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DOI: 10.3791/55145-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
Nous décrivons une méthode utilisant une irradiation périphérique cible pour induire le comportement de la fatigue chez les souris. La dose d'irradiation non létale choisie conduit à une réduction de la semaine de l'activité de roue en cours d'exécution volontaire.
L’objectif global de cette procédure est de mesurer le comportement semblable à la fatigue induit par l’irradiation périphérique. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés sur la fatigue et, en particulier, la fatigue liée à l’irradiation. Par exemple, il peut être utilisé pour explorer les différents rôles du système immunitaire et du système nerveux central dans la fatigue après irradiation.
Le principal avantage de cette technique est qu’elle utilise spécifiquement l’irradiation périphérique pour affecter le comportement à la fatigue essentiellement induit. Commencez par randomiser les souris dans des groupes de contrôle irradié simulé ou irradiés. Ensuite, identifiez les souris mâles de cinq semaines par tatouage de queue et attribuez chaque souris à une cage individuelle ventilée standard.
Laissez les souris s’acclimater à leur cage pendant au moins trois jours de plus, en manipulant chaque souris doucement pendant une période de trois minutes par jour. Ensuite, introduisez les souris dans des cages individuelles et volontaires de course de roues, chacune équipée d’une roue de course reliée à un compteur électronique pour un enregistrement continu. Lancez l’enregistrement de VWRA via l’interface du logiciel de l’ordinateur.
Réglez les intervalles d’enregistrement sur une heure et la durée sur au moins cinq jours. Enfin, après cinq jours, arrêtez l’enregistrement VWRA via l’interface logicielle et renvoyez les souris dans leurs cages standard sans roues en marche. Après avoir anesthésié la souris, confirmez que l’anesthésie a été efficace avec un pincement de l’orteil.
Utilisez une pommade sur les yeux pour prévenir la sécheresse. Ensuite, transférez la souris anesthésiée dans un dispositif de blindage en plomb. Disposez la souris dans le bouclier de manière à ce que seules la région inférieure de l’abdomen et du bassin soit exposée.
Ensuite, utilisez du ruban adhésif médical pour fixer la base de la queue de la souris en position dans le blindage afin de vous assurer que la position ne change pas pendant l’irradiation. Si la souris fait partie du groupe d’irradiation, délivrez 800 centigray à un débit de dose d’environ 110 centigray par minute. Si la souris se trouve dans le groupe témoin d’irradiation fictive, laissez-la dans l’irradiateur inactif pendant la même durée.
Une fois l’irradiation terminée, retirez la souris de l’irradiateur et du blindage et remettez-la dans sa cage standard d’origine. Surveillez continuellement la souris jusqu’à ce qu’elle ait repris une conscience suffisante pour maintenir la décubitus sternal. Après trois jours consécutifs d’irradiation, transférez les souris dans leurs cages VWRA individuelles.
Enfin, pour capturer la fatigue induite par les rayonnements, enregistrez VWRA pendant 15 jours. L’effet a été significatif pendant les sept premiers jours après la radiation, la distance moyenne la plus basse se produisant le troisième jour après la radiation. Ici, la distribution de la variation de la VWRA avant et après l’irradiation est montrée.
Alors que la majorité des souris testées présentaient des symptômes semblables à ceux de la fatigue, un petit nombre de souris présentaient peu de changement, voire une augmentation, de la VWRA. Lors de la tentative de cette procédure, il est important de s’assurer que les souris sont complètement anesthésiées pendant l’irradiation, car tout mouvement peut affecter le ciblage et le dosage de l’irradiation. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser l’irradiation ciblée périphérique pour induire un comportement semblable à celui de la fatigue chez les souris.
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