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Faible densité primaire hippocampique Neuron Culture
Faible densité primaire hippocampique Neuron Culture
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JoVE Journal Neuroscience
Low-Density Primary Hippocampal Neuron Culture

Faible densité primaire hippocampique Neuron Culture

Full Text
21,805 Views
17:46 min
April 18, 2017

DOI: 10.3791/55000-v

Reiko T. Roppongi*1,2, Kevin P. Champagne-Jorgensen*1,2, Tabrez J. Siddiqui1,2

1Department of Physiology and Pathophysiology,University of Manitoba, 2Kleysen Institute for Advanced Medicine,Health Sciences Centre

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a protocol for culturing low-density primary hippocampal neurons on glass coverslips over a glial monolayer. This method allows for high-resolution optical imaging and functional assays of mature neurons.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Cell Biology
  • Neurobiology

Background

  • Primary hippocampal neurons are crucial for studying neuronal function.
  • Low-density cultures reduce contamination from glial cells.
  • High purity cultures are essential for accurate imaging and functional assays.
  • This protocol aids in the adaptation of new researchers to complex procedures.

Purpose of Study

  • To provide a reliable method for culturing hippocampal neurons.
  • To facilitate high-resolution imaging of neuronal activity.
  • To enable functional assays of mature neurons in culture.

Methods Used

  • Culture of glial cells to support neuron growth.
  • Preparation and coating of glass coverslips.
  • Isolation and preparation of hippocampal neurons.
  • Use of paraffin wax beads to separate neuron and glial layers.

Main Results

  • Successful growth of low-density primary hippocampal neurons.
  • High purity of neuronal cultures with minimal glial contamination.
  • Neurons are suitable for high-resolution imaging techniques.
  • Functional assays demonstrate the viability of cultured neurons.

Conclusions

  • This protocol enables effective culturing of hippocampal neurons.
  • It supports high-resolution imaging and functional studies.
  • The method is accessible for new researchers in the field.

Frequently Asked Questions

What is the main advantage of this culturing method?
The main advantage is the ability to culture neurons at low densities with minimal glial contamination, which is ideal for imaging and functional assays.
Who developed this protocol?
This protocol was originally published by Dr. Gary Bunker and his colleagues.
What are the key components required for this protocol?
The key components include glial cell culture, preparation of coverslips, and isolation of hippocampal neurons.
How does this method support high-resolution imaging?
By culturing neurons at low densities, it reduces interference from glial cells, allowing for clearer imaging results.
Is this protocol suitable for new researchers?
Yes, the protocol is designed to be accessible and includes detailed steps to guide new researchers.

Cet article décrit le protocole pour la culture de neurones hippocampiques primaires de basse densité en croissance sur des lamelles de verre inversées sur une monocouche de cellules gliales. Les couches de neurones et de cellules gliales sont séparés par des billes de cire de paraffine. Les neurones cultivés par ce procédé sont appropriés pour l'imagerie optique à haute résolution et des essais fonctionnels.

Ce protocole a été publié à l’origine par le Dr Gary Bunker et ses collègues, et ils permettent la longue densité et la culture de haute pureté des neurones de l’hippocampe à charge embryonnaire, en suspendant les neurones au-dessus d’une couche gliale. Ce résultat est à la hauteur des dangers de nos autres résultats cruciaux de l’hippocampe, car il permet aux neurones de se développer à de faibles densités avec peu de cellules gliales contaminantes. Ce résultat est donc idéal pour l’imagerie haute résolution et le fonctionnement de la typographie et des neurones matures en culture.

La post-maturation de ce protocole devrait accélérer l’adaptation par une nouvelle vie, car il y a plusieurs états clés au cours de la procédure qui sont difficiles à décrire, donc il vous emmène. Ce protocole se compose de trois populations indépendantes qui sont nécessaires à la culture de neurones primaires de haute qualité. Ces processus comprennent la culture de cellules gliales, la création et l’enrobage de lamelles de recouvrement et la préparation de cellules nerveuses de l’hippocampe.

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