modifications et amél...

La thrombose artérielle (caillot de sang) est une complication fréquente de nombreuses maladies systémiques associées à une inflammation chronique, y compris l&#39;athérosclérose, le diabète, l&#39;obésité, le cancer et les troubles rhumatologiques auto-immunes chroniques. Thrombus qui se produisent dans la tige de la circulation artérielle de l&#39;activation plaquettaire inappropriée, l&#39;agrégation et les mécanismes coagulatory ultérieurs, et sont impliqués dans les crises cardiaques, accidents vasculaires cérébraux et la perte de l&#39;extrémité. La paroi du récipient est un système complexe qui comprend plusieurs types de cellules et elle est influencée par une multitude de facteurs extérieurs , y compris la contrainte de cisaillement, les cellules sanguines circulantes, des hormones et des cytokines, ainsi que l&#39; expression des protéines anti - oxydantes dans la paroi du vaisseau. Expériences in vitro ne peuvent pas se répliquer cet environnement complexe et donc des études in vivo sur des modèles animaux sont essentiels pour permettre une meilleure compréhension des mécanismes impliqués dans les troubles thrombotiques. Les souris ont démontré que simmécanismes ilaires aux humains en termes de la thrombose, l&#39; athérosclérose, l&#39; inflammation et le diabète 1,2. En outre, les souris transgéniques et knock-out peuvent être créés pour tester la fonction des produits spécifiques du gène dans un complexe physiologique ou de l&#39;environnement pathologique. De telles études imitent la pathologie humaine et peuvent fournir des informations mécaniste importantes liées à la découverte de nouvelles voies et de thérapies, ainsi que de fournir des détails importants pour caractériser les effets des médicaments sur la thrombose. Thrombus artériels pathologiques sont dues à une lésion endothéliale de couche ou d&#39;un dysfonctionnement et l&#39; exposition du flux sanguin vers la matrice subendothelial 3,4. Différents modèles de thrombose ont été développés pour induire ces dommages endothéliaux tels que les lésions mécaniques, une lésion par oxydation à base de Bengale composé photoréactif Rose et 5 blessure au laser. Dans ce spectre, le chlorure ferrique (FeCl 3) induite par une lésion vasculaire est un modèle largement utilisé de la thrombose. Ce réactif lorsqueappliquée sur la face externe des vaisseaux induit des dommages oxydatifs des cellules vasculaires 6-8, avec une perte de protection des cellules endotheliales à partir de plaquettes et les composants de la cascade de coagulation en circulation. Le modèle FeCl3 est simple et sensible à la fois des médicaments anticoagulants et antiplaquettaires, et a été réalisée sur la carotide et des artères fémorales, les veines jugulaires et mésentériques et les arterioles crémaster et veinules chez les souris, les rats, les cobayes et les lapins 6-15. Un paramètre mesurable dans ce modèle est le temps écoulé de la blessure à l&#39; occlusion complète du vaisseau, mesurée comme la cessation de l&#39; écoulement sanguin avec un débitmètre doppler ou sous observation directe avec la microscopie intravitale 6,7,9. Une plage de temps comprise entre 5 et 30 min a été rapporté dans plusieurs études chez des souris C57BL6 7-10,16, ce qui suggère que FeCl 3 concentrations, les types d&#39;anesthésie, les techniques chirurgicales, l&#39; âge de la souris, fond génomique, la méthode de mesure de bflux lood, et d&#39;autres variables environnementales ont des effets significatifs dans ce modèle. Cette grande variabilité rend difficile de comparer les études de différents groupes de recherche et peut détecter des différences subtiles difficiles. Une vision de minimiser ces variabilités et établir une manière uniforme et reproductible dans un système de modèle in vivo, nous avons affiné le modèle d&#39;artère carotide FeCl 3 induite par le fait que les données hautement reproductibles avec une variation minimale 6-10,16-19. Dans cet article, nous décrivons et partageons les compétences et présentons plusieurs exemples expérimentaux représentatifs qui peuvent bénéficier de ce modèle.

<table><tbody><tr><td>Ciseaux chirurgicaux - Carbure de tungstène</td><td>Fine Science Tools&nbsp ;</td><td>14502-14</td> Pince Micro-Adson pour <td>couper et maintenir la peau</td></tr><tr><td>- Dentelée/Droite/12 cm</td><td>Outils de science fine&nbsp ;</td><td>11018-12</td><td>Couper et maintenir la peau</td></tr><tr><td>Ciseaux Metzenbaum Fino - Carbure de tungstène/Courbé/Émoussé-émoussé/14,5 cm</td><td>Outils de science fine&nbsp ;</td><td>14519-14&nbsp ; &nbsp ;</td><td>pour disséquer et séparer les tissus mous</td></tr><tr><td>Hémostat ultra fin - Lisse/Courbé/12,5 cm</td><td>Outils de science fine&nbsp ;</td><td>13021-12</td><td>pour disséquer et séparer les tissus mous</td></tr><tr><td>Pince Graefe - Dentelée/Droite/10 cm</td><td>Outils de science fine&nbsp ;</td><td>11050-10</td><td>pour disséquer et séparer les tissus mous</td></tr><tr><td>Dumont #5 Fine Forceps - Biology Tips/Straight/Inox/11 cm</td><td>Fine Science Tools&nbsp ;</td><td>11254-20&nbsp ;</td><td>Isoler le vaisseau du tissu environnant</td></tr><tr><td>Pince #5XL Dumont - Pointes Standard/Droite/Inox/15 cm</td><td>Outils Scientifiques Fins</td><td>11253-10</td><td>Isoler le récipient du tissu environnant</td></tr><tr><td>Crochet émoussé - 12 cm/0,3 mm Diamètre</td> de <td>la pointe Outils scientifiques fins.</td><td>10062-12</td><td>Isoler le vaisseau du tissu environnant</td></tr><tr><td>Castroviejo Micro Needle Holders</td><td>Fine Science Tools&nbsp ;</td><td>12061-02</td><td>Porte-aiguilles</td></tr><tr><td>Fil de suture 4-0</td><td>Fine Science Tools&nbsp ;</td><td>18020-40</td><td>Pour fixer les incisives à la plaque</td></tr><tr><td>Fil de suture 6-0</td><td>Outils de science fine&nbsp ;</td><td>18020-60</td><td>Pour toutes les chirurgies et ligatures Aiguilles</td></tr> de <tr><td>suture Kalt</td><td>Outils scientifiques fins&nbsp ;</td><td>12050-03</td><td></td></tr><tr><td>rhodamine 6G&nbsp ;</td><td>Sigma</td><td>83697-1G</td><td>Pour lebel plaquettes</td></tr><tr><td>FeCl3 (Anhydre)</td><td>Sigma</td><td>12321</td><td>Pour induire des lésions vasculaires</td></tr><tr><td>Chlorhydrate de papavérine</td><td>Sigma</td><td>P3510</td><td>Pour inhiber le péristaltisme intestinal.</td></tr><tr><td>Medline Instrument Chirurgical Stérilisation Vapeur Autoclave Rubans</td><td>Medline</td><td>111625</td><td>Pour fixer la souris à la plaque</td></tr><tr><td>Fisherbrand&trade ; &nbsp ; Filtres pour seringues - Stériles 0,22 & micro ; m</td><td>Fisher</td><td>09-720-004</td><td>Pour la stérilisation de solutions injectées à des souris Fisherbrand</td></tr><tr><td>&trade ; &nbsp ; Filtres pour seringues - Stériles 0,45 & micro ; m</td><td>Fisher</td><td>09-719D</td><td>Pour filtrer la solution de FeCl3</td></tr><tr><td>Tampon de préparation à l’alcool stérile</td><td>Fisher</td><td>06-669-62</td><td>Pour stériliser le site chirurgical</td></tr><tr><td>Agarose&nbsp ;</td><td>BioExpress</td><td>E-3120-500</td><td>Pour fabriquer</td></tr> un <tr><td>microscope fluorescent Leica DMLFS</td> à platine gel, <td>un microscope Leica</td><td></td><td></td> Intravital</tr>, une <tr><td>plate-forme GIBRALTAR et un système de platine X-Y avec plaque chauffante fixée.</td><td>npi electronic GmbH</td><td></td><td>http://www.npielectronic.de/products/micropositioners/burleigh/gibraltar.html</td></tr><tr><td>Streampix version 3.17.2 logiciel</td><td>NorPix</td><td></td><td>https://www.norpix.com/</td></tr></tbody></table>

ferriques murin thrombose modèles induits par chlorure

Ferric Chloride-induced Murine Thrombosis Models

La thrombose artérielle (caillot sanguin) est une complication fréquente de nombreuses maladies systémiques associées à l’inflammation chronique, notamment l’athérosclérose, le diabète, l’obésité, le cancer et les troubles rhumatologiques auto-immuns chroniques. Les thrombus sont la cause de la plupart des crises cardiaques, des accidents vasculaires cérébraux et de la perte des extrémités, ce qui fait de la thrombose un problème de santé publique extrêmement important. Étant donné que ces thrombus résultent d’une activation plaquettaire inappropriée et d’une coagulation ultérieure, le ciblage thérapeutique de ces systèmes a une importance clinique importante pour le développement de traitements plus sûrs. En raison de la complexité du système hémostatique, les expériences in vitro ne peuvent pas reproduire les interactions de la paroi du sang vers les vaisseaux ; Par conséquent, les études in vivo sont essentielles pour comprendre les mécanismes pathologiques de formation de thrombus. À cette fin, divers modèles de thrombose ont été développés chez la souris. Parmi eux, les lésions vasculaires induites par le chlorure ferrique (FeCl3) sont un modèle largement utilisé de thrombose occlusive qui rapporte l’activation et l’agrégation plaquettaires dans le contexte d’un système vasculaire fermé aseptique. Ce modèle est basé sur les lésions des cellules endothéliales induites par l’oxydoréduction, qui sont simples et sensibles aux médicaments anticoagulants et antiplaquettaires. Le temps nécessaire au développement d’un thrombus qui obstrue le flux sanguin donne une mesure quantitative des lésions vasculaires, de l’activation et de l’agrégation plaquettaires qui est pertinente pour les maladies thrombotiques. Nous avons considérablement affiné ce modèle de thrombose vasculaire induite par FeCl3, ce qui rend les données hautement reproductibles avec une variation minimale. Nous décrivons ici le modèle et présentons des données représentatives de plusieurs montages expérimentaux qui démontrent l’utilité de ce modèle dans la recherche sur la thrombose.

Carotidienne Thrombose Modèle Chez les souris avec C57BL6 fond, nous recommandons d&#39; utiliser 7,5% FeCl 3 pour traiter la cuve pendant 1 min en tant que point de départ. Sous traitement de 7,5% FeCl 3, les frontières de la zone lésée et la paroi du vaisseau normal sont facilement identifiables au microscope (voir la vidéo en ligne 1), ce qui suggère que la couche endothéliale a été considérablement endomm...

Nous rapportons une procédure raffinée du chlorure ferrique (FeCl 3) Les modèles de thrombose induites sur la carotide et l&#39; artère mésentérique ainsi que la veine, caractérisé efficacement en utilisant la microscopie intravitale pour surveiller le temps de formation de thrombus occlusif.

Ferriques murin Thrombose modèles induits par Chlorure

Arterial thrombosis (blood clot) is a common complication of many systemic diseases associated with chronic inflammation, including atherosclerosis, ...

L'objectif général de cette procédure est de provoquer une thrombose induite par le chlorure ferrique dans un modèle de l'artère carotide de souris, afin d'obtenir des résultats hautement reproductibles analysés par microscopie intravitale. Ces souris peuvent aider à répondre à des questions clés concernant diverses maladies ou troubles génétiques associés à l'activation des plaquettes et à l'agrégation dans un système vasculaire fermé. Le principal avantage de cette technique réside dans sa simplicité, sa sensibilité aux médicaments anticoagulants et antiplaquettaires, ainsi que dans sa possibilité d'être combinée avec d'autres techniques.Cette méthode peut être utilisée pour obtenir des informations précieuses sur la physiopathologie de la thrombose, découvrir de nouveaux mécanismes et traitements, et évaluer les effets de nouveaux médicaments, notamment la nanomédecine ciblée, sur la thrombose. La visualisation de cette méthode est essentielle pour apprendre les stratégies permettant d'obtenir un temps précis d'arrêt du flux sanguin. Après avoir confirmé l'absence de réponse à une pincée des orteils, utilisez de petits tondeuses électriques pour animaux afin de raser les poils du cou et du haut du thorax d'une souris âgée de huit à douze semaines.Appliquer un onguent oculaire neutre au pétrole sur les yeux de l'animal, et fixer la souris en position dorsale sur le couvercle d'une plaque de culture tissulaire de 15 centimètres à l'aide de ruban adhésif. Passer un fil de suture 4-0 autour des incisives, puis fixer les extrémités du fil au couvercle avec du ruban adhésif afin de maintenir le cou droit. Ensuite, déplacer l'animal sous une source lumineuse chirurgicale et stériliser le site opératoire à l'aide d'un tampon imbibé d'alcool.Ensuite, utilisez une pince Micro-Adson pour saisir la peau, et utilisez des ciseaux chirurgicaux pour pratiquer une incision de deux à trois millimètres. En tenant l'incision avec la pince, insérez les ciseaux avec les lames fermées, puis poussez les ciseaux sous-cutanément en direction du manubrium. Ouvrez ensuite les lames pour détacher la peau de la couche sous-cutanée.Effectuez maintenant une incision médiane allant du manubrium jusqu'au bord de l'os hyoïde, puis utilisez un hémostat fin et une pince de Graefe pour disséquer par émousse la fine aponévrose située entre la glande sous-maxillaire. Lorsque la trachée est visible, utilisez la pince pour maintenir les tissus mous situés à droite du manubrium, puis insérez l'hémostat sous l'aponévrose en direction de la position correspondant à deux heures. Ouvrez les mâchoires de l'hémostat afin de libérer la veine jugulaire des tissus environnants.Ensuite, poursuivre l'incision à travers la fascia, les tissus mous et la peau jusqu'à la position de deux heures, jusqu'à ce que la veine jugulaire droite soit exposée. Fixer maintenant une aiguille de 30 gauge à une seringue d'un millilitre contenant 100 microlitres de solution de rhodamine 6G, puis utiliser une pince à aiguille pour courber de deux à trois millimètres l'extrémité de l'aiguille à 90 degrés. Puis, tenant la seringue d'une main et les tissus mous au niveau distal de la veine jugulaire avec la pince de Graefe de l'autre main, introduire l'aiguille dans le vaisseau.Stabilisez l'aiguille avec la pince et injectez la rhodamine. Une fois que toute la solution de marquage des plaquettes a été administrée, pincez le site d'injection avec la pince pour éviter tout saignement en ouvrant l'hémostat et en insérant l'instrument sous la pince afin de comprimer la paroi du vaisseau au site d'injection. Ensuite, utilisez un fil de suture 6-0 pour ligaturer le site d'injection.Disséquez par section émoussée les tissus mous et la fascia entourant la glande sous-maxillaire gauche, puis tirez la glande vers la position correspondant à sept heures afin d'exposer le muscle sterno-cléido-mastoïdien gauche. Ensuite, disséquez par section émoussée la fascia située entre le muscle sterno-cléido-mastoïdien gauche et les muscles omohyoïdien et sterno-hyoïdien jusqu'au côté gauche de la trachée. Une fois la fascia déplacée, passez une aiguille munie d'un fil de soie 6-0 de 15 centimètres sous la partie médiane du muscle sterno-cléido-mastoïdien, puis tirez les deux extrémités du fil latéralement vers la position correspondant à dix heures.Séparez franchement les muscles sterno-hyoïdien et omohyoïdien afin d'exposer l'artère carotide. Ensuite, utilisez le clamp pour disséquer les tissus mous de l'artère carotide sans toucher l'artère elle-même. À l’aide d’une pince fine, soulevez le fascia latéral entourant l’artère carotide tout en évitant le nerf vague et l’artère.Ensuite, utilisez une autre pince à pointe fine pour percer la fascia située entre l'artère carotide et le nerf vague. Passez maintenant un crochet contondant à travers l'ouverture pour soulever délicatement l'artère carotide, puis glissez la pince à pointe fine sous l'artère. En déplaçant le crochet et la pince dans des directions opposées le long de l'artère, retirez environ cinq millimètres de tissu mou adventice du vaisseau par rapport au tissu environnant.Ensuite, rincez un morceau de plastique en forme de U avec du sérum physiologique, puis utilisez le crochet pour soulever délicatement l'artère afin de permettre le positionnement du plastique sous l'artère. Le plastique bloquera la fluorescence de fond, empêchant la diffusion de la solution de chlorure ferrique vers les tissus environnants, et garantit que seule l'artère carotide est visible au microscope. Hydratez immédiatement l'artère carotide avec deux à trois gouttes de sérum physiologique.Ensuite, transférez la souris sur la platine d'un microscope à fluorescence sous l'objectif à eau 10X, et remplissez l'espace entre l'objectif et l'artère avec du sérum physiologique. Lancez maintenant l'application logicielle d'enregistrement vidéo numérique, et acquérez des images du vaisseau normal. Si la paroi du vaisseau est intégrée et non lésée, transférez la souris sur la plateforme Gibraltar, puis utilisez le coin d'un morceau de papier absorbant pour éponger soigneusement le sérum physiologique autour de l'artère carotide dans le champ opératoire, sans toucher l'artère.Ensuite, utilisez une pince fine pour transférer un morceau de papier-filtre saturé en chlorure ferrique directement sur l'artère carotide, près de l'extrémité distale de l'artère exposée. Veillez à placer le papier-filtre près de l'extrémité distale de la carotide exposée, ce qui permettra de conserver un court segment du côté proximal pour observer le flux sanguin lors de la phase ultérieure de la lésion. Après une minute, retirez le papier-filtre et rincez l'artère avec au moins deux millilitres de solution saline.Replacer la souris sur la platine du microscope et acquérir des images du vaisseau. La formation du thrombus peut être identifiée par l'accumulation des plaquettes fluorescentes. Continuer à acquérir des images du vaisseau pendant 10 secondes chaque minute pendant les 10 premières minutes, puis pendant 10 secondes toutes les deux minutes jusqu'à la fin de l'expérience.Une perfusion de l'activateur tissulaire du plasminogène cinq minutes après une lésion par chlorure ferrique démontre le début de la thrombolyse environ quatre minutes après le traitement. Les thrombus formés présentent des variations répétées de taille au cours de la période d'observation de 30 minutes, mais sans abolition complète du thrombus médié par les plaquettes. Un traitement par un anticorps polyclonal dirigé contre PAR4, qui retarde le clivage de PAR4, prolonge de manière significative le temps nécessaire à la formation d'un thrombus occlusif dans le modèle de thrombose de l'artère carotide induite par le chlorure ferrique.Les expériences de marquage des globules rouges non plaquettaires indiquent que, bien que les thrombus induits par le chlorure ferrique soient composés exclusivement de plaquettes adhérentes à la paroi vasculaire, les globules rouges s'incorporent néanmoins au sein du thrombus, contribuant à sa forme et à son caractère occlusif au fil du temps. Curieusement, bien que le thrombus initial soit visualisé environ 15 secondes après la lésion de l'artère et de la veine mésentériques, la formation du thrombus dans les vaisseaux mésentériques est nettement retardée, atteignant environ 17 minutes dans la veine mésentérique et près de 24 minutes dans l'artère mésentérique, en partie en raison de la diffusion du chlorure ferrique à travers le tissu adipeux entourant les vaisseaux mésentériques.Une fois maîtrisé, ce modèle de thrombose induite par une lésion au chlorure ferrique peut être réalisé en environ 30 à 60 minutes, selon le degré de maîtrise, à condition d'être effectué correctement. Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de garder à l'esprit que la mesure qu'elle nous permettra d'obtenir est le temps écoulé entre la lésion et l'occlusion complète du vaisseau, et une observation précise du flux sanguin est essentielle pour obtenir des résultats fiables. Ce modèle peut être combiné à une transfusion de plaquettes de type sauvage traitées ex vivo afin de simuler des invalidations spécifiques aux plaquettes et ainsi définir la fonction des voies de régulation plaquettaires.Cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la biologie vasculaire pour explorer non seulement le rôle des plaquettes dans la thrombose, mais aussi dans diverses autres conditions inflammatoires de l'endothélium. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment mettre en place un modèle de thrombose de l'artère carotide induite par le chlorure ferrique chez la souris afin d'obtenir des résultats hautement reproductibles à l'aide d'un microscope intravital. N'oubliez pas que le chlorure ferrique peut être extrêmement dangereux et que des précautions, telles que le port d'équipements de protection individuelle adéquats, doivent toujours être prises lors de la réalisation de ce modèle.

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Médecine

Le modèle de thrombose induite par FeCl3 chez la souris est décrit ici. Une méthode de surveillance de la croissance d’un thrombus par observation par microscopie intravitale sur un vaisseau mésentérique et par mesure du débit sanguin dans l’artère carotide est présentée.

Chlorure ferrique induite souris thrombose type sur l&#39;artère carotide et Mesentery navire

Nous présentons ici les modifications nécessaires pour un bien caractérisé et couramment utilisé petit induite par le chlorure ferrique (FeCl3) artère carotide blessure modèle animal pour une utilisation dans un modèle de grandes lésions vasculaires chez les animaux. Le modèle résultant peut être utilisé pour une évaluation du procès préclinique d’interventions pharmacologiques et mécaniques, prophylactiques et thrombolytiques.

Thrombose de l’artère carotide Canine induite par le chlorure ferrique : Un grand modèle Animal de lésion vasculaire

Le présent protocole décrit comment utiliser une lésion médiée par FeCl3 pour induire une thrombose artérielle, et comment collecter et préparer des échantillons de lésions artérielles à différents stades de la thrombose pour l’analyse en microscopie électronique.

Thrombose artérielle induite par le chlorure ferrique et prélèvement d’échantillons pour analyse en microscopie électronique 3D

Cette étude présente un protocole pour établir un modèle de rat reproductible et mini-invasif de la thrombose du sinus sagittal supérieur induite par le chlorure ferrique, en utilisant une méthode de suture de soie combinée à l’imagerie laser par contraste de taches et à une échographie haute résolution pour l’évaluation.

Établissement d’une thrombose du sinus sagittal supérieur modifiée induite par le chlorure ferrique

L'induction d'électrolyse de l'activation endothéliale à la surface interne de la veine cave inférieure des résultats dans la formation de thrombus veineux de type due à l'activation endothéliale et de sang partielle stase, deux composantes de la triade de Virchow.

Électrolytique veine cave inférieure Modèle (EIM) de la thrombose veineuse

La souris modèle complet stase de la veine cave inférieure thromboses rendements quantités mesurables de tissu paroi veineuse et thrombose. Il s'est avéré utile pour évaluer les interactions entre la paroi de la veine et le thrombus occlusif et à évaluer la progression de l'aiguë de l'inflammation chronique.

Modèle de souris complète stase de la veine cave inférieure thrombose

Analyse du contenu Fat est effectuée couramment dans les études utilisant des modèles murins d'obésité. Méthodes émergentes en imagerie CT petit animal et de l'analyse fournissent des détails riches analyse longitudinale teneur en matières grasses. Ici pas de détails, nous en étape, les procédures pour effectuer les petits animaux imagerie CT, l'analyse et la visualisation.

Segmentation et évaluation des volumes FAT dans les modèles murins d&#39;obésité Utilisation de X-ray Computed Tomography

Nous décrivons des procédures pour quantifier et caractériser les lésions athéroscléreuses dans des modèles murins en utilisant une section de précision du sinus aortique et de l’aorte ascendante combinée à une analyse histochimique et immunohistochimique.

Analyse quantitative et caractérisation des lésions d&#39;athérosclérose dans le murin aortique Sinus

Des modèles précliniques d’hémorragie intracérébrale sont utilisés pour imiter certains aspects de la maladie clinique. Ainsi, les mécanismes de lésion et les stratégies thérapeutiques potentielles peuvent être explorés. Dans ce protocole, deux modèles d’hémorragie intracérébrale sont décrits, les injections intrastriatales (ganglions de la base) de sang autologue ou de collagénase.

Injection intrastriatale de sang autologue ou Clostridium collagénase comme modèles murins de Hémorragie intracérébrale

Le cancer est une maladie complexe qui est influencé par les tissus entourant la tumeur ainsi que locale pro- et anti-inflammatoires des médiateurs. Par conséquent, les modèles d'injection orthotropes, plutôt que sous-cutanées modèles peuvent être utiles pour étudier la progression du cancer d'une manière qui imite mieux de pathologie humaine.

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Découvrez un modèle de thrombose induite par chlorure ferrique chez la souris pour étudier la biologie vasculaire. Cette méthode par microscopie intravitale permet d'évaluer les effets des anticoagulants et antiplaquettaires.

Ferriques murin Thrombose modèles induits par Chlorure

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