23 janvier 2018
Tests comportementaux sont utilisé dans les essais précliniques pour évaluer les effets phénotypiques d’une maladie ou un traitement sur le bien-être de l’animal. Afin d’évaluer globalement le fonctionnement moteur, nous avons sélectionné les essais de locomotion générale, la force musculaire et de coordination : plein champ test, le test de la maille et le test rotarod, respectivement.
L'objectif général de cette batterie de tests comportementaux est d'observer la locomotion générale, la force musculaire et la coordination chez les souris. Ces méthodes peuvent aider à répondre à des questions clés concernant la mise en œuvre de différents traitements dans de nombreux essais précliniques, comme l'effet bénéfique des traitements sur la motilité chez les souris. Le principal avantage de cette technique est que plusieurs facettes et dimensions du mouvement sont mesurées et évaluées par cette batterie de tests comportementaux.
La procédure sera démontrée par Meera, une étudiante en master dans notre laboratoire. Commencez par allumer le programme du test du champ ouvert et connectez l'ordinateur à la caméra ou à la boîte du champ ouvert. Lancez le logiciel SmartWare sélectif via l'icône Open Field.
Sélectionnez OK. Le cas échéant, choisissez la source du convertisseur numérique-analogique dans les options de la caméra. Suivez les instructions pour régler les dimensions appropriées afin de couvrir la boîte du champ ouvert.
Ensuite, assurez-vous que la souris est détectée dans les limites du champ ouvert en étalonnant la partie appropriée du logiciel. Cliquez sur « temps » pour prédéfinir une durée d'essai pour les souris. Dans ce cas, réglez sur cinq minutes.
Saisissez les sujets en cliquant et en indiquant le nom approprié pour les fichiers. Par exemple, phase un, session un. Ensuite, placez une souris au centre des champs ouverts et cliquez sur l'icône de démarrage pour lancer l'enregistrement par le programme.
Après cinq minutes, observer le programme qui passe automatiquement au sujet suivant. Dans ce cas, retirer la souris qui a terminé le test et placer le sujet suivant dans le champ ouvert du programme. Ensuite, cliquer sur démarrer.
Enfin, pour analyser les données, cliquez sur l'icône d'analyse située en haut à droite de l'écran. Cliquez à nouveau sur analyser, puis sur rapport récapitulatif. Commencez par placer une souris au centre d'une maille.
Et retournez le treillis à au moins 20 centimètres au-dessus d'un récipient transparent. Une fois retourné, déclenchez le chronomètre. Enregistrez le temps de latence nécessaire pour que la souris tombe du treillis.
Si la souris ne tombe pas dans les 60 secondes, attribuez-lui un score de 60 secondes et ne réalisez aucun autre essai. Ensuite, laissez la souris se reposer pendant au moins cinq minutes. Allumez ensuite le rotarod et l'ordinateur.
Et assurez-vous qu'ils sont correctement connectés pour l'enregistrement des données. Pour exécuter le protocole accéléré, utilisez les codes sur le clavier pour régler la durée souhaitée sur le rotarod à 300 secondes, le nombre de voies à cinq, la vitesse de départ et la vitesse finale à quatre et quarante tours par minute, respectivement, et la durée d'accélération à 300 secondes. Ensuite, configurez l'appareil en mode avant pour souris.
Veillez à ce que toutes les voies magnétisées soient équilibrées avant de commencer l'essai, et placez une souris dans chaque voie du rotarod. Ensuite, appuyez sur démarrer pour lancer le programme. Au fur et à mesure que les souris tombent, retirez-les rapidement de leurs voies afin qu'elles n'entravent pas les autres voies.
Enfin, laisser les souris se reposer pendant un intervalle inter-essai de 10 minutes. Pendant cet intervalle, commencer l'essai pour le prochain groupe de souris. Ces données démontrent l'utilisation du rotarod comme moyen d'observer le comportement des souris traitées par rapport aux souris hétérozygotes normales.
La divergence des deux groupes à 40 semaines indique le début d'une coordination réduite chez le groupe traité par rapport aux témoins normaux. Lors des évaluations comportementales mensuelles, les souris traitées ont présenté des performances similaires à celles des témoins hétérozygotes normaux aux tests du champ ouvert, du rotarod et du treillis. À 12 semaines, les animaux traités surpassent les animaux non traités en durée de déplacement lors du test du champ ouvert et en latence de chute lors du test du treillis.
Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en deux heures et demie pour traiter 20 souris selon le protocole, à condition d'être exécutée correctement. Lors de la réalisation de cette procédure, il est important de bien nettoyer l'appareillage entre chaque essai sur les souris, afin d'éviter toute contamination croisée entre les souris et les cages. Après cette procédure, d'autres méthodes, telles que des analyses comportementales et biochimiques supplémentaires, peuvent être effectuées afin de répondre à des questions complémentaires concernant l'efficacité du traitement, comme des dosages de biodistribution, des dosages d'activité enzymatique, des analyses histologiques ou des tests de mémoire et d'apprentissage.
Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans les domaines de la psychologie, puis des neurosciences, pour explorer l'effet d'une variété de traitements et de conditions sur des organismes modèles. Après avoir visionné la vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la manière d'effectuer des tests comportementaux évaluant la locomotion générale, la force musculaire et la coordination. N'oubliez pas que le travail avec des souris peut présenter des risques, et que des précautions telles que le port d'équipements de protection individuelle adéquats doivent toujours être prises lors de la réalisation de cette procédure.
Consultez la transcription complète et accédez à des milliers de vidéos scientifiques
Cet article présente une batterie de tests comportementaux conçus pour évaluer la locomotion générale, la force musculaire et la coordination chez les souris. Ces tests sont essentiels pour évaluer les effets de traitements dans des essais précliniques.
Les tests comportementaux quantitatifs chez la souris permettent une évaluation robuste de la fonction motrice, de la force musculaire et de la coordination, fournissant des critères phénotypiques essentiels pour les études précliniques d'efficacité. Cette batterie multidimensionnelle soutient la continuité translationnelle en reliant les interventions moléculaires aux résultats fonctionnels, orientant directement les décisions d'avancement ou d'abandon en découverte précoce de médicaments. L'intégration de paramètres objectifs de locomotion et de coordination améliore la fiabilité prédictive et réduit les risques liés au développement de portefeuilles ciblant le système neuromusculaire et le système nerveux central.
Cette batterie comportementale se situe à l'interface de la biologie exploratoire et de l'efficacité préclinique, reliant la validation de cibles à des mesures d'issues translationnelles.