Name: Activation autophagie par exercice aérobie chez la souris (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-02-03T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 44 s
Description: Découvrez comment activer l'autophagie par exercice aérobie chez la souris C57BL/6. Cette méthode permet de mesurer les niveaux d'autophagie dans les tissus spécifiques et d'étudier ses bienfaits physiologiques.

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Nous remercions le Laboratoire d’histologie et de phénotypage de souris de l’Université Northwestern pour son soutien technique et son assistance, ainsi que Noboru Mizushima (Université de Tokyo) pour la fourniture de souris transgéniques GFP-LC3. A. R. et C. H. ont été soutenus par les fonds de démarrage de l’Université Northwestern et la subvention des National Institutes of Health (DK094980).

Toutes les procédures impliquant des animaux ont été effectuées conformément aux lignes directrices approuvées par le Institutional soin et l&#39;utilisation des animaux Comité Northwestern University (IACUC). 1. Les modèles de souris <ol><li> Utilisez la souris 8-12 semaines d&#39;âge dans la formation d&#39;exercice. Pour détecter autophagy exercée induite in vivo en utilisant des souris transgéniques GFP-LC3 (C57BL / 6 de fond) pour des études d&#39;imagerie et C57BL / 6 pour des analyses biochimiques. </li></ol> 2. L&#39;autophagie induite par l&#39;exercice <ol><li> Setup Treadmill - exercice forcé <ol><li> Acclimate et former les souris sur un tapis roulant vers le haut ouvert 10 ° C pendant 2 jours. Le jour 1, exercer les souris pendant 5 min à 8 m / min, et le jour 2, exercer les souris pendant 5 min à 8 m / min suivi d&#39;un autre 5 min à 10 m / min 10. Encourager les souris à courir par coup de pouce de la main douce. </li><li> Sur le 3 ème jour, que les souris soumises à un seul bout de course pour 90 min à 10 ° tapis roulant vers le haut, starting à la vitesse de 10 m / min. Au bout de 40 min, augmenter la vitesse du tapis roulant à une vitesse de 1 m / min, toutes les 10 minutes pour un total de 30 minutes, et ensuite augmenter la vitesse à la vitesse de 1 m / min, toutes les 5 minutes jusqu&#39;à ce qu&#39;il atteigne 17 m / min, pour un total de 90 min de temps d&#39;exercice et 1.070 mètres de distance en cours d&#39;exécution. </li><li> Réglez le stimulus électrique à une plage de faible intensité (1,2 Hz), et encourager les souris à courir pour éviter les chocs répétés des pieds. </li><li> Pour la collecte des tissus, euthanasier les souris par inhalation isoflurane, suivie par dislocation cervicale immédiatement après l&#39;exercice. D&#39;autres méthodes d&#39;euthanasie approuvées peuvent également être utilisés, tels que le CO2 ou l&#39;injection IP d&#39;autres anesthésiques. Le niveau de l&#39;autophagie ne semble pas être affecté par les méthodes d&#39;euthanasie. </li></ol></li><li> Exécution de la configuration de roue - exercice volontaire <ol><li> Placez une roue de souris en cours d&#39;exécution (11,4 cm de diamètre) dans une cage avec une souris unique logé. </li><li> Vérifiez la capacité en cours d&#39;exécution en utilisant un compteur de vélo.Mettre en place le paramètre de roue [distance (en mm) par rotation complète de la roue] à 358 (11.4 * π). Mesurer la distance de la course après 24 h. </li><li> Laissez la souris courir volontairement pendant 2 semaines avec la roue de roulement. Pour la collecte de tissus, sacrifier la souris le matin après la période en cours d&#39;exécution. </li></ol></li></ol> 3. L&#39;autophagie évaluation Flux <ol><li> Pour mesurer le flux autophagique dans des conditions de repos et de l&#39;exercice, le traitement des souris avec le chloroquine inhibiteur de l&#39;autophagie pendant trois jours et de les comparer à des souris traitées avec du PBS. <ol><li> Dissoudre la chloroquine dans du PBS (5 mg / ml), et injecter la chloroquine chez des souris par voie intrapéritonéale à la dose de 50 mg / kg / jour pendant trois jours consécutifs. Sacrifiez souris et de recueillir des tissus 3 heures après la dernière injection. </li><li> Pour les souris exercées, prétraiter les chloroquine pendant deux jours consécutifs à la dose de 50 mg / kg / jour. Le troisième jour, l&#39;injection des souris avec la même concentration de chloroquine, et après90 min laisser courir sur le tapis roulant pour un autre 90 min. </li><li> Euthanize les souris par inhalation d&#39;isoflurane, suivie d&#39;une dislocation cervicale. Collecter des tissus immédiatement après l&#39;exécution, de sorte que le temps total d&#39;incubation de chloroquine est le même que le contrôle (au repos), la souris (3 h). REMARQUE: Vous pouvez également utiliser une seule injection de chloroquine pour déterminer le flux de l&#39;autophagie dans les tissus de la souris. </li></ol></li></ol> 4. Tissue Récolte et fixation <ol><li> Avant la récolte de tissus préparer du tampon phosphate salin (PBS) et frais paraformaldéhyde 4% (PFA, prudence: équipement de protection individuelle nécessaire) dans du PBS à un pH final de 7,4. Conserver les deux solutions à 4 ° C. </li><li> Remplir 30 ml seringue avec 15 - 20 ml de 4% PFA (pour les souris GFP-LC3). Connectez la seringue avec une aiguille G 20 du cathéter. </li><li> Après l&#39;exercice, l&#39;euthanasie les souris par inhalation d&#39;isoflurane, suivie d&#39;une dislocation cervicale. </li><li> Placez l&#39;animal sur une surface de travail propre sur sa back. Couper et ouvrir la cavité thoracique en coupant le diaphragme pour exposer le cœur. </li><li> Faire une petite incision sur le foie pour laisser le sang sortir, et injecter un total de 15 ml de 4% PFA lentement dans le ventricule droit du cœur via le cathéter, jusqu&#39;à ce que le poumon et le foie se tournent complètement pâle. Perfuser la souris immédiatement après la séance d&#39;exercice, en utilisant une pompe à seringue avec un débit constant de 90 ml / h. </li><li> Après perfusion, retirer l&#39;aiguille et de recueillir des tissus d&#39;intérêt (par exemple cerveau 11 et les muscles squelettiques). Pour le muscle squelettique, disséquer les vastus lateralis. En bref, tirer la peau de la jambe vers l&#39; arrière pour exposer les muscles, localiser les quadriceps fémoral 12 et disséquer vastus lateralis, ce qui est le muscle externe fixé à la partie supérieure de l&#39;os fémoral. </li><li> Pour plus de fixation et de déshydratation, placer les tissus de souris GFP-LC3 dans 4% PFA pendant 24 heures à 4 ° C, puis de les transférer à 15%saccharose-PBS à 4 ° C pendant une nuit ou jusqu&#39;à ce que les tissus sont installés, puis à 30% de saccharose-PBS à 4 ° C pendant une nuit ou pendant un stockage prolongé. Gardez les échantillons dans l&#39;obscurité, autant que possible, car ils peuvent être sensibles à une forte lumière. </li><li> Pour une analyse Western blot casser geler les tissus de souris C57BL / 6 directement dans l&#39;azote liquide, et les stocker à -80 ° C. </li></ol> 5. Analyse d&#39;imagerie de la GFP-LC3 punctas <ol><li> Processus de tissus <ol><li> Pré-traiter les tissus (préalablement fixés en PFA et stockés dans 30% de saccharose) dans l&#39;incorporation milieu tel que &quot;composé de température de coupe optimale&quot; (OCT) pendant quelques minutes dans une boîte de Pétri petite étiqueté. </li><li> Transférer le tissu dans un cryomoule marqué contenant suffisamment frais OPO pour couvrir le tissu. Orientez la surface sectionnant vers le bas de la cryomoule (section transversale du muscle vastus lateralis et coupe sagittale pour l&#39;hémi-cerveau). Eviter la formation de bulles. </li><li> Freeze les échantillons en plaçant le cryomoule pendant quelques minutes dans une glacière en mousse couvert rempli de glace sèche, jusqu&#39;à ce que l&#39;OPO devient blanc. Enveloppez échantillons individuels dans des feuilles marquées, les sceller dans un sac en plastique, et les stocker à -80 ° C pendant une nuit ou plus. </li><li> Utilisez un cryostat pour couper des sections échantillons à une épaisseur de 10 pm, et monter les sections sur les diapositives. Stocker les diapositives à -20 ° C, et de toujours garder les lames loin de la lumière chaque fois que possible. </li></ol></li><li> Préparation de diapositives <ol><li> Retirer les lames du congélateur et les dégeler à la température ambiante. Couvrir la section de tissu avec une goutte de milieu de montage avec DAPI. Placez une lamelle de taille appropriée sur le dessus et d&#39;éviter la formation de bulles. </li><li> Utilisez le vernis à ongles pour sceller les bords de la lamelle, laisser le vernis à ongles à sécher dans l&#39;obscurité à la température ambiante, puis stocker les lames dans un récipient étanche à la lumière à 4 ° C, ou procéder à l&#39;imagerie capture de GFP-LC3 lacrymaux. </li></ol></li><li> &lt;strong&gt; Quantification de la GFP - LC3 puncta par microscopie à fluorescence <ol><li> Effectuer la microscopie à épifluorescence, capturer des images dans le même état (exposition et les paramètres) pour tous les échantillons. Pour GFP, utiliser une longueur d&#39;onde d&#39;émission de 525 nm; pour DAPI, utiliser 490 nm. Acquérir au moins dix images par échantillon en utilisant un objectif 60X pour vastus lateralis et la région du cortex frontal du cerveau. </li><li> Quantifier le nombre de GFP-LC3 puncta dans une zone de tissu de 2,500 um 2 dans chaque image pour l&#39; analyse statistique, en aveugle pour les groupes expérimentaux. Calculer le nombre moyen de 10 images de chaque échantillon, en utilisant la fonction automatique de mesure de «comte d&#39;objets&quot;. Réglages du muscle vastus lateralis sont: Seuil L = 10, H = 200; 2X lisse; 1X propre, et les paramètres pour le cortex frontal du cerveau sont: Seuil L = 11, H = 200; 2X lisse; 1X propre. </li></ol></li></ol> 6. Analyse par Western Blot des marqueurs sur Autophagie <ol><li> &lt;strong&gt; processus de tissus <ol><li> Préparer le tampon de lyse: 50 mM de Tris-HCl; NaCl 150 mM; EDTA 1 mM; 1% de Triton X-100; inhibiteur de protéase et un inhibiteur de phosphatase (fraîchement ajoutée). </li><li> Enlever le tissu de souris C57BL / 6 de -80 ° C stockage. Couper le tissu musculaire en petits morceaux avec une lame de rasoir avant le processus suivant. Ajouter 800 ul (pour les hémi-cerveau) ou 500 ul (pour vastus lateralis) de tampon de lyse froid à l&#39;échantillon. Homogénéiser l&#39;échantillon à 4 ° C avec un homogénéiseur à vitesse moyenne. </li><li> lyser complètement le mélange homogénéisé pendant 30 minutes à 1 heure à 4 ° C avec rotation. </li><li> Isoler l&#39;homogénat à 12000 xg pendant 10 min à 4 ° C, jeter le culot, et de recueillir le surnageant dans un nouveau tube. </li></ol></li><li> Analyse de autophagie <ol><li> Déterminer la concentration en protéines des lysats de tissus à l&#39;aide du kit de dosage BCA Protein selon les spécifications du fabricant. Normaliser chaque échantillonà la même concentration. </li><li> Combiner l&#39;échantillon avec le tampon d&#39;échantillon 2 x Laemmli en un rapport de 1: 1, faire bouillir à 95 ° C pendant 5 à 10 min, et de procéder à une analyse Western Blot sur autophagy les marqueurs 13, 14, comme p62 (anticorps anti-p62, dilution 1: 500) et LC3 (anticorps anti-LC3, dilution 1: 500). Faire bouillir les échantillons immédiatement après l&#39;addition du tampon d&#39;échantillon, une incubation plus longue sur la glace peut générer de multiples bandes de dégradés LC3. </li><li> Quantifier p62 et LC3 bandes par analyse de densitométrie en utilisant ImageJ, et de normaliser la valeur à la bande d&#39;actine correspondante. </li></ol></li></ol>

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</ol>

Les auteurs déclarent qu’ils n’ont pas d’intérêts financiers concurrents.

L&#39;autophagie est un processus catabolique qui fournit de l&#39;énergie et réduit la cytotoxicité par la dégradation lysosomale des composants du cytoplasme ou organites endommagés. L&#39;étude de l&#39;autophagie est important de comprendre la régulation de l&#39;homéostasie cellulaire et les mécanismes de réponse au stress. De nouveaux modèles et méthodologies émergent dans le domaine de la recherche 15, pour étudier comment l&#39; autophagie altérée contribue à de nombreux processus patholo...

L&#39; autophagie est une voie de dégradation évolutivement conservée, qui est induite en réponse à diverses conditions de stress telles que la famine et de l&#39; hypoxie 1, 2. Pendant l&#39; autophagie, vésicules à double membrane, appelée autophagosomes, incorporer des composants subcellulaires inutiles ou endommagées et de les transporter dans les lysosomes de la dégradation 3. Autophagy basal est essentielle pour la fonction cellulaire et le développement de l&#39; organisme, et une altération autophagy de base est impliqué dans de nombreux troubles, y compris la neurodégénérescence, la tumorigenèse et le diabète de type 2 4, 5, 6. L&#39;autophagie inducteur physiologique le plus connu est la famine. Cependant, il a deux limitations majeures. Tout d&#39; abord, la faim prend une longue période pour induire efficacement autophagy chez les animaux, par exemple, 48 h de restriction alimentaire chez la sourisdans la plupart des organes. Deuxièmement, la famine induit peine cerveau autophagie, en raison d&#39;un apport d&#39;éléments nutritifs relativement stable dans le cerveau. En effet, il est aussi difficile à détecter par induction autophagy inducteurs à petites molécules, comme de nombreux médicaments ne peuvent pas traverser la barrière hémato-encéphalique. Ainsi, pour mieux analyser la fonction d&#39;activation de l&#39; autophagie dans la pathogenèse de la maladie, nous avons récemment découvert que l&#39; exercice est une méthode physiologique plus puissant pour induire l&#39; autophagie dans un court laps de temps 7, 8, 9. Par rapport à la famine, l&#39;autophagie est effectivement induit en exécutant tapis roulant aussi vite que 30 min. Ainsi, l&#39;exercice est une approche physiologique pratique et puissant pour étudier le mécanisme de l&#39;autophagie dans la médiation de bienfaits pour la santé et la prévention des maladies. Il existe plusieurs protéines marqueurs pour la détection de l&#39;activité de autophagy, y compris p62 et LC3. LC3 (microtubules protéine associée 1A / 1B c-lumièrehain 3) est une protéine cytosolique (LC3-je forme) qui est conjugué à PE (phosphatidyléthanolamine) lors de l&#39;autophagie induction. LC3 PE-lipidée (formulaire LC3-II) est recruté sur des membranes de autophagosomal et peut être utilisé pour visualiser autophagosomes lorsqu&#39;ils sont marqués avec la GFP. Sa translocation du cytosol vers ponctué structures de autophagosomes en microscopie est une indication de autophagy induction. p62 est un récepteur de chargement pour des substrats de autophagie (telles que les protéines d&#39;ubiquitination) et est incorporé dans autophagosomes aussi. Étant donné que la protéine est dégradée dans les lysosomes ainsi autophagosomes, les niveaux peuvent être utilisés pour mesurer le flux de autophagy. Ici, nous montrons comment utiliser ces marqueurs pour quantifier l&#39;autophagie dans les tissus de souris différents induits par l&#39;exercice aérobie, y compris l&#39;exercice forcé (tapis roulant) et l&#39;exercice volontaire (roues de roulement). Les mêmes procédures peuvent également être appliqués à la mesure in vivo de autophagy après le traitement d&#39;autres inducteurs.

<table><tbody><tr><td>Tapis de course</td><td>Columbus Instruments</td><td>150-RM Exer 3/6</td><td></td></tr><tr><td>Souris Roue de course</td><td>Super Pet</td><td>100079365</td><td>diamètre 11,4 cm</td></tr><tr><td>Odomètre</td><td>Bell</td><td>DASHBOARD 100</td><td></td></tr><tr><td>Pompe à seringue</td><td>KD Scientific</td><td>KDS100</td><td></td></tr><tr><td>Microscope à fluorescence</td><td>Nikon</td><td>Modèle : microscope inversé ECLIPSE</td><td></td></tr><tr><td>Cryostat</td><td>Leica</td><td>CM 1850UV</td><td></td></tr><tr><td>Homogénéisateur</td><td>IKA</td><td>003737001 / Modèle : T10 Basic S1</td><td></td></tr><tr><td>Chloroquine</td><td>CAYMAN CHEMICAL COMPANY</td><td>14194</td><td></td></tr><tr><td>Parafolmaldehye</td><td>SIGMA-ALDRICH</td><td>P6148</td><td>Equipement de protection individuelle requis. Ce produit peut libérer du formaldéhyde, un produit chimique connu pour causer le cancer.</td></tr><tr><td>Média de montage</td><td>Vector Laboratories</td><td>H-1200</td><td></td></tr><tr><td>p62 anticorps</td><td>BD Biosciences</td><td>610833</td><td></td></tr><tr><td>LC3 anticorps</td><td>Novus Biologicals</td><td>NB100-2220</td><td></td></tr><tr><td>2x Laemmli</td><td>Sample Buffer Bio-Rad</td><td>Laboratories 161-0737</td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

activation autophagie par exercice aérobie chez la souris

Activating Autophagy by Aerobic Exercise in Mice

L’autophagie est une voie de dégradation lysosomale essentielle à l’homéostasie, à la fonction et à la différenciation cellulaires. Dans des conditions de stress, l’autophagie est induite et cible diverses cargaisons, telles que le cytosol en vrac, les organites endommagés et les protéines mal repliées, pour la dégradation dans les lysosomes. Les molécules nutritives résultantes sont recyclées dans le cytosol pour la synthèse de nouvelles protéines et la production d’ATP. La régulation positive de l’autophagie a des effets bénéfiques contre la pathogenèse de nombreuses maladies, et des stratégies pharmacologiques et physiologiques pour activer l’autophagie ont été rapportées. L’exercice aérobique a récemment été identifié comme un inducteur d’autophagie efficace dans plusieurs organes chez la souris, notamment les muscles, le foie, le cœur et le cerveau. Ici, nous montrons des procédures pour induire l’autophagie in vivo par un exercice forcé sur tapis roulant ou une course volontaire à la roue. Nous démontrons également des méthodes microscopiques et biochimiques pour analyser quantitativement les niveaux d’autophagie dans les tissus de souris, en utilisant les protéines marqueurs LC3 et p62 qui sont transportées et dégradées dans les lysosomes avec les autophagosomes.

Ce protocole décrit deux méthodes différentes pour induire l&#39;autophagie dans les tissus de souris par l&#39;exercice aérobie: un total de 90 min d&#39;exercice forcé sur un tapis roulant à plusieurs voies procédé par deux jours de acclimation; ou deux semaines d&#39;exercice volontaire sur une roue en cours d&#39;exécution utilisé par les souris logés individuellement. Dans chaque protocole d&#39;exercice, on peut mesurer le flux de autophagy par microscopie à fluorescence et une ana...

l&#39;activation Autophagie est bénéfique dans la prévention d&#39;un certain nombre de maladies. L&#39; une des approches physiologiques pour induire autophagy in vivo est un exercice physique. Ici, nous montrons comment activer l&#39;autophagie par l&#39;exercice aérobie et de mesurer les niveaux de l&#39;autophagie chez les souris.

Activation autophagie par exercice aérobie chez la souris

Autophagy is a lysosomal degradation pathway essential for cell homeostasis, function and differentiation. Under stress conditions, autophagy is induced ...

L'objectif général de cette expérience est d'activer physiologiquement l'autophagie chez la souris par une course forcée ou volontaire, puis de mesurer les niveaux d'autophagie dans des tissus spécifiques. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés sur l'autophagie, en particulier sur la manière dont l'autophagie et son activation contribuent aux effets bénéfiques induits par l'exercice aérobie. Le principal avantage de cette technique est que l'exercice physique constitue un moyen rapide de moduler l'autophagie in vivo chez la souris.Pour cette expérience, commencez avec des souris C57 black six âgées de huit à douze semaines, porteuses d'un transgène permettant de détecter l'autophagie induite par l'exercice in vivo, connu sous le nom de GFP-LC3. Pour plus de détails sur l'utilisation des tapis roulants pour souris, consultez la publication JoVE suivante. Réglez le stimulus électrique du tapis roulant sur une intensité faible.Acclimatez les souris à un tapis roulant ouvert incliné à dix degrés lors de leurs deux premières séances. Le premier jour, faites courir les souris pendant cinq minutes à une vitesse de huit mètres par minute. Le deuxième jour, faites-les cour

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Biology

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Une méthode d’évaluation de l’endurance à l’effort chez des souris de laboratoire sans l’utilisation d’une grille de choc est démontrée. Cette méthode est un raffinement humain qui peut réduire les effets confondants du stress sur les paramètres expérimentaux.

Évaluation des murin exercice d&#39;endurance sans l&#39;utilisation d&#39;une grille de choc: une alternative à l&#39;exercice forcé

L'autophagie active est associée à la régénération musculaire productive, ce qui est essentiel pour l'activation des cellules souches musculaires (MuSC). Ici, nous fournissons un protocole pour la détection in situ de LC3, un marqueur autophagique dans les muSCs MyoD-positives de sections de tissu musculaire à partir de souris témoins et blessées.

Coloration immunofluorescente in situ de l&#39;autophagie dans les cellules souches musculaires

Formation intensive en hypoxie est un protocole qui a fait ses preuves pour induire des adaptations vasculaires potentiellement bénéfiques chez certains patients et d’améliorer des athlètes répètent capacité de sprint. Ici, nous avons testé la faisabilité des souris de formation à l’aide du protocole et d’identifier ces adaptations vasculaires utilisant ex vivo évaluation de la fonction vasculaire.

L’exercice Supramaximal intensité hypoxique et évaluation de la fonction vasculaire chez la souris

Courte séance (≤ 10 min) de haute formation intervalle d’intensité (HIIT) émerge comme une alternative aux modalités d’exercice plus longtemps, mais les variantes plus courtes sont rarement modélisés dans les études animales. Ici, nous décrivons une 10 min, 3 jours par semaine, protocole HIIT tapis de course en montée qui améliore les performances physiques chez les mâles et femelles âgés de souris.

Courte séance haute intensité Interval Training et évaluation de tapis de course chez les souris âgées

Cette procédure décrit un modèle d’entraînement de résistance de roue à charge progressive traduisible chez la souris. Le principal avantage de ce modèle d’entraînement en résistance est qu’il est entièrement volontaire, réduisant ainsi le stress pour les animaux et le fardeau du chercheur.

Un modèle de roue de roulement simple et peu coûteux pour l’entraînement progressif en résistance chez la souris

Le présent protocole décrit l’induction de l’autophagie dans le corps adipeux larvaire de Drosophila melanogaster via l’épuisement des nutriments et analyse les changements dans l’autophagie à l’aide de souches de mouches transgéniques.

Analyse de l’autophagie induite par la famine dans le corps adipeux larvaire de Drosophila melanogaster

Cet article présente les réponses morphométriques et les résultats de performance d’entraînement d’un protocole d’entraînement par intervalles à haute intensité (HIIT) dans un modèle de rat Sprague-Dawley d’obésité induite par l’alimentation. Le but de ce protocole était de maximiser l’intensité de l’exercice et de déterminer les réponses physiologiques au HIIT chez les rats maigres et obèses.

Un modèle d’entraînement par intervalles chronique à haute intensité et d’obésité induite par l’alimentation pour maximiser l’effort d’exercice et induire des changements physiologiques chez les rats

Ce protocole fournit une méthode simple pour fabriquer des équipements d’entraînement statique pour les souris. L’appareil maintient la contraction isométrique musculaire des membres des souris afin de vérifier l’effet d’intervention de l’exercice traditionnel sur le diabète de type 2 (DT2) et fournit une nouvelle thérapie par l’exercice pour le traitement clinique du DT2.

Méthode d’entraînement en force statique pour les souris diabétiques de type 2

Cette vidéo montre une approche pour étudier l'environnement contrôlé de dégradation des tissus des plantes lignocellulosiques par des champignons aérobies. La capacité de contrôler les sources de nutriments et d'humidité est un des principaux avantages de l'agar-bloc de microcosmes, mais l'approche donne souvent des résultats mitigés. Nous abordons les pièges critique pour le rendement reproductible, de faible variabilité des résultats.

Agar-Block microcosmes pour la décomposition des tissus végétaux contrôlés par des champignons aérobie

Ce protocole permet chercheurs se sont concentrés sur l'exercice et des sciences du sport afin de déterminer la contribution relative des trois différents systèmes énergétiques de la dépense énergétique totale au cours d'une grande variété d'exercices.

Détermination de la contribution des systèmes d&#39;énergie pendant l&#39;exercice

Découvrez comment activer l'autophagie par exercice aérobie chez la souris C57BL/6. Cette méthode permet de mesurer les niveaux d'autophagie dans les tissus spécifiques et d'étudier ses bienfaits physiologiques.

Activation autophagie par exercice aérobie chez la souris

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