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DOI: 10.3791/55315-v
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Le cil primaire est fondamentalement important dans la prolifération des cellules progénitrices de neurones, la différenciation neuronale et la fonction neuronale adulte. Nous décrivons ici une méthode pour étudier ciliogenèse et la traite des protéines de signalisation dans les cellules à cilia souches / progénitrices de neurones et les neurones différenciés en utilisant des cultures de neurosphères primaires.
L’objectif global de cette procédure est d’utiliser des méthodes de culture basées sur la neurosphère pour les cellules neurales, souches et progénitrices primaires afin d’étudier la biogenèse et le trafic du cil primaire. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des cils primaires, telles que la biogenèse des cils et le trafic des molécules de cils vers les cils primaires. Dans les cellules souches neurales primaires, les progéniteurs neuraux et les neurones.
Le principal avantage de cette technique est que nous pouvons utiliser les critères cellulaires primaires des cellules souches neurales, des progéniteurs neuraux et des neurones pour analyser la biogenèse et les voies ciliaires dans le contexte du cil primaire. En général, les personnes qui ne connaissent pas cette méthode auront du mal, car la culture de cellules souches neurales est techniquement difficile pour les débutants. Nous montrerons qu’une démonstration de cette méthode est essentielle, car la dissection du ventricule latéral et des étapes telles que la culture des neurosphères et la quantification des cils primaires sont facilement apprises en observant les étapes critiques.
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