Name: Un modèle de Cardiac Remodeling Grâce à constriction de laorte abdominale chez les rats (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-12-02T10:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 31 s
Description: Découvrez une technique chirurgicale minimalement invasive de constriction de l'aorte abdominale chez le rat pour étudier l'hypertrophie cardiaque et le remodelage myocardique. Cette méthode reproductible permet d'explorer les mécanismes de la maladie cardiaque hypertensive.

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Les travaux des auteurs ont été soutenus par une subvention du ministère des Sciences et de la Technologie (MOST 103-2320-B-002-068-MY2), de l’Institut national de recherche en santé (NHRI-EX104-10418SC) et de l’Université nationale de Taïwan (NTU 104R4000).

Toutes les expériences sur les animaux ont été effectuées en conformité avec le Guide pour les soins et l&#39;utilisation des animaux de laboratoire, publiée par le National Institutes of Health (NIH publication no. 85-23, révisée en 1996). Ce protocole a été approuvé par et en conformité avec les lignes directrices énoncées par le Institutional Animal Care et utilisation Comité à l&#39;Université nationale de Taiwan. 1. Chirurgie animale <ol><li> Préparer un G aiguille 22 de la seringue par émousser la pointe de l&#39;aiguille sur une pierre à aiguiser. En utilisant des pinces, plicate l&#39;aiguille à un angle droit. </li><li> Avant la chirurgie, préparer les instruments chirurgicaux et les matériaux nécessaires, ainsi que d&#39;une cage de récupération. Autoclave tous les instruments et les fournitures chirurgicales avant utilisation. </li><li> Maintenir les rats autour de 200 g et de les garder sous 12 h cycles lumière / obscurité à une température contrôlée (21 ± 2 ° C) avec un accès libre à la nourriture et de l&#39;eau. Inclure au moins 6 rats dans chaque groupe. Anesthésier les rats avec du pentobarbital(75 mg / kg dans 0,5 ml, ip) ou d&#39;un autre agent anesthésique approprié. Confirmer la profondeur de l&#39;anesthésie en testant la queue réflexe. NOTE: L&#39;absence de réflexe caudal est un indicateur de l&#39;anesthésie adéquate. </li><li> Placer un rat en décubitus dorsal sur une plate-forme d&#39;intervention avec un coussin chauffant pour maintenir la température du corps. Rasez la région abdominale du rat avec une tondeuse à poils et les cheveux lotion démaquillante pour éviter les contaminations chirurgicales. Frotter l&#39;abdomen proprement rasé avec de la bétadine ou un autre réactif de nettoyage avant la chirurgie. NOTE: Il est important de maintenir un champ stérile tout au long de la procédure. </li><li> Faire une incision de 2 cm le long de la ligne médiane de l&#39;abdomen avec un scalpel. En utilisant une solution saline normale, maintenir l&#39;organe abdominal humide pendant la chirurgie. Déplacer les organes digestifs soigneusement sur le côté en utilisant des balles de coton pour exposer la veine cave inférieure qui se trouve dans la région du péritoine postérieur. Identifier l&#39;aorte abdominale, qui se trouve juxtaposée à et généralement sur laà gauche de la veine cave inférieure. NOTE: L&#39;aorte abdominale est le vaisseau qui palpite dans le temps avec le rythme cardiaque. </li><li> Pierce le péritoine avec une paire de pinces pour découvrir les vaisseaux sous. isoler doucement l&#39;aorte abdominale à côté des artères rénales et passer un 8 cm de long 4-0 suture de soie sous l&#39;aorte abdominale entre les origines de la droite et les artères rénales gauche. </li><li> Faire un double noeud lâche avec la suture; laisser une boucle de 3 mm de diamètre, et placer l&#39;aiguille 22 G émoussée et pliée à l&#39;intérieur de la boucle. Serrez le noeud autour de l&#39;aorte et l&#39;aiguille, puis retirez immédiatement l&#39;aiguille pour atteindre un diamètre de constriction de 0,7 mm. </li><li> Fermez la cavité abdominale avec 6-0 matériel de suture absorbable. Suturer les muscles ou la peau incisions avec des sutures interrompues simples. Pour prévenir l&#39;infection, frottez le site chirurgical avec une teinture d&#39;iode. </li><li> Observer l&#39;animal avec soin jusqu&#39;à ce qu&#39;elle reprenne conscience suffisante, comme indiqué par la libre circulationet l&#39;apport alimentaire. Ne pas laisser un animal sans surveillance jusqu&#39;à ce qu&#39;il ait repris connaissance suffisante pour maintenir décubitus sternale. Pour prévenir la douleur post-opératoire, traiter le rat avec de l&#39;acétaminophène (300 mg / kg dans 0,5 ml, ip). REMARQUE: Les utilisateurs doivent administrer des analgésiques comme approuvé par les politiques institutionnelles. </li></ol> 2. tissus et du sang de prélèvement des échantillons <ol><li> A 10 semaines post-chirurgie, peser le rat et anesthésier avec du pentobarbital (75 mg / kg dans 0,5 ml, ip). Avant la chirurgie, confirmer la profondeur de l&#39;anesthésie en testant sa queue réflexe. Placez le rat sur un plateau métallique. </li><li> Faire une incision de 2 cm le long de la ligne médiane du cou à l&#39;aide d&#39;un scalpel. Décaler les muscles soigneusement avec une pince pour exposer la trachée. Observer attentivement pour identifier les artères carotides, qui sont parallèles à la trachée et pulsent dans le temps avec le rythme cardiaque. </li><li> Recueillir le sang de l&#39;artère carotide dans un tube de collecte de sang revêtu d&#39;EDTA. Immédiatement centrifugeusele sang pendant 15 minutes à 2000 x g et à recueillir le plasma. Stocker le plasma sanguin à -80 ° C jusqu&#39;à leur utilisation. </li><li> Faire un 5 cm incision à la région thoracique, autour de la ligne médiane du processus xiphoïde. Percer la membrane avec une pince coupants. En utilisant une paire de ciseaux, couper et enlever la cage thoracique le long des lignes mi-claviculaire des deux côtés pour exposer le cœur. Exciser le coeur soigneusement le long des frontières cardiaques et vasculaires. Retirez le cœur en douceur, sans saisir le tissu. </li><li> Monter le coeur sur un appareil de perfusion de Langendorff modifié en liant le tronc aortique à l&#39;aiguille de perfusion. Perfuser le cœur avec du tampon Krebs (contenant du NaCl 110 mM, 2,6 mM de KCl, 1,2 mM de KH 2 PO 4, 1,2 mM MgSO4, 25 mM de NaHCO 3 et du glucose 11 mM [pH 7,4]) pour rincer le sang. Peser le cœur et le calcul du ratio coeur-poids-poids corporel. Fixer le coeur avec 4% de paraformaldehyde sur la glace. Rappelez-vous de porter un masque, car la vapeur d&#39;paraformaldéhyde est toxic. </li></ol> 3. Tissue Fibrose Quantification <ol><li> Placez le tissu cardiaque paraformaldehyde fixé sur un dispositif de sectionnement de tissu et couper 2 mm sections épaisses. Placer les coupes de tissus dans une cassette enrobage. Déshydrater le tissu à travers une série de bains d&#39;alcool graduées (50%, 75%, 95% et 100% pendant 1 heure chacun). </li><li> Infiltrer le tissu avec du xylène pendant 1 h et enfin dans la cire pendant 1 h. Placez le tissu infiltré dans une cassette intégration et d&#39;intégrer avec de la cire de paraffine. Conserver les tissus intégrés dans des blocs de paraffine à température ambiante jusqu&#39;à microtome. </li><li> Trancher le tissu incorporé dans 4 sections um d&#39;épaisseur. Placez les sections dans un bain d&#39;eau à 45 ºC. Trempez une lame de verre dans le bain d&#39;eau à un angle et approcher progressivement les bords de la section de paraffine pour permettre la fixation partielle à la diapositive. </li><li> Déplacez le curseur dans et hors de la salle de bain pour éliminer les poches d&#39;air potentielles sous la coupe de tissu et de faciliter une meilleure fixation. Dry til glisse à 37 ° C pendant 1 heure et les stocker à température ambiante pour la coloration histologique. </li><li> Mettre la diapositive dans un réservoir. Déparaffiner la lame avec du xylène pendant 30 min et réhydrater dans séquentiellement l&#39;alcool dilué (95%, 75% et 50% pendant 3 minutes à chaque fois) et enfin dans de l&#39;eau distillée. Utiliser une solution rouge picrosirius suffisante pour couvrir complètement les coupes de tissus pendant 1 h. Rincer les lames dans une solution d&#39;acide acétique à 0,5% pour les deux changements, puis effectuer deux rinçages dans l&#39;alcool absolu. </li><li> Air-sécher la glissière et monter la glissière en résine synthétique avec une lamelle. Photographier la lame dans un champ de lumière visible. NOTE: La zone rouge sur la photo montre une zone rouge positif picrosirius sous un microscope à grossissement de 200x. Calculer le pourcentage de la zone rouge positif picrosirius sur la superficie totale, ce qui indique l&#39;étendue de la fibrose 11. </li></ol> 4. Sang Troponin Quantification <ol><li> Quantifier les niveaux de troponine de plasmaen utilisant un dosage immuno-enzymatique (ELISA). Doser chaque échantillon en double. Charge 50 ul de plasma sanguin et de 50 ul d&#39;un cocktail d&#39;anticorps dans les puits appropriés. Sceller la plaque et incuber pendant 1 heure à température ambiante sur un agitateur de plaque à 400 rpm. NOTE: La troponine cardiaque dans le plasma est un marqueur de lésion cardiaque. </li><li> Aspirer le liquide et laver chaque puits avec 250 pi de tampon de lavage à trois reprises. Après le dernier lavage, retourner la plaque et épongez contre des serviettes en papier propre pour éliminer l&#39;excès de liquide. </li><li> Ajouter 100 pi de substrat de tétraméthylbenzidine à chaque puits et incuber pendant 10 min dans l&#39;obscurité sur un agitateur de plaque à 400 rpm. Ajouter 100 ul de solution d&#39;arrêt à chaque puits. Agiter la plaque sur un agitateur de plaque pendant 1 min à mélanger. Notez la densité optique (DO) à 450 nm. NOTE: La concentration de troponine est proportionnelle à la valeur de DO. </li></ol>

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</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Les cardiopathies hypertensives, un problème de santé majeur qui contribue grandement à la morbidité et à la mortalité, peuvent entraîner une hypertrophie cardiaque et une insuffisancecardiaque5. La pathogenèse et la progression de la cardiopathie hypertensive chez l’homme sont complexes, de sorte qu’un modèle animal approprié est essentiel pour étudier les mécanismes sous-jacents et tester de nouvelles thérapies visant à améliorer la structure et la fonctioncardiaques 5. Le modèle de constriction d...

L&#39;insuffisance cardiaque est un syndrome clinique complexe, dont les symptômes incluent la fatigue, dyspnée, intolérance à l&#39;exercice, et la rétention d&#39;eau dans les tissus périphériques. Elle est la principale cause de décès dans les pays développés 1. En dehors de la cardiomyopathie héréditaire causée par des mutations dans les protéines de sarcomère ou des canaux ioniques 2, la dysfonction myocardique peut être due à une variété de maladies, y compris l&#39; hypertension, les maladies cardiaques valvulaires, l&#39; obésité et le diabète 3. Les changements dans la structure du myocarde, la conduction électrique, et le métabolisme énergétique conduisent à une capacité de pompage cardiaque insuffisant pour répondre aux exigences de la circulation, ce qui se traduit en fin de compte dans l&#39; insuffisance cardiaque 3,4. L&#39;étude des mécanismes sous-jacents d&#39;insuffisance cardiaque, par conséquent, il est essentiel dans le domaine de la recherche cardiovasculaire. Identifier les mécanismes moléculaires conduisant à la progression de l&#39;insuffisance cardiaque peut éventuellement aider à la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques ou des biomarqueurs utiles <sup&gt; 1. Il est donc important de développer des modèles d&#39; insuffisance cardiaque des animaux qui partagent des caractéristiques cliniques clés avec l&#39; insuffisance cardiaque chez les humains 5. L&#39;hypertrophie cardiaque et le remodelage joue un rôle essentiel dans le développement de l&#39;insuffisance cardiaque. Maladie cardiaque hypertensive est le facteur contributif clé de l&#39; hypertrophie cardiaque et le remodelage mésadapté observé chez les patients humains 1. Pour imiter ces conditions humaines, les modèles animaux sont souvent établis par des procédures chirurgicales. En particulier, l&#39;aorte abdominale ou transversale peut être rétrécie pour accroître la résistance contre le ventricule gauche, ce qui conduit finalement à une surcharge de pression dans le coeur. Ce phénomène se traduit généralement par une hypertrophie cardiaque, une compensation physiologique des cardiomyocytes pour répondre à la demande de fonctionnement du système cardio-vasculaire. Cependant, la demande fonctionnelle remplace les mécanismes compensatoires physiologiques normaux, conduisant à la fibrose cardiaque et contracaltération de la tuile. Transverse constriction aortique (TAC) chirurgie implique souvent des procédures complexes, y compris thoracotomie, ventilation mécanique, et la séparation du thymus et des tissus adipeux de la crosse aortique. En revanche, la constriction de l&#39; aorte abdominale nécessite des techniques expérimentales simples 6-8. L&#39;aorte abdominale, entre les artères rénales droite et gauche, est resserrée au cours de l&#39;intervention chirurgicale. L&#39; hypertrophie cardiaque et le remodelage peut être observé à plusieurs semaines après l&#39;opération de rétrécissement de l&#39; aorte abdominale 6-8; ils produisent une maladie hypertensive robuste cardiaque similaire à celui généré par la chirurgie de la constriction aortique transverse 9,10. Ici, nous décrivons un protocole pour effectuer la constriction de l&#39;aorte abdominale chez les rats en utilisant une méthode efficace, hautement reproductible et peu invasive. L&#39;aorte abdominale à proximité des artères rénales est resserrée par une boucle à 0,72 mm formé par un fil de soie 4-0. Dix semaines après la chirurgie, l&#39;hypertrophie cardiaque et remodeling peut être observée. Le modèle de rat de l&#39;hypertrophie de l&#39;aorte abdominale induite par une constriction cardiaque fournit une plate-forme pour l&#39;étude des mécanismes de la maladie et la physiopathologie, ainsi que le développement de thérapies potentielles.

<table><tbody><tr><td>Aiguille de seringue de 22 g&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>&nbsp ; &nbsp ; BD Biosciences&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td></td><td></td>309572</tr><tr><td>Tubes de prélèvement sanguin EDTA</td><td>&nbsp ; &nbsp ; BD Biosciences&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>REF365974 Suture en soie 4-0 &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>Sharpoint&commerce ; Produits&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>DC-2515N</td><td></td></tr><tr><td>6-0 suture en soie&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>Sharpoint&commerce ; Produits&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>DC-2150N</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>Sigma Aldrich&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td></td><td></td>1507002</tr><tr><td>Paraformaldéhyde &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>Sigma Aldrich&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td></td><td></td>441244</tr><tr><td>Acétaminophen</td><td>Sigma Aldrich&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>A7085</td><td></td></tr><tr><td>Picrosirius rouge solution&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>Abcam&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>ab150681</td><td></td></tr><tr><td>Kit de troponine cardiaque&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>&nbsp ; Abcam&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>ab200016</td><td></td></tr><tr><td>Imagequant</td><td>Dynamique</td><td></td><td></td>moléculaire</tr><tr><td>Langendorff&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td>&nbsp ; ADInstruments&nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ; &nbsp ;</td><td></td><td></td>ML870B2</tr></tbody></table>

un modèle de cardiac remodeling grâce à constriction de l&#39;aorte abdominale chez les rats

A Model of Cardiac Remodeling Through Constriction of the Abdominal Aorta in Rats

L’insuffisance cardiaque est l’une des principales causes de décès dans le monde. Il s’agit d’un syndrome clinique complexe qui comprend la fatigue, la dyspnée, l’intolérance à l’exercice et la rétention d’eau. Des modifications de la structure du myocarde, de la conduction électrique et du métabolisme énergétique se développent avec l’insuffisance cardiaque, entraînant un dysfonctionnement contractile, un risque accru d’arythmie et une mort subite. La cardiopathie hypertensive est l’un des principaux facteurs contribuant au remodelage cardiaque associé à l’insuffisance cardiaque. Le modèle animal le plus couramment utilisé imitant les cardiopathies hypertensives est créé par des interventions chirurgicales, telles que le rétrécissement de l’aorte. La constriction de l’aorte abdominale est une technique expérimentale utile pour induire une surcharge de pression, ce qui conduit à l’insuffisance cardiaque. La chirurgie peut être facilement réalisée, sans qu’il soit nécessaire d’ouvrir la poitrine ou de ventrer mécaniquement. La pathologie cardiaque induite par la constriction de l’aorte abdominale progresse progressivement, ce qui rend ce modèle pertinent pour l’insuffisance cardiaque hypertensive clinique. Une lésion cardiaque et un remodelage peuvent être observés 10 semaines après la chirurgie. La méthode décrite ici fournit une approche simple et efficace pour produire un modèle animal de cardiopathie hypertensive qui convient à l’étude des mécanismes de la maladie et à la mise à l’essai de nouvelles thérapies.

10 semaines après l&#39;opération de rétrécissement de l&#39;aorte abdominale, de la pathologie cardiaque résultant a été analysé. L&#39;histologie cardiaque a été mesurée en calculant le rapport du poids du cœur au poids corporel et en détectant la quantité de collagène dans le coeur. lésion cardiaque a été confirmée par la mesure de la concentration plasmatique de la troponine cardiaque. Comme cela est représenté sur la <str...

Un modèle de rat de constriction de l’aorte abdominale qui induit une hypertrophie et un remodelage cardiaques est décrit. Une méthode efficace, hautement reproductible et peu invasive est utilisée pour fournir une plate-forme simple mais utile pour la recherche sur l’hypertrophie et le dysfonctionnement du myocarde.

Un modèle de Cardiac Remodeling Grâce à constriction de l&#39;aorte abdominale chez les rats

Heart failure is one of the leading causes of death worldwide. It is a complex clinical syndromethat includes fatigue, dyspnea, exercise intolerance, and ...

L'objectif général de l'intervention chirurgicale est de fournir une plateforme simple pour l'étude de l'hypertrophie myocardique, du remodelage et du dysfonctionnement cardiaque. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine cardiovasculaire, telles que les voies de signalisation impliquées dans l'hypertrophie et le remodelage cardiaques, ainsi que la découverte de nouvelles cibles thérapeutiques dans la cardiopathie hypertensive.Le principal avantage de cette technique est qu'il s'agit d'une méthode peu invasive qui nécessite des techniques chirurgicales très simples, tout en offrant des résultats hautement reproductibles. Les implications de ces techniques s'étendent à notre prise en charge de la cardiopathie hypertensive. En effet, la constriction de l'aorte abdominale induit une surcharge de pression et conduit éventuellement à une hypertrophie cardiaque, à un remaniement ventriculaire et à l'insuffisance cardiaque.Pour commencer, préparez une aiguille de seringue de calibre 22 en utilisant une pierre à aiguiser pour émousser la pointe. Ensuite, à l’aide d’une pince, pliez l’aiguille à angle droit. Préparez le matériel chirurgical nécessaire, y compris la cage de récupération, et stérilisez les instruments chirurgicaux en les autoclavant.Conserver les rats d'environ 200 grammes et les maintenir sous un cycle lumineux de 12 heures d'obscurité et 12 heures de lumière, à température contrôlée, avec un accès libre à la nourriture et à l'eau. Placer le rat en position supine sur une plateforme chirurgicale équipée d'un tapis chauffant afin de maintenir sa température corporelle. Raser complètement la zone chirurgicale afin d'éviter toute contamination de la plaie par contact avec le pelage.Ensuite, à l’aide de bétadine ou d’un autre agent de nettoyage, frictionner l’abdomen soigneusement rasé. Puis, à l’aide d’un scalpel, pratiquer une incision de deux centimètres le long de la ligne médiane de l’abdomen. Ensuite, humidifier les organes abdominaux avec du sérum physiologique et maintenir les organes humides pendant l’intervention chirurgicale.À l’aide de boules de coton, déplacer délicatement les organes digestifs sur le côté afin d’exposer la veine cave inférieure et la région péritonéale postérieure. Ensuite, identifier l’aorte abdominale, qui se trouve adjacente et généralement à gauche de la veine cave inférieure. Puis, à l’aide de pinces, percer le péritoine pour mettre à nu les vaisseaux situés en dessous.Isolez délicatement l'aorte abdominale adjacente aux artères rénales et passez une suture en soie 4/0 d'une longueur de huit centimètres sous le vaisseau, entre les origines des artères rénales droite et gauche. Faites un nœud double lâche avec la suture et laissez une boucle de trois millimètres de diamètre. Ensuite, placez l'aiguille de calibre 22 émoussée et courbée à l'intérieur de la boucle.Serrer le nœud autour de l'aorte et de l'aiguille, puis retirer immédiatement l'aiguille afin d'obtenir une constriction de 0,7 millimètre de diamètre. Fermer la cavité abdominale avec des fils 6/0. Ensuite, utiliser des points séparés simples pour fermer les incisions musculaires et cutanées.Utilisez une teinture d'iode pour nettoyer le site chirurgical afin de prévenir toute infection. Pour prévenir la douleur postopératoire, traitez l'animal avec du paracétamol et observez-le attentivement jusqu'à ce qu'il retrouve une conscience suffisante, indiquée par des mouvements libres, une prise alimentaire et le maintien d'une position sterno-abdominale. Pesez le rat 10 semaines après la chirurgie.Après avoir anesthésié l'animal et confirmé la profondeur de l'anesthésie, placer le rat sur un plateau métallique. Réaliser ensuite une incision de cinq centimètres au niveau de la région thoracique, autour de la ligne médiane du processus xiphoïde. À l’aide de pinces fines, percer le diaphragme.Ensuite, à l’aide de ciseaux, couper et retirer la cage thoracique le long des lignes midéclaviculaires des deux côtés afin d’exposer le cœur. Dissecter soigneusement le cœur en suivant les limites cardiaques et vasculaires. Puis retirer délicatement le cœur sans saisir le tissu.Monter le cœur sur un appareil de perfusion Langendorff modifié en liant le tronc aortique à l'aiguille de perfusion. Ensuite, utiliser du tampon de Krebs pour perfuser le cœur et éliminer le sang. Peser le cœur et calculer le rapport entre la masse cardiaque et la masse corporelle.Ensuite, tout en portant un masque, placer l'organe dans du paraformaldéhyde à 4 % et le fixer sur de la glace toute la nuit. Après la fixation du tissu cardiaque, le placer sur un dispositif de sectionnement tissulaire, le couper en tranches de deux millimètres d'épaisseur et placer les sections dans une cassette d'inclusion. Après l'inclusion dans la paraffine et un sectionnement supplémentaire conformément au protocole décrit, déparaffiner les lames en les plaçant dans un récipient contenant du xylène pendant 30 minutes.Ensuite, réhydratez le tissu dans une série d'alcool dilué de manière séquentielle, suivie d'eau distillée. Puis, utilisez une quantité suffisante de solution de rouge picrosirius pour recouvrir complètement les sections de tissu et incubez pendant une heure. Ensuite, rincez les lames deux fois avec une solution d'acide acétique à 0,5 %.Et rincez les échantillons deux fois dans de l'alcool absolu. S&eacute;chez les &eacute;chantillons &agrave; l'air et montez-les dans une r&eacute;sine synth&eacute;tique avec une lame couvre-objet. Ensuite, utilisez la lumi&egrave;re visible sous un microscope &agrave; un grossissement de 200X pour imager les lames.Enfin, calculez le pourcentage de la zone positive au rouge picrosirius par rapport à la surface totale, ce qui indique l'ampleur de la fibrose. Comme illustré ici, le volume cardiaque augmente après la chirurgie de constriction de l'aorte abdominale. Ce phénomène est mis en évidence par un rapport plus élevé entre le poids du cœur et le poids corporel, qui constitue un indicateur d'hypertrophie cardiaque.Grâce à la coloration par le rouge picrosirius, le myocarde fibrosé présentant une teneur accrue en collagène peut être distingué des zones normales. Comme le montrent ces échantillons colorés, la fibrose cardiaque était accrue après la chirurgie de constriction de l'aorte abdominale par rapport aux témoins. Une fois la technique maîtrisée, l'intervention peut être réalisée en 30 minutes si elle est effectuée correctement.Après cette procédure, d'autres méthodes telles que l'échocardiographie peuvent être réalisées afin de répondre à des questions supplémentaires concernant la fonction cardiaque. Depuis son développement, cette technique a permis aux chercheurs spécialisés dans le domaine de la cardiopathie hypertensive d'explorer les mécanismes impliquant l'hypertrophie cardiaque, le remodelage et l'insuffisance cardiaque. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière de réaliser une constriction de l'aorte abdominale afin d'induire une hypertrophie cardiaque et un remodelage myocardique chez le rat.

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Cette vidéo démontre la technique de débanding aortique, qui peut conduire à un remodelage inverse pour limiter la progression vers l’insuffisance cardiaque dans un modèle murin. Après la débandation, une réduction significative de la postcharge ventriculaire déclenche une régression de l’hypertrophie ventriculaire et de la fibrose, provoquant une récupération de la fonction cardiaque.

Débandage aortique chirurgical : une procédure pour étudier le remodelage inverse du ventricule gauche dans un modèle murin de constriction aortique

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Aortique ascendant constriction chez les rats pour la création de la surcharge de pression hypertrophie cardiaque Modèle

Insertion du cathéter en polyuréthane dans la lumière aortique et la ligature de l’aorte de suture induisent une hypoxie chronique en raison de l’hypoperfusion de l’adventitiels vasa vasorum. Cet article décrit un nouveau modèle animal d’anévrisme de l’aorte abdominale (AAA) présentant des caractéristiques semblables à celles de AAA chez les humains.

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Ici nous décrivons un protocole étape par étape d’aorte chirurgicale débandant dans le modèle bien établi de souris de l’aortique-constriction. Ce procédé permet non seulement d’étudier les mécanismes à la base de la retouche et de la régression inverses ventriculaires gauches de l’hypertrophie mais également d’essayer les options thérapeutiques originales qui pourraient accélérer le rétablissement myocardique.

Étude du remodelage inverse ventriculaire gauche par débandage aortique chez les rongeurs

Nous décrivons la création d’un modèle de rat de surcharge de pression induite transformant modéré et le dysfonctionnement systolique tôt où les voies de transduction de signal impliquées dans le déclenchement du processus de remodelage sont activées. Ce modèle animal aidera à identifier les cibles moléculaires pour l’application précoce des stratégies thérapeutiques anti-remodelage pour l’insuffisance cardiaque.

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Le présent protocole décrit une intervention chirurgicale visant à enlever les bandes aortiques ascendantes dans un modèle d’hypertension pulmonaire chez le rat due à une maladie cardiaque gauche. Cette technique étudie les mécanismes endogènes de remodelage inverse dans la circulation pulmonaire et le cœur droit, éclairant ainsi les stratégies pour inverser l’hypertension pulmonaire et / ou le dysfonctionnement ventriculaire droit.

Un modèle de remodelage vasculaire inverse dans l’hypertension pulmonaire due à une maladie cardiaque gauche par dégroupage aortique chez le rat

Le présent protocole décrit une procédure étape par étape pour établir un modèle mini-porc d’insuffisance cardiaque avec fraction d’éjection préservée à l’aide d’une constriction aortique descendante. Les méthodes d’évaluation de la morphologie, de l’histologie et de la fonction cardiaques de ce modèle de maladie sont également présentées.

Un modèle chirurgical d’insuffisance cardiaque avec fraction d’éjection préservée chez les mini-porcs tibétains

Le présent protocole décrit une nouvelle technique de cerclage aortique chez la souris pour induire une hypertrophie cardiaque par surcharge de pression. Pour le bandage, un anneau en caoutchouc avec un diamètre intérieur fixe est utilisé. Cette nouvelle technique promet moins de variance et des données plus reproductibles pour les expériences futures.

Anneaux toriques par rapport à la constriction aortique transversale traditionnelle pour la modélisation de l’hypertrophie cardiaque induite par surcharge de pression

Cette étude démontre une technique de transplantation cardiaque abdominale hétérotopique reproductible chez le rat que les débutants peuvent apprendre et effectuer. De plus, un nouveau modèle de régurgitation aortique chez le rat est généré en effectuant une transplantation cardiaque abdominale hétérotopique et en endommageant la valve aortique du donneur à l’aide d’un fil guide après la récolte.

Transplantation cardiaque abdominale hétérotopique modifiée et nouveau modèle de régurgitation aortique chez le rat

Ce protocole décrit une intervention chirurgicale mini-invasive pour le baguage aortique ascendant chez le porc.

Un modèle mini-invasif de sténose aortique chez le porc

L’insuffisance cardiaque droite (RHF) se caractérise par une dilatation et une hypertrophie cardiaques du côté droit, entraînant un dysfonctionnement ventriculaire et auriculaire. Les affections cardiopulmonaires associées à la FRH s’accompagnent d’un risque accru d’arythmies cardiaques. Cet article décrit un modèle standardisé de RHF induite par le cerclage de l’artère pulmonaire associé à une arythmogenèse ventriculaire et auriculaire améliorée.

Modèle de rat de remodelage cardiaque du côté droit et d’arythmie à l’aide d’un cerclage de l’artère pulmonaire

Découvrez une technique chirurgicale minimalement invasive de constriction de l'aorte abdominale chez le rat pour étudier l'hypertrophie cardiaque et le remodelage myocardique. Cette méthode reproductible permet d'explorer les mécanismes de la maladie cardiaque hypertensive.

Un modèle de Cardiac Remodeling Grâce à constriction de l'aorte abdominale chez les rats

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