Name: Mesure progressive neurologique invalidité dans un modèle murin de la sclérose en plaques (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-11-14T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 11 s
Description: Découvrez le test Rotarod optimisé pour évaluer l'invalidité neurologique progressive chez les souris infectées par le virus de Theiler. Cette méthode objective quantifie les fonctions motrices et aide à tester les thérapies contre la sclérose en plaques.

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Les auteurs remercient le personnel du Center for Comparative Medicine and Research (CCMR) de Dartmouth pour les soins experts qu’ils ont prodigués aux souris utilisées pour ces études. Les auteurs remercient également Emily Clough pour son excellent soutien administratif.

Tous les travaux d&#39;animaux utilise des protocoles examinés et approuvés par le Comité institutionnel des animaux soin et l&#39;utilisation (IACUC) à Geisel School of Medicine à Dartmouth. 1. Le modèle de souris <ol><li> L&#39; induction de la maladie démyélinisante induite TMEV <ol><li> Déplacer les cages contenant 4 à 6 semaines d&#39;âge SJL femelle / Jhan souris du rack à un espace de travail confortable. Marquer la souris (par exemple, avec une étiquette d&#39;oreille ou poinçon) pour permettre une évaluation individuelle de la maladie clinique et histologique. </li><li> Dessinez 30 pi de TMEV infectant stock (unités formant 2 x 10 6 de la plaque; PFU) dans du PBS dans un 29-gauge insuline seringue et une aiguille. </li><li> Préparer la machine à gaz d&#39;anesthésie: vérifier le système pour assurer la présence de quantités suffisantes d&#39;oxygène et isoflurane pendant toute la durée de la procédure. </li><li> Allumez le débitmètre à 1 L / min. Placer l&#39;animal dans la chambre d&#39;aspiration et de sceller la partie supérieure. Allumez le vaporizer à 3,5% et de suivre l&#39;animal jusqu&#39;à recumbent. </li><li> Enlever l&#39;animal de la chambre et tester la souris par pincement de la patte pour assurer une anesthésie adéquate. Le manque de réponse à une pincée forte indique une anesthésie adéquate. </li><li> Nettoyer le site d&#39;injection avec 70% d&#39;alcool isopropylique. </li><li> Injecter 30 ul de TMEV infectant stocks dans l&#39;hémisphère cérébral droit par injection à main levée (figure 1). Le site d&#39;injection est à mi-chemin entre la ligne des yeux et de l&#39;oreille et juste à côté de la ligne médiane. </li><li> Retour de la souris dans sa cage de retenue une fois pleinement alerte et mobiles (généralement de 3 - 5 min). </li><li> Euthanize souris par exsanguination cardiaque ou une perfusion de 3 à 6 mois après l&#39;infection TMEV, en fonction de la rapidité du développement de la maladie. </li></ol></li></ol> 2. Rotarod Analyse <ol><li> L&#39;appareil Rotarod <ol><li> souris d&#39;essai avant l&#39;infection TMEV afin de les familiariser avec lemachine et d&#39;évaluer leur contrôle de la coordination de la balance de base et le moteur normal. </li><li> Démarrez le protocole d&#39;adaptation sur les jours -5 après l&#39;infection (dpi, soit 5 jours avant l&#39; infection TMEV). </li><li> Laisser les souris s&#39;acclimater à la salle d&#39;essai pendant au moins 30 min avant Rotarod tests, afin de leur permettre d&#39;adapter à l&#39;environnement. </li><li> Assurez - vous que l&#39;unité Rotarod et l&#39;ordinateur sont branchés et connectés les uns aux autres (figure 2). </li><li> Pré-régler le Rotarod avec les ppp -5 paramètres de protocole de formation, comme décrit dans le tableau 1. </li><li> Enregistrez le fichier de travail avec la date et l&#39;identification des informations. </li><li> Déplacer la cage contenant l&#39;équipe à tester du rack à une table à côté de la Rotarod. Les souris sont généralement testés dans des escouades de 4. </li><li> Ramassez une souris par la queue et le placer sur la tige, opposée à l&#39;opérateur. Répétez l&#39;opération pour la deuxième à la quatrième souris. Si une souris falls ou des sauts, placez-le dans sa voie sur le Rotarod jusqu&#39;à ce que toutes les souris sont en position. Ignorer si des souris se tournent pour faire face à l&#39;opérateur. </li><li> Après le chargement de toutes les souris, appuyez sur la touche &quot;Entrée&quot; pour commencer l&#39;expérience. Observer les minuteries démarrent automatiquement et les rotations par minute (rpm) sur l&#39;écran pour chaque voie. <ol><li> Étant donné que chaque animal tombe de la tige, enregistrer la vitesse de la tige au moment de la chute, ainsi que la durée du temps de l&#39;animal est resté sur la tige. La tige continuera à tourner jusqu&#39;à ce que le dernier animal est tombé de l&#39;ensemble de tige. </li></ol></li><li> Après toutes les souris ont chuté, utiliser un mouchoir pour enlever toute boli fécales et l&#39;urine de la tige. La présence de l&#39;urine et des matières fécales peut affecter la capacité des souris à saisir la tige. <ol><li> Après un repos de 3 minutes, donner aux souris un second, puis un troisième procès. Le temps maximum par procès unique est de 240 sec. Administrer un total de 3 essais au cours de chaque journée de test. </li></ol></li><li> Retour les souris dans leur cage et les retourner à la crémaillère. A la fin de la session expérimentale, nettoyer le Rotarod avec de l&#39;eau et du savon pour enlever toute la matière fécale de la machine. </li><li> Essuyer la plaque de base avec de l&#39;éthanol à 70%. Arroser toute la machine avec du dioxyde de chlore pour désinfecter. </li><li> Les jours - 4, - 3, - 2 et - 1 pi, pré-régler le Rotarod avec les paramètres de protocole de formation appropriés, tel que décrit dans le tableau 1, et répétez les étapes 2.1.2 à 2.1.12. </li><li> Après avoir obtenu les mesures de base, d&#39;infecter les souris avec TMEV. Prévoyez une période de récupération de pi 6 jours. </li></ol></li></ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td rowspan="2"> Protocole </td><td rowspan="2"> Journée Test </td><td rowspan="2"> La fréquence </td><td rowspan="2"> Vitesse de démarrage (rpm) </td><td rowspan="2"> MaxVitesse (rpm) </td><td> Accélération </td><td> Les procès </td><td> ITI </td></tr><tr><td> (rpm / sec) </td><td> (N x sec) </td><td> (min) </td></tr><tr><td rowspan="4"> Entraînement </td><td> - 5 dpi </td><td> Un jour </td><td> 1 </td><td> 12 </td><td> 01/03 </td><td> 3x240 sec </td><td> 3 </td></tr><tr><td> - 4 dpi </td><td> Un jour </td><td> 1 </td><td> 13 </td><td> 01/03 </td><td> 3x240 sec </td><td> 3 </td></tr><tr><td> - 3 dpi </td><td> Un jour </td><td> 1 </td><td> 14 </td><td> 01/03 </td><td> 3x240 sec </td><td> 3 </td></tr><tr><td> - 2; - 1 dpi </td><td> Un jour </td><td> 5 </td><td> 40 </td><td> 01/03 </td><td> 3x240 sec </td><td> 3 </td></tr><tr><td rowspan="2"> Expérimental </td><td> De 7-50 dpi </td><td> 2 semaines </td><td>5 </td><td> 40 </td><td> 05/30 </td><td> 3x240 sec </td><td> 3 </td></tr><tr><td> À partir de 51-150 dpi </td><td> 1 semaine </td><td> 5 </td><td> 40 </td><td> 05/30 </td><td> 3x240 sec </td><td> 3 </td></tr></tbody></table> Tableau 1: Rotarod Paramètres dans la formation et des protocoles expérimentaux. <ol start="2"><li> Le protocole expérimental Rotarod <ol><li> Sur +7 dpi, pré-régler le Rotarod avec les paramètres de protocole expérimentaux appropriés, tel que décrit dans le tableau 1. Répétez les étapes 2.1.2 à 2.1.10. </li><li> À la fin du procès n ° 3, peser chaque souris et faire une note du poids du corps sur la feuille de données. Nettoyer et désinfecter le Rotarod comme par étapes 2.1.11 et 2.1.12. </li><li> Tester les souris deux fois par semaine pendant les 6 semaines suivantes, tel que décrit ci-dessus. Au bout de 6 semaines (dans laquelle les souris ont probablement atteint une phase de plateau) 8,9, tester les souris une fois par semaine avec le même experimental protocole. Le protocole de test réel dure en moyenne 150 jours, selon le cours de la maladie spécifique. </li></ol></li><li> Index fonctionnelle neurologique <ol><li> Exporter les données brutes dans un fichier tableur et analyser les résultats. </li><li> Data Express comme temps de fonctionnement (figure 3A): ceci est le temps de fonctionnement normal , plus le temps de rotation passive , moins le temps de retard de rotation (tableau 2) 10. Calculer le temps moyen en cours d&#39;exécution des trois essais par jour. </li><li> Exprimer les données comme un indice neurologique fonctionnel (NFI, figure 3B). <ol><li> Calculez le seuil de performance de base de chaque souris individuelle. Le seuil de performance de base est déterminée comme étant la moyenne de toutes les durées de fonctionnement du jour + 15 à + 45 pi de 6,7. </li><li> Calculer le NFI comme la moyenne des trois derniers temps moyens de fonctionnement divisé par le seuil de performance de base de ce que 6,7 de souris spécifique &lt;/ Sup&gt;. NOTE: Si le test de fois en cours d&#39;exécution pour une souris le jour + 72, + 76 et + 79 pi sont 55 sec, 45 sec et 50 sec, et le temps de référence pour la même souris était de 135 sec, le NFI pour que la souris sur +79 dpi sera [(45 + 50 + 55) / 3] / 135 ou 0,37. </li></ol></li><li> Exprimer les données comme un NFI ajusté (adjNFI; Figure 3C): ajuster les données NFI par une valeur de la population pour l&#39;expérience unique. <ol><li> Calculer la adjNFI en divisant la valeur NFI par le NFI moyen obtenu par le groupe témoin traité ce jour-là en particulier. </li></ol></li></ol></li></ol><table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td> Terme </td><td> Définition </td></tr><tr><td> temps de fonctionnement normal </td><td> Le temps total de la souris passe en cours d&#39; exécution activement sur la tige tournante, à savoir, la latence à l&#39; automne. </td></tr><tr><td> temps de rotation passive </td><td> Le Amontage de fois que la souris est restée sur la tige dans le mode de rotation passive. </td></tr><tr><td> temps de retard de rotation </td><td> La durée pendant laquelle la souris reste sur la tige pendant le mode de rotation passive </td></tr><tr><td> Mode de rotation passive </td><td> Lorsque la souris saisit la tige et tourne sans avoir à déambuler. </td></tr><tr><td> temps de session total </td><td> Montant total du temps de la souris reste sur la tige tournante pendant la session. </td></tr><tr><td> la performance de base </td><td> les performances du moteur pré-dommages évalués pour déterminer le seuil de performance minimum. </td></tr><tr><td> Neurologique fonction index (NFI) </td><td> Index clinique, qui compare chaque performance du moteur de la souris, à savoir, temps de fonctionnement, à tout moment à ses performances de pointe. </td></tr><tr><td> Ajusté indice de la fonction neurologique (de adjNFI) </td><td> Quand un processus de normalisation est appliquée pour ajuster les données NFI par une valeur de la populationl&#39;expérience unique. </td></tr><tr><td> valeur de la population </td><td> Valeur moyenne NFI obtenue par le groupe témoin traité à un jour précis. </td></tr></tbody></table> Tableau 2: Définitions des Rotarod paramètres adoptés pour Quantifier neurologiques.

<ol><li>Lipton, H. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Theiler%27s+virus+infection+in+mice%3A+an+unusual+biphasic+disease+process+leading+to+demyelination%5BTitle%5D)+AND+%22Infect+Immun%22%5BJournal%5D)">Theiler's virus infection in mice: an unusual biphasic disease process leading to demyelination.</a> Infect Immun. 11, 1147-1155 (1975).</li>
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</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Malgré certaines limites, le test de performance Rotarod représente un outil important pour l&#39;évaluation de la fonction motrice et le dysfonctionnement dans TMEV-IDD ainsi que l&#39;effet des interventions pharmacologiques sur la progression du handicap chez les souris. Le test Rotarod a été décrite pour la première en 1957 comme un outil de mesure des déficits neurologiques chez les rongeurs 11. Rongeurs doivent marcher sur une tige tournante, avec l&#39;augmentation de la vi...

Murins encéphalomyélite virus de Theiler (TMEV) est un virus à ARN simple brin neurotrope qui infecte la persistance du système nerveux central murin (CNS). Chez les souris sensibles, l&#39;infection par TMEV provoque, une maladie démyélinisante à médiation immunitaire chronique progressive, connue comme la maladie démyélinisante TMEV induite (TMEV-IDD). L&#39;infection expérimentale de souris prend une évolution de la maladie ressemblant à celle observée dans les formes progressives de la sclérose en plaques (SEP). TMEV-IDD est caractérisée par deux phases distinctes: la phase aiguë et la phase chronique. La phase aiguë est une légère, généralement subclinique encéphalite 1,2. La deuxième phase, chronique, commençant environ un mois après l&#39; infection, se compose d&#39;un handicap à évolution lente caractérisée par une démyélinisation, l&#39; inflammation et des lésions axonales 1,2. La faiblesse observée chez les souris est associée à la spasticité et, parfois, des spasmes toniques sévères. Parce qu&#39;il n&#39;y a pas actuellement medications pour améliorer l&#39;invalidité progressive chez les patients, les chercheurs sont particulièrement attirés par TMEV-IDD, qui représente un modèle animal optimal pour surveiller l&#39;impact des médicaments modificateurs de la maladie sur la progression de la maladie. Cependant, chez la souris, ainsi que chez les patients atteints de sclérose en plaques, la surveillance de la progression de l&#39;invalidité nécessite une observation clinique continue pendant des périodes de temps prolongées. Chez les souris, la surveillance à long terme pour la progression du handicap peut être accompli avec le test de performance Rotarod. Le test de performance Rotarod est un test de comportement standard qui évalue les fonctions motrices associées telles que la coordination, l&#39;équilibre et la fatigue chez les rongeurs. Les souris doivent garder leur équilibre sur une tige tournante, qui tourne à l&#39;accélération continue; le temps de latence à l&#39;automne de cette tige est enregistrée. Les animaux atteints de troubles neurologiques sont incapables de rester sur la tige de rotation aussi longtemps que les contrôles, et ils tombent normalement quand la vitesse de rotation est supérieure à leurla capacité du moteur. La perte de valeur plus neurologique que les animaux ont, plus vite ils tombent hors de la tige, et plus le temps de latence est. L&#39;avantage du test Rotarod sur les systèmes traditionnels de notation visuelle est qu&#39;il génère un objectif, mesurable variable le temps de latence, qui peut finalement être utilisée pour des analyses statistiques pour quantifier les effets des thérapies et des procédures expérimentales 3. Dans le laboratoire de neuro - immunologie (LONI) à Dartmouth, les souris sont soumises à un protocole d&#39;adaptation, où ils sont testés avant l&#39;infection TMEV afin de les familiariser avec la machine et d&#39;évaluer leur «base» de la coordination de l&#39; équilibre normal et le contrôle moteur 4, 5. Une fois la ligne de base est établie et les souris sont infectées par le TMEV, ils sont testés une fois ou deux fois par semaine sur une période de plusieurs mois. Le protocole de test réel dure en moyenne 150 jours, permettant ainsi une évaluation dele déclin de l&#39;équilibre, la coordination et le contrôle du moteur pendant toute la durée de la maladie démyélinisante. Plusieurs centaines de TMEV-IDD et faux-souris traitées ont été testées à ce jour pour le dysfonctionnement neurologique à Dartmouth. Ces souris avaient reçu divers traitements immunomodulateurs, mais aucun agent pharmacologique n&#39;a été trouvé pour être efficace dans l&#39; amélioration de la progression du handicap 6,7. Le présent article et le protocole lié décrivent comment caractériser l&#39;atteinte neurologique progressive affichée par les souris TMEV-IDD. En particulier, le protocole propose des recommandations de paramètres de test spécifiques jugées généralement appropriées pour étudier le handicap neurologique chez les souris TMEV-IDD en utilisant le test Rotarod. Cette procédure fournit une base de référence pour évaluer (1) la pertinence de ce modèle de souris pour la SP progressive et (2) son utilité pour tester les thérapies visant à traiter les maladies neurologiques progressives telles que la sclérose en plaques. De toute évidence, laRotarod test de performance et le protocole des paramètres de test optimisés et en cours ne sont pas seulement utiles à la détection de handicap neurologique progressive dans le modèle de la souris TMEV-IDD, mais sont également utiles dans la découverte de déficiences dans d&#39;autres modèles viro-induits et / ou souris génétique des maladies neurodégénératives.

<table><tbody><tr><td>Souris SJL/JCrHsd 4 à 6 semaines</td><td>Envigo</td><td>#052</td><td></td></tr><tr><td>TMEV virus stock</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane vaporisateur</td><td>Harvard Apparatus</td><td>#340471</td><td></td></tr><tr><td>Seringues à insuline U-100 29 g x 0,5 cc</td><td>BD</td><td>#328203</td><td></td></tr><tr><td>Rotamex-5 4 voies Rota-Rod pour souris avec RS-232 et logiciel</td><td>Columbus Instruments</td><td>#0890M</td><td></td></tr></tbody></table>

mesure progressive neurologique invalidité dans un modèle murin de la sclérose en plaques

Measuring Progressive Neurological Disability in a Mouse Model of Multiple Sclerosis

Après une infection intracérébrale par le virus de l’encéphalomyélite murine de Theiler (TMEV), les souris SJL sensibles développent une maladie démyélinisante chronique progressive, avec des caractéristiques cliniques similaires aux formes progressives de la sclérose en plaques (SEP). Les souris présentent une invalidité progressive avec perte des fonctions motrices et sensorielles, qui peut être évaluée à l’aide de plusieurs appareils et protocoles. Parmi eux, le test de performance Rotarod est un test comportemental très courant, son avantage étant qu’il fournit des mesures objectives, mais il est souvent utilisé en supposant qu’il est direct et simple. Contrairement aux systèmes de notation visuelle utilisés dans certains modèles de SEP, qui sont très subjectifs, le test Rotarod génère une variable (c’est-à-dire une durée de temps) objective, mesurable et continue, permettant des concordances inter-juges presque parfaites. Cependant, la fiabilité inter-laboratoires n’est obtenue que si les différents paramètres d’essai sont reproduits. Dans ce manuscrit, des recommandations de paramètres d’essai spécifiques, tels que la taille, la vitesse et l’accélération de la tige ; la quantité de formation donnée aux animaux ; et le traitement des données, sont présentés pour le test Rotarod.

Le but de cette expérience représentative était de comparer l&#39;incapacité neurologique induite par la souche Daniels (DA) et la souche bean de TMEV. Aux fins de la présente étude, un groupe de 32 souris SJL femelles ont été infectées par voie intracrânienne avec TMEV, soit la souche DA (n = 16) ou la souche BEAN (n = 16), et leurs signes cliniques ont été suivis au fil du temps. Un groupe supplémentaire de 20 souris a été simulée traitée (ie, une solution saline a été injecté...

Un protocole de test optimisé est présenté dans cet article pour le test de performance Rotarod, utilisé pour mesurer l’incapacité neurologique progressive chez les souris infectées par TMEV.

Mesure progressive neurologique invalidité dans un modèle murin de la sclérose en plaques

After intracerebral infection with the Theiler's Murine Encephalomyelitis Virus (TMEV), susceptible SJL mice develop a chronic-progressive demyelinating ...

L'objectif général de cette procédure est d'évaluer la détérioration neurologique progressive chez les souris atteintes de maladies démyélinisantes chroniques. Nous y parvenons en proposant des recommandations sur les paramètres d'évaluation adaptés à l'étude du handicap neurologique à long terme dans le modèle de sclérose en plaques progressive induite par le virus de Theiler, en utilisant le test du Rotarod. Cette procédure fournit une référence de base permettant d'évaluer la pertinence du modèle murin pour la démyélinisation progressive, ainsi que son utilité pour tester des thérapies visant à traiter des affections neurologiques progressives telles que la sclérose en plaques.L'avantage de ce test optimisé par rapport au système d'évaluation visuel traditionnel est qu'il génère une variable objective permettant de quantifier l'effet à long terme des thérapies et des procédures expérimentales sur les fonctions motrices. Cette procédure sera démontrée par Darlene Royce, technicienne du laboratoire de neuro-immunologie de Dartmouth. Afin d'évaluer la coordination de l'équilibre et le contrôle moteur au départ, commencez le protocole d'adaptation cinq jours avant l'infection par le virus TMEV en laissant d'abord les souris s'acclimater à la salle de test pendant au moins 30 minutes.Pendant que les souris s'acclimatent, préréglez le Rotarod avec les paramètres d'entraînement à moins cinq DPI. Ensuite, prenez une souris par la queue et placez-la sur le cylindre en la faisant face opposée à l'opérateur. Si la souris tombe ou saute, replacez-la dans sa voie sur le Rotarod jusqu'à ce que toutes les souris soient en position.Après avoir chargé les quatre souris, appuyez sur la touche Entrée pour démarrer l'expérience. Assurez-vous que les chronomètres démarrent automatiquement, puis observez le nombre de tours par minute affiché pour chaque voie. Ensuite, dès que chaque animal tombe de la barre, enregistrez la vitesse de la barre au moment de la chute, ainsi que la durée pendant laquelle l'animal est resté sur la barre.Une fois que toutes les souris sont tombées, utilisez un mouchoir en papier pour retirer les bolus fécaux et l'urine de la barre, car la présence d'urine et de matières fécales peut affecter la capacité des souris à s'accrocher correctement à la barre. Après une pause de trois minutes, effectuez un deuxième puis un troisième essai, chaque essai individuel ayant une durée maximale de 240 secondes. Réalisez un total de trois essais au cours de chaque journée de test.Enfin, remettez les souris dans leur cage d'origine. Aux jours moins quatre, moins trois, moins deux et moins un PI, réglez le Rotarod avec les paramètres appropriés du protocole d'entraînement et répétez l'expérience sur le Rotarod. Commencez par déplacer les cages contenant des souris femelles SJL âgées de quatre à six semaines depuis le rack vers un espace de travail confortable.Utilisez des perforations auriculaires pour marquer les souris afin de permettre une évaluation individuelle de la maladie clinique et histologique. Ensuite, aspirez 30 microlitres de la souche infectieuse de TMEV en PBS dans une seringue à insuline munie d'un aiguille de calibre 29. Préparez l'appareil à anesthésie gazeuse en vous assurant qu'il y a des quantités suffisantes d'oxygène et d'isoflurane pour toute la durée de la procédure.Placer l'animal dans la chambre d'induction et en fermer le couvercle. Après quelques minutes, retirer l'animal de la chambre et tester la profondeur de l'anesthésie en pinçant la plante du pied pour s'assurer qu'elle est adéquate. Ensuite, nettoyer le site d'injection avec de l'alcool isopropylique à 70 % et injecter manuellement 30 microlitres de la souche infectieuse de TMEV dans l'hémisphère cérébral droit.Enfin, remettez la souris dans sa cage d’attente une fois qu’elle est complètement réveillée et mobile. Le septième jour après l’infection, réglez le Rotarod avec les paramètres expérimentaux appropriés, puis répétez intégralement l’exercice d’entraînement au Rotarod en utilisant les paramètres du protocole expérimental adéquats. Après la troisième série chaque jour, pesez chaque souris et notez le poids corporel sur la feuille de données.Tester les souris deux fois par semaine pendant les six semaines suivantes de la même manière. Après six semaines, tester les souris une fois par semaine avec le même protocole expérimental pendant une moyenne de 150 jours expérimentaux. Ensuite, analyser les données brutes et les exprimer sous forme d'indice fonctionnel neurologique, ou NFI.Pour déterminer la valeur individuelle de l'INP, calculez le seuil de performance de base de chaque souris comme la moyenne de tous les temps de course entre 15 et 45 jours après l'infection. Ceci permet d'évaluer la performance motrice en raison de la démyélinisation progressive, tout en excluant les déficits concomitants dus à une encéphalite précoce. Ensuite, calculez la valeur de l'INP comme la moyenne des trois temps de course moyens les plus récents divisée par le seuil de performance de base de la souris.Enfin, calculez un NFI ajusté en divisant la valeur du NFI par la valeur moyenne du NFI obtenue par le groupe traité au placebo ce jour précis. Ce graphique montre que les souris infectées par le TMEV présentent des déficits neurologiques significativement accrus au fil du temps par rapport aux souris témoins. Une infection chronique avec deux souches différentes de TMEV a négativement affecté les temps de course des souris.Les deux groupes de souris infectées par le TMEV présentaient des valeurs de NFI significativement plus faibles que celles des souris témoins. En outre, aucune différence n'a été observée dans la progression du handicap entre les souris infectées par la souche BeAn et celles infectées par la souche DA, à tous les points temporels. Après cette procédure, des méthodes d'évaluation visuelle classiques, comme le test du réflexe de redressement, peuvent être réalisées afin d'évaluer rapidement l'état général de santé des souris.Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la sclérose en plaques et des maladies neurodégénératives pour tester l'efficacité des thérapies et d'autres interventions visant à retarder l'incapacité progressive. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière d'évaluer l'incapacité progressive à long terme chez la souris. Cette procédure est non seulement utile pour détecter l'incapacité neurologique progressive dans le modèle du virus de Theiler, mais également pour révéler des déficits dans d'autres modèles murins de maladies neurodégénératives.

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