Plunge congélation: un outil pour les études ultrastructurales et immunolocalisation de cellules en suspension dans microscopie électronique à transmission

L’objectif des expériences suivantes est de proposer un outil pour les études d’ultrastructuration et d’immunolocalisation de cellules en suspension pour la visualisation en microscopie électronique à transmission. Cette technique est facile à utiliser, peu coûteuse et permet une excellente préservation de la structure cellulaire. Il s’agit d’une culture de cellules en suspension.

Tout d’abord, les cellules sont récoltées par différentes centrifugeuses pour obtenir une pastille dans un tube de microcentrifugation. Dans un second temps, l’échantillon est rapidement congelé par congélation plongeante qui immobilise les cellules et limite la formation de cristaux de glace. Ensuite, la substitution par congélation est effectuée afin de remplacer l’eau par un solvant contenant du tétroxyde d’osmium comme fixateur pour stabiliser les structures cellulaires.