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DOI: 10.3791/55000-v
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This article describes a protocol for culturing low-density primary hippocampal neurons on glass coverslips over a glial monolayer. This method allows for high-resolution optical imaging and functional assays of mature neurons.
Cet article décrit le protocole pour la culture de neurones hippocampiques primaires de basse densité en croissance sur des lamelles de verre inversées sur une monocouche de cellules gliales. Les couches de neurones et de cellules gliales sont séparés par des billes de cire de paraffine. Les neurones cultivés par ce procédé sont appropriés pour l'imagerie optique à haute résolution et des essais fonctionnels.
Ce protocole a été publié à l’origine par le Dr Gary Bunker et ses collègues, et ils permettent la longue densité et la culture de haute pureté des neurones de l’hippocampe à charge embryonnaire, en suspendant les neurones au-dessus d’une couche gliale. Ce résultat est à la hauteur des dangers de nos autres résultats cruciaux de l’hippocampe, car il permet aux neurones de se développer à de faibles densités avec peu de cellules gliales contaminantes. Ce résultat est donc idéal pour l’imagerie haute résolution et le fonctionnement de la typographie et des neurones matures en culture.
La post-maturation de ce protocole devrait accélérer l’adaptation par une nouvelle vie, car il y a plusieurs états clés au cours de la procédure qui sont difficiles à décrire, donc il vous emmène. Ce protocole se compose de trois populations indépendantes qui sont nécessaires à la culture de neurones primaires de haute qualité. Ces processus comprennent la culture de cellules gliales, la création et l’enrobage de lamelles de recouvrement et la préparation de cellules nerveuses de l’hippocampe.
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