24 avril 2017
tests de comportement est la norme d'or pour la détermination des résultats suite à une lésion du cerveau, et peut identifier la présence de troubles du développement chez les nourrissons et les enfants. réflexes sont un indicateur du développement neurologique précoce de ces anomalies. Une foule de tests de réflexes de développement facilement accompli chez les rongeurs du nouveau-né ont été mis au point et décrit ici.
L’objectif global de cette méthodologie de réflexe néonatal du rat est d’apprendre à effectuer ces tâches rapidement, avec précision et de manière comparable. Cette méthode peut répondre à des questions clés dans le domaine des troubles du développement nerveux tels que la paralysie cérébrale. Le principal avantage de cette technique est qu’elle offre un moyen de tester les réflexes de développement précoces chez les ratons nouveau-nés.
Comme les humains, les rongeurs nouveau-nés ont des réflexes de développement précoces qui offrent une fenêtre sur le développement ultérieur. Les personnes qui ne connaissent pas cette méthode auront du mal car les réflexes se manifestent rapidement et peuvent être difficiles à marquer. Il est important d’être aussi cohérent que possible.
Les implications de cette technique s’étendent à la thérapie et au diagnostic de la paralysie cérébrale et des troubles du développement. La détermination des comportements réflexes est l’étalon-or pour la détermination et l’efficacité des interventions thérapeutiques. La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car les étapes sont difficiles à apprendre par écrit.
Pour commencer, acclimatez les rats à l’environnement et à la manipulation humaine comme décrit dans le protocole de texte d’accompagnement. Une fois acclimatés, accouplez les rats pour produire une portée de chiots à tester. À partir du troisième jour postnatal, transférez les chiots dans une pièce calme à une heure constante chaque jour.
Laissez-les s’acclimater pendant au moins une heure avant d’effectuer une série de tests de réflexe neurodéveloppemental. Dans la pièce, installez une lampe chauffante ou un coussin chauffant pour maintenir la température corporelle du chiot à 36,5 degrés Celsius. Enregistrez également le poids du chiot chaque jour.
Ensuite, installez une caméra vidéo avec une vitesse d’obturation d’au moins 1/1000e de seconde pour analyser les tests reflex image par image. Positionnez la caméra de manière à ce qu’elle soit directement au-dessus ou à côté du bébé rat et du matériel de test pendant chaque test. Pour chacun des tests suivants, effectuez le test chaque jour jusqu’à ce que le chiot soit capable d’effectuer la tâche pendant deux jours consécutifs.
La date de la première occurrence est la date qui doit être enregistrée pour la quantification des données. À partir du troisième jour postnatal, effectuez le test du réflexe de préhension des membres antérieurs. Pour ce test, placez une tige émoussée contre la paume de chacune des pattes avant du chiot, une à la fois, et appliquez manuellement une légère pression.
La pression doit légèrement déplacer la patte avant pour s’assurer que le contact est établi et que les chiots peuvent sentir la tige. La préhension apparaîtra comme la flexion de tous les doigts autour de la tige. L’acquisition réussie de ce réflexe se produit lorsque les deux pattes avant saisissent la tige pendant deux jours consécutifs.
Ensuite, placez une tige émoussée contre la plante de chaque patte arrière et appliquez une légère pression manuellement pour effectuer le test de réflexe de préhension des membres postérieurs. La légère pression doit légèrement déplacer la patte arrière pour s’assurer que le contact est établi et que les chiots peuvent sentir la tige. La préhension réussie de la tige se manifeste par une flexion des doigts autour de la tige.
L’acquisition de ce réflexe se produit lorsque les deux pattes arrière saisissent la tige pendant deux jours d’affilée. Également à partir du troisième jour postnatal, effectuez le test du réflexe de redressement. Pour ce test, tenez fermement le chiot en position couchée, de sorte que les quatre pattes soient droites.
Relâchez le chiot et démarrez immédiatement la minuterie. Le redressement est réalisé lorsque le chiot est capable de se retourner ou de se retourner sur les quatre pattes et que chaque patte est perpendiculaire au corps. Donnez à chaque chiot un maximum de 15 secondes pour atteindre cet objectif.
À partir du quatrième jour postnatal, effectuez le test réflexe de placement des membres postérieurs. Pour ce test, tenez le chiot verticalement en l’air par le torse. Caressez doucement le dos de la patte arrière avec une surface émoussée, comme le bord d’une table.
Un réflexe de placement correct est lorsque le petit rat retire la patte postérieure stimulée, suivie d’un placement de la patte arrière vers le bas sur cette surface. Également à partir du quatrième jour postnatal, effectuez le test d’évitement de la falaise. Pour ce test, placez le petit rat au bord d’une surface plane, de sorte que les pattes avant et le museau du petit soient sur le bord.
Le résultat correct est une réponse protectrice où le petit rat se détourne du bord de la falaise. Commencer l’évaluation de la marche le sixième jour postnatal. Pour ce test, placez les chiots au centre d’un cercle de 15 centimètres de diamètre et laissez-les s’éloigner du cercle pendant 30 secondes.
Une démarche réussie est effectuée lorsque le petit rat est capable de déplacer les deux pattes avant à l’extérieur du cercle en moins de 30 secondes. Commencer l’analyse du sursaut auditif le 10e jour postnatal. Ici, quelque chose, comme une cloche, capable de produire un bruit fort, est nécessaire.
Placez la cloche directement sur le chiot. Sonnez la cloche, puis évaluez si une réaction de sursaut est présente ou non. Une réponse de sursaut positive est observée lorsque le chiot affiche un mouvement saccadé pour s’éloigner du son.
À partir du 12e jour postnatal, placez les chiots sur une surface ouverte non glissante et observez la posture du chiot lorsqu’il se déplace. Une posture immature se traduit par une traînée de l’abdomen lors des mouvements et un pointage perpendiculaire des pattes avant et arrière par rapport au corps. Une posture mature est acquise lorsque le chiot peut soulever l’abdomen de la surface et que les pattes avant et arrière sont pointées droites ou parallèles au corps lorsqu’elles se déplacent.
Également à partir du 12e jour postnatal, commencez à observer les paupières du chiot. Notez le jour où les deux paupières s’ouvrent. Le 14e jour postnatal, commencez le test de redressement accéléré.
Pour ce test, placez le chiot en position couchée à 30,48 centimètres au-dessus d’une plate-forme d’atterrissage en mousse. Laissez tomber le chiot et observez sa capacité à se redresser. Un bon redressement fait référence au moment où le chiot est capable de se retourner en position couchée et d’atterrir sur ses pattes.
Les nouveau-nés exposés à l’inflammation in utero sont nés significativement plus petits que les témoins. La supplémentation alimentaire avec des pousses de brocoli a permis d’augmenter le poids à la naissance de ces chiots. Avec le poids à la naissance, le test du réflexe neurodéveloppemental est une mesure prédictive du développement et de la maturation corticaux anormaux, ce qui peut être significatif dans des circonstances où la neuropathologie manifeste n’est pas évidente.
Après la naissance, l’examen de la mise en place du réflexe néonatal des membres postérieurs dans ces groupes a montré un retard significatif dans l’acquisition de ce réflexe chez les petits exposés à l’inflammation in utero par rapport aux témoins. Une supplémentation alimentaire avec des pousses de brocoli a empêché le retard. Les résultats du test d’évitement de la falaise du réflexe néonatal ont révélé que les petits exposés à l’inflammation in utero sont considérablement retardés dans l’acquisition d’une réponse protectrice.
Encore une fois, la consommation de pousses de brocoli a permis d’éviter des retards importants. Ce même résultat a été observé à la suite de l’examen de la démarche réflexe néonatale. Au cours de cette procédure, d’autres méthodes telles que l’enregistrement quotidien du poids peuvent être effectuées afin de répondre à des questions supplémentaires telles que le taux de croissance quotidien, la croissance de rattrapage, la gravité de la blessure et l’effet du retard de croissance.
Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine des neurosciences pour explorer les tests de réflexe développemental chez les rongeurs néonatals. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’effectuer des tests de réflexe de développement précoce chez les ratons nouveau-nés. De plus, vous devez comprendre l’importance des réflexes comportementaux précoces, car ils fournissent un biomarqueur précoce de la blessure et de l’effet de l’intervention thérapeutique.
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Cet article présente une méthodologie permettant d'évaluer les réflexes précoces du développement chez les rats néonatals, ce qui peut fournir des indices sur d'éventuels troubles du développement. La technique vise à faciliter un test précis et reproductible de ces réflexes, essentiels pour comprendre les anomalies du développement nerveux.
Le test des réflexes neurodéveloppementaux chez les rats nouveau-nés fournit un biomarqueur précoce permettant de détecter les lésions cérébrales et d'évaluer les interventions thérapeutiques dans les modèles précliniques. Cette approche soutient la réduction des risques mécanistiques en reliant les phénotypes comportementaux aux résultats neurodéveloppementaux, offrant ainsi une confiance prédictive dans la validation des cibles pour les troubles du système nerveux central. La méthodologie améliore la continuité translationnelle du stade de découverte à celui des études précliniques en proposant des paramètres de réflexe quantifiables et reproductibles.
La méthode s'intègre dans le continuum de la découverte, de la biologie précoce à l'identification de composés candidats, en fournissant un phénotypage comportemental qui complète les évaluations moléculaires et histologiques dans le développement de médicaments pour le système nerveux central.