23 janvier 2018
Tests comportementaux sont utilisé dans les essais précliniques pour évaluer les effets phénotypiques d’une maladie ou un traitement sur le bien-être de l’animal. Afin d’évaluer globalement le fonctionnement moteur, nous avons sélectionné les essais de locomotion générale, la force musculaire et de coordination : plein champ test, le test de la maille et le test rotarod, respectivement.
L’objectif global de cette batterie de tests comportementaux est d’observer la locomotion générale, la force musculaire et la coordination chez la souris. Ces méthodes peuvent aider à répondre à des questions clés sur la mise en œuvre de différents traitements dans plusieurs essais précliniques, tels que le bénéfice des résultats du traitement sur la motilité chez la souris. Le principal avantage de cette technique est que de multiples facettes et dimensions du mouvement sont mesurées et évaluées par cette batterie de tests comportementaux.
Meera, étudiante en master dans notre laboratoire, fera la démonstration de la procédure. Commencez par activer le programme de test en champ ouvert et en connectant l’ordinateur à l’appareil photo ou au boîtier à champ ouvert. Démarrez le logiciel SmartWare sélectif dans l’icône Champ ouvert.
Sélectionnez OK. Le cas échéant, choisissez la source du convertisseur analogique numérique dans les options de l’appareil photo. Suivez les instructions pour définir les dimensions appropriées pour couvrir la boîte à champ ouvert.
Ensuite, assurez-vous que la souris est détectée dans les limites du champ ouvert en calibrant la partie appropriée du logiciel. Cliquez sur le temps pour prédéfinir une durée de test des souris. Dans ce cas, réglez cinq minutes.
Entrez les objets, en cliquant et en écrivant le nom approprié pour les fichiers. Par exemple, la première phase, la première session. Ensuite, placez une souris au centre des champs ouverts et cliquez sur l’icône de démarrage pour inviter le programme à commencer l’enregistrement.
Au bout de cinq minutes, observez le programme passer automatiquement au sujet suivant. Dans ce cas, retirez la souris qui a terminé le test et placez le sujet suivant dans le champ ouvert du programme. Cliquez ensuite sur démarrer.
Enfin, pour analyser les données, cliquez sur l’icône d’analyse en haut à droite de l’écran. Cliquez à nouveau sur Analyser, puis sur Rapport récapitulatif. Commencez par placer une souris au centre d’un maillage.
Et inversez le maillage à 20 centimètres au-dessus d’un récipient transparent. Une fois inversé, démarrez le chronomètre. Enregistrez le temps de latence pendant lequel la souris tombe du maillage.
Si la souris ne tombe pas dans les 60 secondes, donnez-lui un score de 60 secondes et n’effectuez pas d’autres essais. Ensuite, laissez la souris reposer pendant au moins cinq minutes. Ensuite, allumez le rotarod et l’ordinateur.
Et assurez-vous qu’ils sont correctement connectés pour l’enregistrement des données. Afin d’exécuter le protocole accéléré, utilisez des codes sur le clavier pour régler la durée souhaitée sur le rotarode à 300 secondes, le nombre de voies à cinq, la vitesse de départ et de fin à quatre et quarante rotations par minute, respectivement, et le temps de rampe à 300 secondes. Réglez ensuite l’appareil en mode avance de la souris.
Assurez-vous que toutes les voies aimantées sont équilibrées avant de commencer l’essai et placez une souris dans chaque voie du rotarod. Appuyez ensuite sur start pour lancer le programme. Au fur et à mesure que les souris tombent, retirez-les rapidement de leurs voies pour vous assurer qu’elles ne trébuchent pas sur les autres voies.
Enfin, laissez les souris se reposer pendant un intervalle de 10 minutes. Pendant cet intervalle, commencez l’essai pour la prochaine série de souris. Ces données démontrent l’utilisation du rotarode comme moyen de voir comment les souris traitées se comportent par rapport aux souris hétérozygotes normales.
La divergence des deux groupes à 40 semaines dénote le début d’une diminution de la coordination du groupe de traitement par rapport aux témoins normaux. Au cours de tests comportementaux mensuels, les souris traitées ont obtenu des résultats similaires à ceux des témoins hétérozygotes normaux, du test en plein champ, du rotarod et du test de maillage. À 12 semaines, les animaux traités surpassent les animaux non traités en ce qui concerne le temps de déplacement dans l’essai en plein champ et la latence de chute dans l’essai de maillage.
Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en deux heures et demie pour compléter 20 souris à travers le protocole, si elle est exécutée correctement. Lors de la tentative de cette procédure, il est important de ne pas oublier de nettoyer l’appareil entre chaque essai de souris, afin d’éviter d’éventuels contaminants sur les souris et les cages. Après cette procédure, d’autres méthodes telles que d’autres tests comportementaux et biochimiques peuvent être effectuées afin de répondre à des questions supplémentaires concernant l’efficacité du traitement, telles que des tests de biodistribution, des tests d’activité enzymatique, des tests histologiques ou des tests de mémoire et d’apprentissage.
Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans les domaines de la psychologie et plus tard des neurosciences pour explorer l’effet d’une variété de traitements et de conditions sur des organismes modèles. Après avoir regardé la vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’effectuer des tests de comportement pour la locomotion générale, la force musculaire et la coordination. N’oubliez pas que travailler avec des souris peut être dangereux et que des précautions telles que le port d’un équipement de protection individuelle approprié doivent toujours être prises lors de cette procédure.
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Cet article présente une batterie de tests comportementaux conçus pour évaluer la locomotion générale, la force musculaire et la coordination chez les souris. Ces tests sont essentiels pour évaluer les effets de traitements dans des essais précliniques.
Les tests comportementaux quantitatifs chez la souris permettent une évaluation robuste de la fonction motrice, de la force musculaire et de la coordination, fournissant des critères phénotypiques essentiels pour les études précliniques d'efficacité. Cette batterie multidimensionnelle soutient la continuité translationnelle en reliant les interventions moléculaires aux résultats fonctionnels, orientant directement les décisions d'avancement ou d'abandon en découverte précoce de médicaments. L'intégration de paramètres objectifs de locomotion et de coordination améliore la fiabilité prédictive et réduit les risques liés au développement de portefeuilles ciblant le système neuromusculaire et le système nerveux central.
Cette batterie comportementale se situe à l'interface de la biologie exploratoire et de l'efficacité préclinique, reliant la validation de cibles à des mesures d'issues translationnelles.