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DOI: 10.3791/55378-v
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La méiose est le processus de développement par lequel les gamètes sont constituées par une seule tournée de réplication de l’ADN et de deux cycles successifs de la ségrégation des chromosomes. La méiose chez les mammifères peut être examinée en utilisant une technique pour préparer les tartinades méiotique. Ici, nous démontrons une méthode de préparation des étalements de noyaux de spermatocytes de souris.
L’objectif global de ce protocole est de préparer des propagations de chromosomes méiotiques à partir de spermatocytes de souris pour permettre l’étude de la méiose masculine. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la biologie de la reproduction sur les mécanismes qui régulent la recombinaison méiotique et la ségrégation des chromosomes. Le principal avantage de cette technique est qu’elle produit une abondance de noyaux de spermatocytes à différents stades de la méiose, en particulier les cellules subissant les sous-stades de la prophase 1.
La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car une technique utilisée pour répartir les noyaux de spermatocytes sur des lames est difficile à transmettre par écrit. Commencez par peser des testicules appariés prélevés sur des souris mâles d’âge postnatal à adulte et placez les échantillons pesés dans une boîte de Pétri contenant quelques gouttes de tampon d’extraction hypotonique froid. Pour prélever les tubules, utilisez les pointes d’une pince incurvée pour maintenir un testicule contre le fond de la boîte et utilisez une lame de rasoir à bord droit pour faire une petite incision verticale à mi-chemin à travers la capsule du testicule.
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