Symmetric Bihemispheric Postmortem cerveau de coupe pour étudier en santé et états pathologiques du cerveau chez les humains

L’objectif global de cette procédure est de collecter et d’analyser systématiquement une série constante de régions cérébrales disséquées symétriquement à partir des deux hémisphères du cerveau humain afin d’évaluer la gravité, le stade pathologique clinique et la distribution hémisphérique de diverses maladies cérébrales. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la neuropathologie en fournissant une collection systématiquement organisée de données neuropathologiques qualitatives et quantitatives pour des corrélations pathologiques cliniques détaillées et d’imagerie. Le principal avantage de cette technique consiste à fournir des données pertinentes relatives aux processus pathologiques en soi ainsi qu’à l’aspect histofonctionnel spécialisé de chaque hémisphère cérébral.

Après avoir fixé le tissu cérébral humain post-mortem selon le protocole de texte, placez le cerveau sur une surface plane avec les pôles frontaux dirigés vers l’opposé de l’enquêteur. Orientez le cerveau pour permettre une visualisation complète et claire de tous les gyri et sillons corticaux de l’ensemble du cerveau. Examinez le tissu à la recherche d’anomalies méningées, d’asymétries hémisphériques macroscopiques, d’allégeance tissulaire macroscopique, de malformations congénitales, d’anomalies vasculaires ou de toute autre anomalie ou présentation inhabituelle de la surface cérébrale.

Avec les pôles frontaux orientés à l’opposé de l’enquêteur et les aspects superficiels des hémisphères face à l’investigateur, prenez autant de photos numériques que nécessaire pour documenter les macro-anomalies possibles et pour tenir compte des considérations cliniques, neuronales, anatomiques et post-incision possibles. Prenez des photos numériques perpendiculairement au cerveau pour capturer toute la surface corticale. Ensuite, à l’aide d’encre ou d’aiguilles colorées, marquez les gyri corticaux centraux avant et post.

Ensuite, avec les pôles frontaux toujours tournés vers l’extérieur, retournez le cerveau à 180 degrés, puis inspectez soigneusement la base du cerveau en accordant une attention particulière aux systèmes cérébrovasculaires et aux nerfs crâniens aux niveaux de sortie et d’entrée du tronc cérébral. Gérez les bulbes et les voies olfactives avec un soin particulier pour éviter la lacération des tissus due à leur extrême fragilité. Prenez des photos numériques perpendiculairement au cerveau pour capturer l’intégralité des surfaces corticales et du tronc cérébral.

Face à la base du cerveau et à l’aide d’un scalpel, coupez le tronc cérébral transversalement à la partie supérieure du pont le plus près possible de la base du cerveau. Inspectez soigneusement la substance noire pour détecter toute pâleur et inspectez les autres structures voisines. À l’aide d’un appareil d’enregistrement audio, notez toute apparence inhabituelle du cerveau par rapport à un cerveau normal.

Ici, le bulbe olfactif et le tractus de l’hémisphère gauche puis de l’hémisphère droit sont disséqués. Retournez le cerveau et, à l’aide d’un couteau bien aiguisé, suivez une direction fronto-occipitale pour séparer les deux hémisphères en coupant le corps calleux au centre à travers la fissure longitudinale médiale. Inspectez chaque côté de chaque hémisphère pour détecter d’éventuelles anomalies.

Après avoir pris autant de photos que nécessaire, y compris perpendiculairement au cerveau pour capturer toute la surface corticale, placez les deux hémisphères à plat sur leurs faces médiales, les lobes frontaux tournés vers l’arrière de l’enquêteur et leurs centres se touchant. À l’aide d’un couteau bien aiguisé, coupez manuellement les deux hémisphères cérébraux en commençant par les pôles frontaux et en vous déplaçant vers les pôles occipitaux sur toute la longueur des hémisphères pour obtenir deux séries de plaques d’un centimètre d’épaisseur de tissu cérébral. Positionnez les dalles cérébrales dans une séquence anatomique et symétrique sur une surface blanche plane avec une règle imprimée dessus pour la photographie.

Assurez-vous que les surfaces coronales de la dalle sont visibles pour l’inspection directe à l’œil nu et la photographie numérique. Utilisez des surfaces de coupe avec des grilles millimétriques imprimées des deux côtés pour localiser les structures cérébrales, les tailles et les anomalies possibles de manière plus précise. Avec les surfaces coronales visibles, prenez des photographies numériques perpendiculairement pour capturer toute la surface corticale.

Prenez des notes sur tout aspect inhabituel du cerveau par rapport à un cerveau normal. Ensuite, à l’aide d’un scalpel bien aiguisé, disséquez manuellement de petits blocs rectangulaires de tissu cérébral pour chaque région cérébrale établie. Suivez le schéma de prélèvement de la région cérébrale proposé décrit dans ce tableau.

Créez les codes d’identification pour étiqueter les cassettes histo en générant des nombres aléatoires ou semi-aléatoires pour chaque cas où AD signifie Étude de la maladie d’Alzheimer, 16 signifie l’année où l’autopsie a été pratiquée et 0001 est un numéro d’échantillon d’accession progressive. Placez chaque bloc de tissu dans des cassettes histo séparées. Prenez autant de photos numériques que décrit précédemment de l’ensemble du cerveau coupé et des cassettes histo associées.

Après avoir pris une série complète de photos, perforez des morceaux de tissu de deux à cinq millimètres pour l’extraction de l’ADN et l’analyse génétique. Enfin, immergez toutes les cassettes histo contenant des blocs de tissu cérébral dans le même type de solution fixatrice que celle utilisée précédemment et traitez le tissu selon le protocole de texte. Ce tableau décrit quelques données semi-quantitatives préliminaires utilisant une procédure de coupe de cerveau bihémisphérique symétrique effectuée sur une série de cerveaux humains collectés dans la banque de cerveaux.

Les données préliminaires montrent que la plupart des cerveaux témoins de sujets plus âgés étaient en fait positifs pour les plaques névritiques bêta-A et les enchevêtrements tau-neurofibrillaires et que les niveaux de plaques névritiques bêta-A insolubles étaient plus élevés dans le cortex entorhinal gauche et l’hippocampe par rapport aux mêmes régions cérébrales du côté droit. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en une heure pour les cerveaux fixes et en deux heures pour les cerveaux frais si elle est correctement exécutée. Lors de la tentative de cette procédure, il est important de se rappeler que, conformément au schéma de coupe proposé, prélevez chaque région cérébrale des deux hémisphères sur la base d’une connaissance anatomique humaine précise.

À la suite de cette procédure, d’autres méthodes telles que l’extraction d’ADN, d’ARN ou de protéines peuvent être effectuées afin de répondre à des questions supplémentaires telles que quels sont les niveaux d’activation d’un gène spécifique dans une région spécifique du cerveau dans un hémisphère spécifique dans une maladie cérébrale spécifique. À chaque diffusion, cette technique ouvrira la voie aux chercheurs dans le domaine de la neuropathologie, de la pathologie clinique et de la corrélation de pathologie d’imagerie pour explorer les aspects pathologiques liés à l’hémisphère de diverses maladies neuropsychiatriques. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de collecter des régions anatomiques spécifiques des deux hémisphères du cerveau humain pour évaluer la gravité de la maladie, le stade pathologique de la maladie et la distribution hémisphérique des différents processus neuropathologiques.

N’oubliez pas que travailler avec le cerveau humain, c’est travailler avec l’histoire d’une personne avec des circuits neuroanatomiques complexes et éventuellement avec différentes maladies et que les lames, les scalpels, le formol doivent être manipulés avec une extrême précaution.