11 juin 2017
La recherche sur la neurotoxicité du développement induite par l'anesthésie (AIDN) s'est concentrée sur les rongeurs, qui ne sont pas largement applicables aux humains. Les modèles de primates non humains sont plus pertinents, mais ils sont coûteux et difficiles à utiliser pour l'expérimentation. Le porcelet, en revanche, est un modèle animal cliniquement pertinent, idéal pour l'étude de la neurotoxicité anesthésiante.
L’objectif global de cette procédure expérimentale est d’évaluer les effets des anesthésiques sur le cerveau néonatal dans un modèle translationnel de porcelet cliniquement pertinent. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la neurotoxicité induite par l’anesthésie, telles que la façon dont la toxicité se produit et les changements développementaux qui accompagnent cette toxicité. Le principal avantage de cette technique est qu’elle fournit un modèle animal pertinent sur le plan translationnel pour l’étude de la neurotoxicité développementale induite par l’anesthésie, dans lequel l’homéostasie physiologique est maintenue tout au long de l’expérimentation.
Pendant l’induction de l’anesthésie et tout au long de la procédure, surveillez les éléments suivants : oxymétrie de pouls, pression artérielle non invasive, électrocardiographie et température. L’étape la plus critique au cours de cette procédure est le maintien de l’homéostasie physiologique. Cela comprend la surveillance, la gestion de la température, la ventilation mécanique et l’analyse chimique du sang.
Pour préparer le porcelet à la chirurgie, placez d’abord un cathéter intraveineux périphérique de calibre 24 dans la veine marginale de l’oreille. Réchauffez le porcelet avec de l’air pulsé chauffé. Surveillez sa température à l’aide d’un thermomètre rectal et injectez continuellement du dextrose contenant du liquide isotonique à un taux d’entretien.
Ensuite, mettez le porcelet en position couchée dorsale pour une intubation trachéale. Ensuite, vaporisez les cordes vocales avec 0,5 millilitre de lidocaïne à 2 % pour prévenir les spasmes pendant l’intubation, puis avancez un tube trachéal à ballonnet de trois millimètres dans la trachée. Fixez le tube, puis vérifiez les bruits respiratoires bilatéraux à l’aide de l’auscultation thoracique avec un stéthoscope et vérifiez la présence de dioxyde de carbone en fin de marée prolongée.
Ensuite, appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux. Juste avant de commencer la chirurgie, administrez un antibiotique à large spectre par voie intraveineuse périphérique pour prévenir l’infection du site opératoire. Maintenant, stérilisez les deux aines à l’aide d’au moins deux gommages à la chlorhexidine pour assurer un champ stérile approprié.
Demandez au personnel de la chirurgie de porter des casquettes, des masques, des gants et des lunettes de protection. Ensuite, drapez l’animal. Pour commencer, palpez le pouls fémoral au niveau du pli inguinal.
Et puis, à l’aide d’un scalpel, faites une incision craniocaudale superficielle de 1,5 centimètre. Ensuite, faites une dissection émoussée entre les deux têtes du muscle gracilis. Maintenant, localisez le faisceau neurovasculaire fémoral.
Il se trouve généralement entre les deux muscles. Ensuite, à l’aide d’anses vasculaires ou d’attaches en soie, isolez l’artère à l’extrémité proximale et distale. Ensuite, à l’aide de la boucle à l’extrémité proximale, tirez l’artère jusqu’au niveau de la peau distalement et exercez une traction sur la liaison proximale pour interrompre la circulation sanguine.
Tout en maintenant la traction, utilisez des ciseaux de ténotomie pour faire une petite artériotomie. Ensuite, avancez le cathéter ou le tube en polyéthylène directement dans le vaisseau. Le retour sanguin doit être observé immédiatement.
Maintenant, fixez et fixez immédiatement un cathéter connecté à un transducteur de pression. Ensuite, couvrez l’incision terminée avec de la gaze stérile et rincez le cathéter avec une solution saline normale. Tout au long de l’exposition à l’anesthésique, surveillez les signes vitaux du porcelet.
Recherchez des perturbations qui pourraient indiquer une hypotension, une arythmie, une hypo ou une hyperthermie, ou une hypoxie. Au moins une fois par heure pendant l’expérience, prélevez un échantillon de sang artériel du cathéter de l’artère fémorale. Utilisez ensuite un système d’analyse automatisé pour collecter les valeurs sanguines de l’échantillon.
Après une exposition suffisante à l’anesthésique, retirez le cathéter de l’artère fémorale et attachez soigneusement la suture de soie vasculaire proximale pour obstruer définitivement l’artère fémorale et prévenir les saignements. Ensuite, irriguez l’incision avec 10 à 20 millilitres de solution saline pour aider à prévenir l’infection. Une fois l’hémostase complète confirmée, fermez l’incision à l’aide d’une suture en soie 3-0 selon un simple motif interrompu.
Maintenant, infiltrez la plaie avec de la bupivacaïne et de l’épinéphrine pour contrôler la douleur. Enduisez ensuite l’incision d’un adhésif chirurgical stérile, arrêtez l’anesthésique et laissez le porcelet se réveiller. 40 porcelets mâles ont été étudiés.
Entre le groupe témoin et le groupe expérimental, il n’y avait pas de différence significative en ce qui concerne leur âge ou leur poids. Tous ont fait l’objet d’une surveillance complète pendant la procédure et tous l’ont bien tolérée. Les valeurs moyennes de laboratoire lors de l’expérimentation dans le groupe isoflurane illustrent la cohérence interne et la reproductibilité du procédé.
La cohérence a été observée sur une période de deux ans avec les données regroupées de différents opérateurs. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser un modèle de porcelet translationnel physiologiquement approprié pour répondre à presque toutes les questions de recherche pédiatrique préclinique. N’oubliez pas que travailler avec des agents anesthésiques peut être dangereux et que des précautions telles que le piégeage approprié des gaz anesthésiques doivent toujours être prises lors de l’exécution de cette procédure.
Cette étude examine les effets des anesthésiques sur le cerveau néonatal en utilisant un modèle de porcelet pertinent sur le plan clinique. La recherche vise à comprendre la neurotoxicité développementale induite par l'anesthésie et ses implications pour l'anesthésie pédiatrique.
Le modèle du pourceau constitue un système translationnellement pertinent pour évaluer la neurotoxicité développementale induite par les anesthésiques, comblant ainsi une lacune critique dans l'évaluation préclinique de la sécurité pédiatrique. En maintenant une homéostasie physiologique tout au long de l'expérimentation, ce modèle permet une interrogation mécanistique fiable des effets des anesthésiques sur le cerveau en développement. Cela favorise une détection prédictive des risques en phase précoce de découverte, en précisant les voies biologiques associées aux résultats neurodéveloppementaux, et en éclairant les décisions de poursuite ou d'abandon dans les pipelines de composés actifs sur le système nerveux central.
La méthode s'intègre aux flux de travail de la phase de découverte précoce en permettant le test d'hypothèses sur des composés anesthésiques dans un modèle néonatal physiologiquement stable, soutenant directement l'identification de candidats prometteurs par une réduction des risques mécanistiques.