Une méthode d'évaluation de l'efficacité des insecticides contre les punaises de lit, Cimex lectularius, Les œufs et les premiers stades

L’objectif général de cette expérience est d’évaluer l’efficacité des insecticides pour tuer les œufs et les premiers stades des punaises de lit. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de l’entomologie, telles que les effets des tests toxicologiques sur les œufs de punaises de lit et les petites nymphes. Le principal avantage de cette technique est qu’elle est conçue pour traiter un stade de vie difficile des insectes avec des insecticides, en particulier le stade de l’œuf.

Pour commencer l’expérience, retirez cinq à dix punaises de lit femelles adultes accouplées et bien nourries d’une colonie et placez les femelles dans une boîte de Pétri avec du papier filtre. Préparez 10 répétitions pour vous assurer qu’il y aura suffisamment d’œufs pour le dosage de l’insecticide. Vérifiez les plats tous les jours pour voir si les femelles ont pondu des œufs.

Une fois que les femelles ont pondu des œufs, sortez-les de la boîte de Pétri et mettez-les dans de nouvelles boîtes de Pétri avec un nouveau papier filtre tous les jours. Enregistrez les données sur l’ancienne et la nouvelle boîte de Pétri. Laissez les œufs vieillir quatre à cinq jours avant de commencer le test.

Une fois que les œufs ont bien vieilli, retirez délicatement les œufs de punaises de lit des papiers filtres à l’aide d’une pince à pointe souple. Raclez doucement le fond de l’œuf fixé au papier filtre à l’aide de la pince, puis saisissez doucement l’œuf sans appliquer trop de pression pour éviter de jeter les œufs de punaises de lit. Placez les œufs de punaises de lit retirés dans leurs groupes respectifs à l’intérieur des boîtes de Pétri en plastique.

Frottez le fond de chaque boîte de Pétri à l’extérieur avec une feuille d’assouplissant pour limiter l’électricité statique provenant des œufs de punaises de lit. Ensuite, préparez des dilutions en série d’insecticides pour obtenir une gamme de cinq concentrations différentes et une solution témoin avec de l’eau du robinet seulement jusqu’à un volume de 20 mL. Prenez des tubes à centrifuger de 50 ml prédécoupés à la ligne de mL, puis coupez les mailles fines en carrés suffisamment grands pour s’adapter au bouchon.

Vissez fermement le treillis en éliminant toute bosse dans les tubes de centrifugation à l’aide du capuchon du tube de centrifugation. Ensuite, à l’aide d’un pinceau, placez un groupe d’œufs de punaises de lit sur le grillage à l’intérieur d’un tube de centrifugation. Trempez le groupe d’œufs de punaises de lit à l’intérieur du tube de centrifugation coupé dans une concentration d’insecticide pendant cinq secondes.

Retirez le tube à centrifuger de la solution insecticide. Placez le tube de centrifugation directement sur le tissu de laboratoire pour sécher le grillage avec les œufs à l’intérieur. Après séchage, retirez le groupe d’œufs du tube de centrifugation à l’aide d’un petit pinceau à poils fins et placez-les dans une boîte de Pétri propre avec un papier filtre propre.

Enregistrez la mortalité des œufs pendant 14 jours pour vous assurer que tous les œufs ont eu suffisamment de temps pour éclore. Corriger la mortalité dans le traitement témoin à l’aide de la formule d’Abbott. Insérer la mortalité enregistrée avec les concentrations correspondantes dans le logiciel d’analyse pour calculer les valeurs CL50.

Séparez un groupe de cinq punaises de lit mâles adultes et de cinq punaises de lit femelles adultes nourries la veille et placez-les dans une boîte de Pétri avec du papier filtre. Laissez les punaises de lit adultes s’accoupler et pondre des œufs pendant huit jours. Ensuite, retirez les adultes des boîtes de Pétri et laissez les œufs éclore dans les premiers stades dans les boîtes de Pétri

Récupérez les premiers stades non nourris du même âge à l’aide d’un pinceau, puis placez-les dans de nouvelles boîtes de Pétri propres jusqu’à l’analyse de l’insecticide. Pipeter des aliquotes de 150 microlitres de chacune des cinq dilutions précédentes préparées d’insecticide et d’eau pour le groupe témoin sur des papiers filtres individuels. Répartissez uniformément l’insecticide en appliquant des gouttelettes sur tout le bord et le centre du papier filtre.

Placez les papiers filtres traités individuellement sur les panneaux durs individuels. Libérez des groupes de premiers stades sur les papiers filtres individuels pendant qu’ils sont encore mouillés d’insecticide et couvrez les premiers stades avec le fond d’une boîte de Pétri inversé et placez un poids sur la boîte de Pétri pour empêcher les punaises de lit du premier stade de s’échapper. Consigner la mortalité des punaises de lit du premier stade après 24 heures d’exposition à toutes les concentrations d’insecticide.

Corriger la mortalité dans le traitement témoin à l’aide de la formule d’Abbott. Insérer la mortalité et les concentrations enregistrées dans le logiciel d’analyse pour calculer les valeurs CL50. Le pourcentage de réponse ou de mortalité des œufs de punaises de lit de la souche Harlin à cinq concentrations différentes de métoclopride bêta-cyfluthrine augmentait à mesure que la dose augmentait.

La mortalité a atteint 100 % à la concentration la plus élevée testée. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez mieux comprendre comment évaluer l’efficacité des insecticides contre les œufs et les premiers stades des punaises de lit.