Phagosome Migration et Velocity Mesurée en direct primaire des macrophages humains infectés par le VIH-1

L’objectif général de cette analyse est de quantifier la vitesse des phagosomes dans les macrophages infectés par le VIH-1 à l’aide d’une méthode simple de suivi manuel. L’avantage de ce protocole est de fournir une méthode simple pour calculer les mouvements relatifs de groupes d’objets à l’intérieur d’une cellule qui peuvent être soit en mouvement, soit déformés. Cette méthode donne un aperçu du mouvement des phagosomes dans les macrophages infectés positifs à la GFP, mais elle pourrait être utilisée pour d’autres compartiments intercellulaires dans les cellules marquées par fluorescence.

Après avoir infecté des macrophages dérivés de monocytes humains et opsonisé des cellules sanguines élevées chez le mouton, selon le protocole textuel, mettez en place un test de phagocytose à l’aide d’un système d’imagerie confocale, tel qu’un microscope à disque rotatif, équipé d’une chambre de chauffage à 37 degrés Celsius, avec du dioxyde de carbone. Avant l’expérience, allumez la chambre de chauffe pour chauffer la platine du microscope à 37 degrés Celsius. Allumez ensuite le microscope et l’ordinateur, puis chargez le logiciel d’imagerie.